- ¥110
- 晶抗
- JK2898
- 进口/国产
- 2025年07月14日
企业认证
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保质期：
6个月
- 供应商：
上海晶抗生物工程有限公司
- 保存条件：
4℃ 避光
- 规格：
2×500ml
自备材料：
1、 X光片
2、 显影液
3、 红灯
4、 自来水
操作步骤(含显影定影，仅供参考)：
显影：把X光片完全浸没在显影液内，一般显影10s～2min。具体显影时间要根据显影情况而定，可以在红灯下观察，当发现显影的程度已经达到预定目标，即可停止显影，进行后续步骤。
水洗：在自来水中冲洗2～3min，以完全冲洗去显影液。
定影：浸没在定影液内，定影2～5min左右。定影时间再长一些如10min，通常对洗片的结果没有明显影响。
水洗：在自来水中冲洗2～5min，以充分洗去各种残留溶液和试剂。
注意事项：
1、 曝光、显影、定影步骤均应在严密的避光环境中进行。
2、 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
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文献和实验1、试剂耗材的准备：（1）转膜缓冲液（48 mM Tris-HCl，39 mM 甘氨酸，0.037% SDS，20%甲醇）：（2）10 × 丽春红染液：（3）TBS 缓冲液：（4）TBST 缓冲液（含20%Tween20 的TBS 缓冲液）：（5）封闭液（含5%脱脂奶粉的TBST 缓冲液）：（6）一抗、二抗及抗体稀释液：参照说明书，以封闭液或TBST 进行稀释。（7）底物显色液ECL，4℃ 避光保存，现用现配。（8）显影液和定影液用水稀释10 - 20 倍于铝盒中，可多次使用。室温避光存放
【求助】求助：Western blotting曝光没有任何条带，也没有背景，为什么？
2、二抗被灭活 想一想操作过程有无上述失误 zhongqiuxie 原因太多。一抗问题可能性更大。另外注意显影机是否很久没换显影定影液了？ yunzh375 我觉得可能是蛋白、发光液的问题吧 本文由丁香园论坛提供，想了解更多有用的、有意思的前沿资讯以及酷炫的实验方法的你，都可以成为师兄的好伙伴 师兄微信号：shixiongcoming
的PAGlonm室温孵育1h,或37℃孵育30min.（9）0.05mol/L（pH7.4）TBS洗10min.（10）1%戊二醛洗10min.（11）双蒸水洗5min.（12）1%明胶洗5min.（13）银避光显影8~15min.（14）双蒸水洗15min.（15）固定：用显影定影液（1:4或1:10）固定5min,也可以用15%硫酸钠-20%硫代硫酸钠混合液固定1~3min,或用1%戊二醛固定5min,50℃温水洗3~6min. （16）衬染，核固红衬染3min或甲基绿衬染3min. （17）常规
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