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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 品系:
详见说明书
- 细胞类型:
A类
- 肿瘤类型:
详见说明书
- 供应商:
上海研生
- 库存:
34
- 生长状态:
半贴壁生长
- 年限:
详见说明书
- 运输方式:
详见说明书
- 器官来源:
详见说明书
- 是否是肿瘤细胞:
否
- 细胞形态:
淋巴母细胞样
- 免疫类型:
详见说明书
- 物种来源:
详见说明书
- 相关疾病:
详见说明书
- 组织来源:
详见说明书
- 英文名:
抗人IgE小鼠杂交瘤细胞;2G9
- 规格:
株
细胞名称 抗人IgE小鼠杂交瘤细胞;2G9品牌
形态特性 淋巴母细胞样
生长特性 半贴壁生长
特征特性 可产生单克隆抗体,抗原为人IgE。
培养条件 RPMI 1640 (w/o Hepes) 10%FBS
传代方法 保持细胞密度在1×105~1×106 cells/ml之间,每周换液2~3次
传代情况 不详
冻存条件 基础培养基+8%DMSO+20%FBS
支原体检测 阴性
STR -
同工酶
染色体
抗人IgE小鼠杂交瘤细胞;2G9品牌培养方法:
收到细胞后,在倒置显微镜下观察整个细胞生长情况,如果细胞未长满,用75%酒精喷洒整个瓶消毒后放到超菌台内,严格无菌操作,打开细胞培养瓶,留10ml培养液继续培养。
培养实验又要开始了,科研工作者又该忙碌了,大家可能都在寻找适合自己的细胞,不用急,我们帮您掌舵,让您满意!
传代方法:细胞完全汇合时,倒掉旧液,加入消化液(0.25%胰蛋白酶+0.03%EDTA)2ml消化,显微镜下观察细胞完全脱离瓶壁分离成单个细胞后弃掉胰酶,加培养基混匀分瓶,T25瓶中加培养基至6-8ml,T75瓶加培养基至20ml,37℃,5%CO2孵箱培养。
抗人IgE小鼠杂交瘤细胞;2G9品牌培养操作
1)复苏细胞:将含有 1mL 细胞悬液的冻存管在 37℃水浴中迅速摇晃解冻,加 入 4mL 培养基混合均 匀。在 1000RPM 条件下离心 4 分钟,弃去上清液,补 加 1-2mL 培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培 养过夜(或将 细胞悬液加入 10cm 皿中,加入约 8ml 培养基,培养过夜)。第二天换液并 检查细胞密度。
2)细胞传代:如果细胞密度达 80%-90%,即可进行传代培养。
1. 弃去培养上清,用不含钙、镁离子的 PBS 润洗细胞 1-2 次。
2. 加 1ml 消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于 37℃培 养箱中消化 1-2 分钟,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分 变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养 瓶后加少量培养基终止消 化。
3. 按 6-8ml/瓶补加培养基,轻轻打匀后吸出,在 1000RPM 条件下离心 4 分 钟,弃去上清液,补加 1-2mL 培养液后吹匀。
4. 将细胞悬液按 1:2 比例分到新的含 8ml 培养基的新皿中或者瓶中。
3)细胞冻存:待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。下面 T25 瓶为类;
1. 细胞冻存时,弃去培养基后,PBS 清洗一遍后加入 1ml 胰酶,细胞变圆 脱 落后,加入 1ml 含血清的培养基终止消化,可使用血球计数板计数。
2. 4 min 1000rpm 离心去掉上清。加 1ml 血清重悬细胞,根据细胞数量加 入血 清和 DMSO,轻轻混匀,DMSO 终浓度为 10%,细胞密度不低于1x106/ml,每支冻存管冻存 1ml 细胞悬液,注意冻 存管做好标识。
3. 将冻存管置于程序降温盒中,放入-80 度冰箱,2 个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。
以下是抗人IgE小鼠杂交瘤细胞;2G9品牌的相关产品:
人 TMPRSS6 基因全长ORF克隆
人 G6PD 基因全长ORF克隆
人 PRKCG 基因全长ORF克隆
人 CDH16 基因全长ORF克隆
人 TNFSF10 / TRAIL 基因全长ORF克隆
Mouse IRX4 Gene cDNA Clone (full-length ORF Clone)
小鼠 CCNH 基因全长ORF克隆
小鼠 P53 基因全长ORF克隆
小鼠 IL1F2 / IL1B 基因全长ORF克隆
大鼠 SERPINB3A 基因全长ORF克隆
大鼠 AGPAT2 基因全长ORF克隆
食蟹猴 TNFSF10 基因全长ORF克隆
抗人IgE小鼠杂交瘤细胞;2G9品牌MK2 Inhibitor III (1 mg)1,5,6,7-tetrahydro-2-[2-(3-quinolinyl)-4-pyridinyl]-4H-pyrrolo[3,2-c]pyridin-4-one, monohydrate
(±)14-HDoHE (100 ug)(±)14-hydroxy-4Z,7Z,10Z,12E,16Z,19Z-docosahexaenoic acid; 14-hydroxy Docosahexaenoic Acid; (±)14-HDoHE
JWH 018 7-hydroxyindole metabolite (1 mg)(7-hydroxy-1-pentyl-1H-indol-3-yl)naphthalen-1-yl)-methanone; JWH 018 7-hydroxyindole metabolite
