- ¥180 - 1850
- YBscience
- YB954662s
- 进口/国产
- 2025年07月10日
企业认证
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- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
大量
- 英文名：
JM108 Chemically Competent Cell
- 保质期：
三年
- 供应商：
上海钰博生物科技有限公司
- 保存条件：
低温保存
- 规格：
10×100ul / 20×100ul
| 编号 | 名称 | 规格 | 单位 |
| YB954662s | JM108 | 10×100ul | 包 |
| YB954662 | JM108 | 20×100ul | 包 |
JM108化学感受态细胞基本信息：
JM108基因型:
endA1 recA1 gyrA96 thi-1 relA1 glnV44 Δ(lac-proAB) hsdR17 (rK- mK+)
JM108菌株介绍：
nalidixic acid resistant.
deficient in expression of the lon protease due to IS186 transposon insertion.
JM108使用说明
1. 本产品采用干冰运输，收到后请直接冻存于-80℃冰箱。
2. 取冻存于-80℃的100μl感受态细胞于冰上融化；
3. 加入1μl纯质粒，轻轻吹打混匀，冰浴30min；
4. 将菌液放入42℃水浴中热激45sec，立即放入冰浴中2min；
5. 加入900μl SOC/LB培养基，于37℃恒温摇床上150rpm×45min温育；
6. 将菌液5000rpm×5min离心，弃尽上清；
7. 取100μl新鲜LB培养基将菌体打散，均匀涂布于对应抗性平板表面；
8. 平板可先正向37℃放置1h,待液体吸收完毕，再倒置37℃培养过夜。
JM108注意事项
1. 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
2. 本产品仅可用于实验室研究，不能用于动物，人体以及作为食品添加剂等用途。
3. 混入质粒或连接产物时应轻柔操作，感受态细胞最好在冰中缓慢融化，插入冰中8分钟内加入目标DNA，不可在冰中放置时间过长，长时间存放会降低转化效率。
4. 涂布用量可根据具体实验调整。若转化的DNA总量较多，可取少量转化产物涂布平板；若转化的DNA总量较少，可取200-300μl转化产物涂布平板。若预计的克隆数较少，可通过离心后吸除部分培养液，悬浮菌体后将其涂布于平板中。
5. 新制备的固体培养基不易涂干，可将平板正置于37℃直至液体被吸收后再倒置培养.
6. 涂布剩余的菌液可置于4℃保存，如果次日的转化菌落数过少，可以将剩下的菌液再涂布新培养基进行培养。
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文献和实验的菌株在30oC而不是在37oC生长，更有利于连接。作简单的亚克隆连接实验，亚克隆转化效率的感受态细胞就可满足克隆需要，更高转化效率的感受态细胞可用于作比较困难的克隆实验。为提高获得目的克隆的机会，应用尽可能高转化效率的感受态细胞（>108克隆/μg DNA）。 (2)大肠杆菌基因型 hsdR 有利于非甲基化DNA（如PCR扩增产物）的有效转化。 mcrA 有利于甲基化DNA（如基因组）的有效转化。 acZΔM15 用于蓝白斑筛选。 endA1 无Endonuclease I 酶活性，有利
DNA，如果假定处于感受态的受体细胞能100%地接纳DNA分子，则这种转化率直接反应了受体细胞中感受态细胞的含量；转化率的另一种表示形式是在受体细胞数相对于待转化DNA分子数大大过量时，每微克DNA转化所产生的克隆数。由于在一般规模的转化实验中，所观测到的每个受体细胞只能接纳一个DNA分子，因此上述转化率的定义也可表征为每微克DNA进入受体细胞的分子数。例如，pUC18对大肠杆菌的转化率为108 /mg DNA，其含义是每微克pUC18只有108 个分子能进入受体细胞，一微克pUC18中共有6.02×1017
法、 CaCl2、 RuCl等化学试剂法感受态细胞：处理后，细胞膜的通透性发生变化，成为能容许外源 DNA 分子通过时细胞的状态。转化细胞(转化子)：带有异源 DNA 分子的受体细胞( Transformant )。本实验以 E.coli DH5α 菌株为受体细胞，用 CaCl2 处理受体菌使其处于为感受态，然后与 pUC18质粒共保温，实现转化。 pUC18质粒携带有抗氨苄青霉素的基因，因而使接受了该质粒的受体菌具有抗氨苄青霉的特性，用 Apr符号表示。将经过转化后的全部受体细胞经过适应稀释，在含氨
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