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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
354
- 英文名:
Rapid DNA Ligation Kit
- 保质期:
长期
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
- 保存条件:
-20℃
- 规格:
100次|500次
特别提示:包括快速DNA连接试剂盒在内,本公司的所有产品仅可用于科研实验,严禁用于临床医疗及其他非科研用途!
产品名称:快速DNA连接试剂盒
英文名称:Rapid DNA Ligation Kit
产品货号:YT028
产品规格:100次|500次
本试剂盒是百奥莱博的一种把DNA片段在短至5-10分钟内快速插入到载体中的连接试剂盒。对于双粘端DNA片段的插入仅需5-10分钟即可完成,对于双平端DNA片段的插入仅需15分钟即可完成。同时本试剂盒也可以用于其它各种常规的双链DNA连接反应。连接30分钟即可达到最佳效果,与连接过夜的效果一致。
本试剂盒可以用于PCR片段和载体的连接、酶切产物和载体的连接、linker和载体的连接、linker和linker的连接等各种双链DNA的连接。
为了获得快速高效的连接效果,本试剂盒采用了一种特殊的高活力Rapid T4 DNA Ligase以及相应的快速连接缓冲液,确保在短时间内可以获得很好的连接效果。连接30分钟和连接过夜的效果相当,通常只须连接5-10分钟即可满足常规用途。(如下图)
快速DNA连接试剂盒实测效果图。双酶切后的载体室温自连30min(A)或16℃自连过夜(D)作为阴性对照;双酶切后的载体与待插入片段室温连接10min(B)、30min(C)或者16℃连接过夜(E),随后转化细菌涂板,并于第二天取平板观察拍照。
在确保连接效果的同时,确保完成连接后不必进行任何纯化即可直接转化细菌。另外,快速连接缓冲液中已经含有ATP、镁离子等各种必需物质,无需再添加其它任何试剂。本试剂盒用于总体积为10μl的连接体系时可以进行100个连接反应,用于总体积为20μl的连接体系时可以进行50个连接反应。
注意事项:
1. 连接反应完成后即可直接转化细菌,请勿采用加热方法失活Rapid T4 DNA ligase。加热处理会导致后续的转化效率显著下降。
2. 对于载体单酶切插入外源片段的情况,需注意对载体进行脱磷处理,以避免质粒自连。
3. 快速连接缓冲液(2X)使用前一定要完全溶解并混匀,加入到连接体系后也须注意混匀。
储存条件:-20℃。
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文献和实验【交流】关于NEB的T4 DNA连接酶和快速连接试剂盒的常见问题及解答
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