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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
大量
- 英文名:
Tuner(DE3)pLysS Competent Cells
- 保质期:
三年
- 供应商:
上海钰博生物科技有限公司
- 保存条件:
低温保存
- 规格:
10×100ul / 20×100ul
| 编号 | 名称 | 规格 | 单位 |
| YB4473 | Tuner(DE3)pLysS感受态细胞 | 20×100ul | 包 |
| YB4473 | Tuner(DE3)pLysS感受态细胞 | 20×100ul | 包 |
Tuner(DE3)pLysS感受态细胞基本信息:
Tuner(DE3)pLysS基因型:
菌株类型:
E.coli
培养基:
LB培养基
生长条件:
37 ℃, 有氧
抗性:
氯霉素
应用:
蛋白表达
质粒转化条件:
42 ℃热激
诱导方法:
IPTG
菌株特点:
1. Tuner系列菌株是LacZY去除的BL21突变菌株,这可以通过细胞培养来调节蛋白表达水平。lac通透酶(lacY)突变使得IPTG能够进入所有的细胞菌内。
2. 不像乳糖或者阿拉伯糖,IPTG是一个可以通过lac通透酶途径进入细胞内的诱导剂。这使得菌株可以使得IPTG的蛋白诱导具有IPTG的浓度依赖性。与 pET系列载体联合使用,可以使得蛋白表达从低表达水平到超高表达水平进行有效调节。蛋白表达水平低的情况下,目的蛋白可能会具有更好的可溶性和生理活 性。
3. Tuner系列菌株的蛋白表达水平可以通过IPTG浓度进行精确的调节,具有严格的浓度依赖性。
4. Tuner系列菌株还是lon和ompT蛋白酶缺陷型菌株。
5. DE3是溶源性的 λDE3, 所以在lacUV5启动子下携带有T7 RNA聚合酶的染色体拷贝。该菌株适用于pET系列载体,及其他T7启动子系列载体。
6. 含有pLSs质粒,pLySs质粒能够产生T7溶菌酶,可以有效降低目的基因的基础表达水平。pLySs质粒使得该菌株具有氯霉素抗性。pLySs质粒的起始复制位点是p15 Origin, 这使得该质粒能够和pUC-及pBR322-衍生的质粒互相共存。
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文献和实验)ply菌株 基因型: F- ompT gal dcm lon hsdSB(rB- mB-) λ(DE3) pLysS(cmR). 特点: 该菌株带有pLysS,具有氯霉素抗性.此质粒还有表达T7溶菌酶的基因,T7溶菌酶能够降低目的基因的背景表达水平,但不干扰IPTG诱导的表达. 适合于毒性蛋白和非毒性蛋白的表达. 用途: 蛋白质表达.
ompT gal dcm lon hsdSB(rB- mB-) λ(DE3) pLysS(cmR)。 特点:该菌株带有pLysS,具有氯霉素抗性。此质粒还有表达T7溶菌酶的基因,T7溶菌酶能够降低目的基因的背景表达水平,但不干扰IPTG诱导的表达。 适合于毒性蛋白和非毒性蛋白的表达。 用途:蛋白质表达 DH5α菌株 基因型:F- endA1 glnV44 thi-1 recA1 relA1 gyrA96
由它们的天然启动子驱动。在 Rosetta ( DE3 ) pLysS 和 Rosetta ( DE3 ) pLacI 中,稀有 tRNA 基因存在于分别带有 T7 溶菌酶和 lac 阻遏基因的同一质粒上。 Tuner 菌株为 BL21 的 lacZY 缺失突变株,能够调整培养物中所有细胞的蛋白表达水平。 lac 通透酶( lacY )突变使得 IPTG 均匀进入群体所有细胞,从而具有浓度依赖、水平均一的诱导表达。通过调整 IPTG 浓度,表达可从极低水平调节到极强、完全诱导的表达水平(通常
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