SuperTOPO-Amp平末端克隆试剂盒现货促销

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SuperTOPO-Amp平末端克隆试剂盒现货促销是高品质的克隆与表达产品，由北京百奥莱博供应，用于生化研究，本产品质量好，且极具价格优势，深为用户称道，了解更多SuperTOPO-Amp平末端克隆试剂盒等克隆与表达产品请联系我司咨询订购。

北京百奥莱博科技有限公司专业生产供应SuperTOPO-Amp平末端克隆试剂盒现货促销，产品信息：

类别：克隆与表达

英文名：SuperTOPO Blunt Cloning Kit

产品名	产品编号	包装规格
SuperTOPO-Amp平末端克隆试剂盒	BTN160684-25A	25次

规格：25次

编号：BTN160684-25A

英文名：SuperTOPO Blunt Cloning Kit

产地：国产|进口

品牌：百奥莱博

本试剂盒是基于Topoisomerase能够在几秒钟之内高速连接DNA片段的原理开发的无背景克隆试剂盒，它使用了本公司通过定点突变改良的TOPO酶，连接效率比野生型更高。

 

产品特点：

1.高效快速，连接反应几乎在几秒钟内完成，连接率几乎达到100%。

2.适用于pfu、KOD等高保真聚合酶扩增的平末端片段的克隆。

3. 无杂带或引物二聚体的PCR扩增产物可以不经过纯化直接用于连接反应。

4. 零背景，无需IPTG-X-Gal蓝白斑筛选，故不需要IPTG-X-Gal培养基。

5. 本试剂盒按10μL标准反应体系，有25次和50次两种规格包装供选择。

6. 提供含Amp和Kan两种抗性的载体供选择(BTN160684-25A是含Amp抗性TOPO载体，BTN160684-25K是含Kan抗性TOPO载体)。

 

试剂盒组成：

 

成分	规格
SuperTOPO-Amp Blunt载体	25μl(BTN160684-25A)
SuperTOPO-Kan Blunt载体	25μl(BTN160684-25K)
连接缓冲液	25μl
M13F引物	50μl
M13R引物	50μl
超纯水	1ml
说明书	1份

注意：BTN160684-25A提供SuperTOPO-Amp Blunt载体，BTN160684-25K提供SuperTOPO-Kan Blunt载体。

 

储存条件：低温运输，-20℃保存，有效期一年。

 

使用方法：

 

1. 如果是PCR 制备插入片段，所用引物不能磷酸化，使用pfu、KOD等产生平末端片段的高保真DNA聚合酶。为保证扩增产物的完整性，PCR循环结束后，再延伸5-10分钟，确保片段延伸完全。

2.电泳检测并相对定量PCR片段(跟DNA marker 比较)。根据插入片段长度和下表确定每次连接反应需要的最佳用量：

 

插入片段长度	最佳用量
100-1000bp	20-50 ng
1000-2000bp	50-100 ng
2000-5000bp	100-200 ng

3.在一个干净的塑料离心管中，室温下(不要放在冰上)设置如下连接反应体系：

 

成分	用量
纯化后的PCR产物	不超过8μl(详见注意事项)
SuperTOPO-Amp Blunt载体或 SuperTOPO-Kan Blunt载体	1μl
连接缓冲液	1μl
超纯水	补到10μL

注意：如果使用未经纯化的PCR产物，则需要加入量不能超过1μL，否则PCR 体系会干扰连接体系。

4. 轻柔吹打混匀后，短暂离心，常温(20-30℃)放置0-5分钟。如果在冬天室温低于20℃，建议使用25℃水浴或金属浴。注意：连接时间超过5分钟的话连接效率会降低。

5. 如果当天不转化，可以将离心管放-20℃保存。如果转化，则取5μL连接液加到50-100μL 刚刚融化的感受态细胞中，轻柔混匀。注意：本产品要求感受态细胞的转化效率不得低于5×10E7cfu/ug。

6. 如果片段长度小于2Kb，则不需要冰浴和热激，直接在离心管中加入500μL 不含抗菌素的SOC或LB培养基，然后取200μL涂盘。也可以先3000g离心2分钟后，弃掉大部分上清，只留约100μl左右，然后重悬细菌后全部涂盘在含Amp(对SuperTOPO-Amp)或Kan(对SuperTOPO-Kan)的培养皿上，37℃过夜培养。

7. 如果片段长度长于2Kb，则按常规转化方式，先冰浴2-30分钟，然后42℃热激30秒，冰上防放置2分钟，再在离心管中加入500μl 不含抗菌素的SOC或LB培养基，37℃ 250rpm培养60分钟，然后取200μL 涂盘。也可以先3000g离心2分钟后，弃掉大部分上清，只留约100μL左右，然后重悬细菌后全部涂盘在含Amp(对SuperTOPO-AmpBlunt载体)或Kan(对SuperTOPO-Kan Blunt载体)的培养皿上，37℃过夜培养。

8. 用M13F/M13R通用引物进行菌落PCR或直接测序来鉴定重组子。

SuperTOPO-Amp平末端克隆试剂盒现货促销专业优质供应商：北京百奥莱博科技有限公司

关键词：SuperTOPO Blunt Cloning Kit ,SuperTOPO-Amp平末端克隆试剂盒,BTN160684-25A

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编号	类别	名称
BTN90203	RNA纯化	miRNA分离纯化试剂盒(沉淀法)
BTN3080	RNA纯化	植物RNA提取试剂盒
BTN140234	核酸电泳和回收	SYBR Green Ⅱ核酸染料(10000×)
BTN81027	RNA纯化	TRIzol试剂伴侣
BTN130897	其他培养基	YPDG液体培养基
BTN81029	蛋白质研究	非变性法蛋白沉淀试剂盒
BTN120414	工具酶	DNA拓扑异构酶 I
BTN81204	蛋白质研究	5×SDS-PAGE上样液
BTN80815	蛋白质研究	BCA法蛋白定量试剂盒
BTN130806	克隆与表达	胚胎裂解液
BTN100307E	DNA纯化	酸洗玻璃珠(1500～2000μm)
BTN131292	其他细胞生物学试剂	PFG固定液
BTN131052	蛋白质研究	β-巯基乙醇(蛋白级)
BTN160686-25K	克隆与表达	SuperTOPO-Kan TA克隆试剂盒
BTN101202	其他生化试剂	3M乙酸*溶液(pH5.2)
BTN130622	工具酶	T4 RNA连接酶1
BTN131194	DNA纯化	96孔板血液DNA提取试剂盒(真空法)
BTN3690A	核酸电泳和回收	红色DNA上样液，6×
BTN81210	蛋白质研究	Western印迹膜封膜液(NC膜和PVDF膜)
BTN90610	蛋白质研究	卵白蛋白标准品(2mg/mL)
BTN131082	蛋白质研究	重组蛋白L
BTN131044	蛋白质研究	辛甲基β葡糖苷
BTN130562	克隆与表达	大肠杆菌Tuner(DE3)化学感受态细胞
BTN131028	工具酶	嗜热菌蛋白酶
BTN90801B	克隆与表达	一站式TA克隆试剂盒(含感受态细胞)
BTN71206	DNA纯化	柱式动物DNA提取试剂盒
BTN130417	蛋白质研究	蓝胶琼脂糖

 

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