16,16-dimethyl Prostaglandin F2β (10 mg)9。beta。,11。alpha。,15R-trihydroxy-16,16-dimethyl-prosta-5Z,13E-dien-1-oic acid; 9β,16,16-dimethyl PGF2α|16,16-dimethyl PGF2β; 16,16-dimethyl Prostaglandin F2β
8-iso-15(R)-Prostaglandin F2α (500 ug)9。alpha。,11。alpha。,15R-trihydroxy-(8。beta。)-prosta-5Z,13E-dien-1-oic acid; 8-iso-15-epi PGF2α; 8-iso-15(R)-Prostaglandin F2α
5-trans Prostaglandin F2α (tromethamine salt) (5 mg)9。alpha。,11。alpha。,15S-trihydroxy-prosta-5E,13E-dien-1-oic acid, tris(hydroxymethyl)aminomethane salt; 5,6-trans PGF2α (tromethamine salt); 5-trans Prostaglandin F2α (tromethamine salt)
牛血清白蛋白V(100GM)Bovine Serum Albumin, Fraction V, Produced by heat-shock isolation; Purity of ≥ 98%; CAS Number: 9048-46-8; Store at 2-8
3-Methoxyamphetamine (hydrochloride) (10 mg)3-MA|MMA|m-MA|meta-Methoxyamphetamine; 3-methoxy-α-methyl-benzeneethanamine, monohydrochloride
Hedgehog Antagonist VIII (5 mg)Hh Antagonist VIII; N-[4-chloro-3-(trifluoromethyl)phenyl]-N’-[[3-(4-fluorophenyl)-3,4-dihydro-4-oxo-2-quinazolinyl]methyl]-urea
Clomiphene (citrate) (5 g)Clomifene|NSC 35770|Omifin; 2-[4-(2-chloro-1,2-diphenylethenyl)phenoxy]-N,N-diethyl-ethanamine 2-hydroxy-1,2,3-propanetricarboxylate (1:1)
抗人IgE小鼠杂交瘤细胞;2G9品牌注意事项
1. 收到细胞后首先观察细胞瓶是否完好,培养液是否有漏液、浑浊等现象,若有上述现 象发生请及 时和我们联系。
2. 仔细阅读细胞说明书,了解细胞相关信息,如细胞形态、所用培养基、血清比例、所 需细胞因子 等,确保细胞培养条件一致。若由于培养条件不一致而导致细胞出现问 题,责任由客户自行承担。
3. 用 75%酒精擦拭细胞瓶表面,显微镜下观察细胞状态。因运输问题贴壁细胞会有少量 从瓶 壁脱落,将细胞置于培养箱内静置培养 4~6 小时,再取出观察。此时多数细胞均 会贴壁,若细胞仍不能贴壁请用台盼蓝 染色测定细胞活力,如果证实细胞活力正常, 请将细胞离心后用新鲜培养基再次贴壁培养;如果染色结果显示细胞无活 力,请拍下 照片及时和我们联系,信息确认后我们为您再免费寄送一次。
4. 静置细胞贴壁后,请将细胞瓶内的培养基倒出,留 6~8mL 维持细胞正常培养,待细 胞汇 合度 80%左右时正常传代。
5. 请客户用相同条件的培养基用于细胞培养。培养瓶内多余的培养基可收集备用,细胞 传代时可以 一定比例和客户自备的培养基混合,使细胞逐渐适应培养条件。
6. 建议客户收到细胞后前 3 天各拍几张细胞照片,记录细胞状态,便于和 Procell 技术 部 沟通交流。由于运输的原因,个别敏感细胞会出现不稳定的情况,请及时和我们联 系,告知细胞的具体情况,以便我们 的技术人员跟踪回访直至问题解决。
7.该细胞仅供科研使用。
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文献和实验―杂交瘤技术、DNA重组技术等。 单抗的制备首先将抗原注射人小鼠体内,然后从小鼠脾脏中获得能够产生抗体的B细胞,与小鼠骨髓瘤细胞在灭活的仙台病毒或聚乙二醇的诱导下融合,再在特定的选择性培养基中筛选出杂交瘤细胞。由于杂交瘤细胞继承了双亲细胞的遗传物质,因此,它不仅具有B细胞分泌特异性抗体的能力,还有骨髓瘤细胞在体外培养条件下大量增殖的本领。由此可以获得足够数量的细胞。 单抗的制备过程 1,抗细胞表面分子的单抗 这类抗体能识别和结合表达特定膜表面分子的细胞
1975年Kohler和Milstein发现将小鼠骨髓瘤细胞与和绵羊红细胞免疫的小鼠脾细胞进行融合,形成的杂交瘤细胞既可产生抗体,又可无性繁殖,从而创立了单克隆抗体杂交瘤技术。这一技术上的突破使血清学的研究进入了一个高度精确的新纪元。 免疫细胞化学的 技术关键之一是制备特异性强、亲合力大、滴度高的特异性抗体,由于每种抗原都有几个抗原决定簇,用它免疫动物将产生对各个决定簇的抗体,即多克隆抗体。单克隆抗体则是由一个产生抗体的细胞与一个骨髓瘤细胞融合而形成的杂交廇细胞经无性繁殖而来
内或体外培养而分泌的抗体单克隆抗体(monoclonal antibody,McAb或Mab)。单克隆抗体仅针对一种抗原决定簇,具有很高的特异性。单克隆抗体通常用抗原免疫小鼠制备。将免疫的脾细胞(含产生抗体的B细胞)与小鼠肿瘤细胞融合,分离杂交瘤细胞,接种于小鼠腹腔,产生的腹水中含有浓度很高的单克隆抗体。(三)抗原抗体反应 1、可逆性 抗原与抗体结合形成抗原抗体复合物的过程是一种动态平衡,其反应式为:Ag+Ab→Ag•Ab.。抗体的亲和力(affinity)是抗原抗体间的固有结合力,可以平衡常数K
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