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- 保存条件:
-20℃
- 保质期:
长期
- 英文名:
T4 DNA Ligase
- 库存:
840
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
北京百奥莱博专业生产销售北京T4 DNA连接酶现货,我公司供应的分子生物学试剂品类齐全,且具有优势价格,欢迎新老客户垂询订购。
名称:北京T4 DNA连接酶现货
产地:国产|进口
规格:40000U|200000U
英文名:T4 DNA Ligase
本酶可以催化粘端或平端双链DNA或RNA的5"-P末端和3"-OH末端之间以磷酸二酯键结合,该催化反应需ATP作为辅助因子。同时T4 DNA 连接酶可以修补双链DNA、双链RNA或DNA/RNA杂合物上的单链缺刻(single-strand nicks)。
用途:T4 DNA Ligase常用于DNA*(代"片")段和载体、linker或adaptor等的连接。也可以用于缺刻修复及Ligase介导的RNA检测。
来源:本T4 DNA Ligase由大肠杆菌表达,表达基因的来源为T4嗜菌体。
活性定义:One unit is defined as the amount of enzyme required to give 50% ligation of HindIII fragments of
lambda DNA in 30 min at 16℃ in 20 μl of the assay mixture containing 50 mM Tris, pH 7.5, 10 mM MgCl2, 10 mM DTT, 1 mM ATP, 25 μg/ml BSA and a 5"-DNA termini concentration of 0.12 μM (300 μg/ml)。200U等于1个Weiss unit,以Weiss unit计,本产品共200单位。
纯度:不含DNA内切酶、外切酶和磷酸酯酶,不含RNA酶,满足常规连接反应要求。
酶储存溶液:20 mM Tris, pH 7.5, 50 mM KCl, 1 mM DTT, 0.1 mM EDTA and 50% (v/v) glycerol。
10×Ligation Buffer:400 mM Tris, pH 7.8, 100 mM MgCl2, 100 mM DTT, 5 mM ATP。
失活或抑制:65℃孵育10分钟可以导致T4 DNA Ligase失活;NaCl或KCl浓度大于200mM时强烈抑制T4 DNA Ligase。

T4 DNA Ligase连接产物转化感受态后涂板LB平板的效果如上图,本品的连接产物转化感受态细菌后涂板获得的LB平板效果图。A. 双酶切后的载体自连过夜;B. 双酶切后的载体与待插入片段过夜连接。
注意事项:
1. 对于普通的转化大肠杆菌的操作,不必对连接产物进行纯化,连接产物可以直接用于转化。但用电转方法转化大肠杆菌时,通常宜先用DNA纯化试剂盒或酚氯*(代"仿")抽提方法等纯化DNA,然后再进行电转。
2. 需进行平端连接或快速连接时,推荐使用百奥莱博的快速DNA连接试剂盒(YT028/D7003)。T4 DNA Ligase可以进行平端连接,但效率较低。
3. 普通连接反应不必进行凝胶电泳观察。如果需要对于连接产物进行凝胶电泳观察,推荐先在65℃孵育10分钟使T4 DNA Ligase失活,以避免T4 DNA Ligase和DNA结合导致的条带位置迁移(band shift)。
储存条件:-20℃。
北京T4 DNA连接酶现货极具性价比,此外,我公司正火爆促销以下产品:
·STAT5凝胶迁移突变探针(10μM)
编号:YT262
英文名称:STAT5 Mutation Probe For EMSA(10μM)
规格:30μl
本探针是用于EMSA(也称gel shift)研究的STAT5 consensus oligonucleotide的突变体。可以作为EMSA探针-STAT5的阴性对照,用于EMSA结合反应中突变探针的冷竞争反应等。一个包装的突变探针,如果用于同位素标记EMSA探针的突变探针冷竞争反应,可以进行90-180个突变探针的冷竞争反应。如果用于生物素标记探针的冷竞争时,可以进行约30个冷竞争反应。
STAT5 consensus oligo的序列如下:
5"-AGA TTT CTA GGA ATT CAA TCC-3"
3"-TCT AAA GAT CCT TAA GTT AGG-5"
EMSA突变探针-STAT5中STAT5的公认的结合位点发生了突变,从而使STAT5无法和该突变探针结合。在探针冷竞争反应中,正常的标记探针和STAT5的结合的条带会被抑制;而在突变探针冷竞争反应(cold competition)中,正常的标记探针和STAT5的结合的条带不会被抑制。参考下图。

一个典型的EMSA/Gel- Shift分析图
1,阴性对照反应(标记探针);
2,常规反应(含激活的目的转录因子的核蛋白+标记探针);
3,探针冷竞争反应(含激活的目的转录因子的核蛋白+标记探针+标记探针100倍量的未标记探针);
4,突变探针的冷竞争反应(含激活的目的转录因子的核蛋白+标记探针+标记探针100倍量的未标记突变探针);
