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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
436
- 英文名:
Plus One Step Cloning Kit
- 保质期:
一年
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
- 保存条件:
-20℃
- 规格:
25T
特别提示:包括一步法快速克隆试剂盒在内,本公司的所有产品仅可用于科研实验,严禁用于临床医疗及其他非科研用途!
产品名称:一步法快速克隆试剂盒
英文名称:Plus One Step Cloning Kit
产品货号:一步法快速克隆试剂盒
产品规格:25T
本试剂盒是一款简单、快速、高效的DNA定向克隆产品,该试剂盒可以将PCR产物定向克隆至任意载体的任意位点,可高效克隆50 bp~10 kb片段。将载体在克隆位点进行线性化,并在插入片段PCR引物5’端引入线性化克隆载体末端序列,使得插入片段PCR产物5’和3’最末端分别带有和线性化克隆载体两末端对应的完全一致的序列 (15bp~25bp)。将这种两端带有载体末端序列的PCR产物和线性化克隆载体按一定比例混合,在重组酶的催化下,仅需反应15 min即可进行转化,完成定向克隆。克隆阳性率可达95%以上。克隆载体酶切产物或PCR产物和插入片段PCR产物可以不进行DNA纯化直接用于重组克隆,极大的简化了实验步骤。
试剂盒中2×Enzyme Premix预混了重组酶和重组反应所需缓冲液,并添加了独特的重组增强因子,可显著提高重组克隆效率,即便使用低效率感受态细胞 (107cfu/μg)也可实现高效克隆 (100cfu/ng Vector),重组体系还兼容常规酶切、PCR反应体系。
产品用途:该试剂盒可用于快速克隆、高通量克隆、无缝克隆和DNA定点突变。
产品组份:
2×Enzyme Premix————250μl
500 bp control insert(30ng/μl)————5μl
pUC 19 control vector, linearized (50ng/μl)————5μl
储存条件:-20℃,避免反复冻融,有效期一年。
实验流程概览:
1)线性化克隆载体制备;
2)插入片段扩增引物设计;
3)插入片段PCR扩增;
4)进行重组反应;
5)反应产物转化、涂板;
6)克隆鉴定。
除了一步法快速克隆试剂盒,,我公司还供应以下相关产品:
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文献和实验♦ 适用范围:适用于快速提取植物组织细胞总RNA本试剂盒在室温储存12个月不影响使用效果。♦ 储存事项:1. 所有的溶液应该是澄清的,如果环境温度低时溶液可能形成沉淀,此时不应该直接使用,可在37℃水浴加热几分钟,即可恢复澄清。2. 不合适的储存于低温(4℃或者-20℃)会造成溶液沉淀,影响使用效果,因此运输和储存均在室温下(15℃-25℃)进行。3. 避免试剂长时间暴露于空气中产生挥发、氧化、PH值变化,各溶液使用后应及时盖紧盖子。♦ 产品介绍:独特的裂解液/β-巯基乙醇迅速裂解细胞和灭
分析、蛋白质的体外翻译等均依赖于高纯度完整的RNA。 因此, 如何获得高质量的RNA是研究人员关注的问题。1987年Chomczynski等 [1] 建立了酸-异硫氰酸胍-苯酚-氯仿一步法(acid-guanidine-phenol-chloroform, AGPC)。该方法较以往的传统方法操作简单,无需特殊的设备,抽提时间缩短至4 h,因而得到广泛的应用。数家公司据此开发出RNA提取试剂盒 [2,3] 。使用试剂盒简单方便,但价格相对昂贵。为探索操作简便、经济实用、快速
快速TA克隆的突破T载体是TA克隆载体的简称,就是利用载体的T末端和PCR产物的A末段连接而将目的基因克隆到载体中的方法。目前市场上常见的T载体,根据连接方法可以分成两种:方法1、以T4连接酶进行连接的方法,这种方法的载体有promega、takara;可以说这两家公司将这两种方法发挥到了很高的水平,转化子比较多,阳性率也不错,唯一的不足就是连接的时间长。因为连接时间越长效率越高,要达到较好的连接效率,一般要过夜连接。国内很多公司模仿这种方法制作T载体,不仅连接时间也很长,而且做不到
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