5,Super-shift反应(含激活的目的转录因子的核蛋白+标记探针+目的转录因子的特异抗体)。
注意事项:
1. 避免加热到40℃以上,温度过高会导致双链DNA探针解聚成单链。而单链无法用于EMSA研究。
2. 对于EMSA的详细操作可以参考我们的EMSA试剂盒的使用说明。
储存条件:-20℃,有效期一年。
北京T4 DNA连接酶现货关键词:YT029,T4 DNA连接酶,T4 DNA Ligase
·Western洗涤液(10X)
编号:YT069
英文名称:Western Wash Buffer(10X)
规格:100ml|10×100ml
本品可以用于Western时一抗或二抗孵育后的洗涤。适当的洗涤可以降低背景,增强信噪比。按照每张膜洗涤需要5-10毫升Western洗涤液(1X)计算,一个包装的Western洗涤液可以洗涤1000-2000次。
注意事项:本Western洗涤液(10X)配制成Western洗涤液(1X)后,宜4℃保存,并在1-2个月内用完。如果室温保存,宜在1-2周内用完。
储存条件:4℃,有效期一年。
·Proteasome抑制剂(MG-132)
编号:YT335
英文名称:Z-Leu-Leu-Leu-CHO
规格:20mg/ml×50μl|5mg|25mg
本品是一种常用的Proteasome抑制剂,即蛋白酶体抑制剂。MG-132可以通透细胞,选择性抑制Proteasome,Ki=4nM。可以激活JNK1并抑制NF-κB的激活(IC50=3μM)。在10μM时可以诱导PC12细胞产生neurite outgrowth。
CAS:133407-82-6
分子式:C26H41N3O5
分子量:475.62
纯度:>99%
注意事项:本MG-132在4℃、冰浴等较低温度情况下会凝固而粘在离心管管底、管壁或管盖内,可以20-25℃水浴温育片刻至 全部融解后使用。
储存条件:-20℃,有效期半年。
北京T4 DNA连接酶现货关键词:YT029,T4 DNA连接酶,T4 DNA Ligase
BTN100214 预混型BCIP/NBT溶液 Premixed BCIP/NBT Solution
ARB12366 大鼠转化生长因子β2(TGFβ2)检测服务 Rat transforming growth factorsβ2,tgfβ2 ELISA KIT
BTN120643 硫酸葡聚糖 Dextran Sulfate
BTN80932 一步法96孔板单菌落质粒DNAOUT(离心法) One-Step 96 Microwell Plate Single Colony Plasmid DNAOUT
肌激酶 Sodium oleate 9013-02-9
磷酸酶B(兔肌) Sodium metavanadate 9012-69-5
BL0791 大鼠IgG抗原(干粉)
FMOC-S-叔丁基-L-半胱氨酸 NADH Inhibitor 67436-13-9
ARB11190 人降钙素基因相关肽(CGRP)elisa检测操作说明书 Human calcitonin gene related Peptide,cgrp ELISA KIT
L-高丝氨酸 N-Acetyl-L-phenylalanine 672-15-1
PY02-019B 乙酰胺琼脂 250克
7220-79-3 Methylene Blue 次甲基兰/亚甲基兰
M0401 BALB/c小鼠IgG预装亲和柱
PY08-034 乳糖蛋白胨培养管 10ml 10支/盒,用于饮用水、水源水中大肠菌群的测定
L-苏氨醇 DL-Phenylalanine 3228-51-1
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文献和实验相关专题 重组DNA技术工具酶 T4 DNA Ligase即T4 DNA连接 酶,可以催化粘端或平端双链DNA或RNA的5’-P末端和3’-OH末端之间以磷酸二酯键结合,该催化反应需ATP作为辅助因子。同时T4 DNA连接酶可以修补双链DNA、双链RNA或DNA/RNA杂合物上的单链缺刻(single-strand nicks)。
【交流】关于NEB的T4 DNA连接酶和快速连接试剂盒的常见问题及解答
因为看到园子中使用NEB T4 DNA连接酶的老师和同学比较多,也经常就一些连接的问题进行讨论和沟通。今天发一个关于NEB T4 DNA连接酶的一个专题,就使用过程中一些常见问题跟大家讨论一下。也希望各位老师同学能够踊跃参与,如果大家有什么疑问或者好的建议欢迎。 一、关于NEB M0202 T4 DNA 连接酶的使用方法和常见问题及解答 1、产品特性和使用方法 产品说明:该酶催化契合的双链DNA或RNA的5'-磷酸末端和3'-羟基末端形成磷酸二酯键。该酶不仅能够催化平滑
相关专题 重组DNA技术工具酶 连接酶旧称“合成酶”。DNA连接 酶是1967年在三个实验室同时发现的,最初是在大肠杆菌细胞中发现的。它是一种封闭DNA链上缺口酶,借助ATP或NAD水解提供的能量催化DNA链的5'-PO4与另一DNA链的3'-OH生成磷酸二酯键。但这两条链必须是与同一条互补链配对结合的(T4DNA连接酶除外),而且必须是两条紧邻DNA链才能被DNA连接酶催化成磷酸二酯键。 DNA连接 酶
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