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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
721
- 英文名:
Instant Immunohistochemistry Kit For Primary Antibody From Rabbit IgG
- 保质期:
一年
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
- 保存条件:
4℃
- 规格:
80T|160T
特别提示:包括即用型免疫组化试剂盒(兔源一抗)(冰冻切片/石蜡切片)在内,本公司的所有产品仅可用于科研实验,严禁用于临床医疗及其他非科研用途!
产品名称:即用型免疫组化试剂盒(兔源一抗)(冰冻切片/石蜡切片)
英文名称:Instant Immunohistochemistry Kit For Primary Antibody From Rabbit IgG
产品规格:80T|160T
本试剂盒采用SABC系统,适用一抗为兔IgG,标本为培养细胞或冰冻切片的免疫组化。SABC是专为免疫组化和其他免疫检测而设计的,用以显示组织和细胞中抗原分布。链霉亲和素对生物素分子有极高的亲和力,等电点 pI=6.0~6.5,对组织和细胞的非特异吸附很低。根据研究,大量的过氧化物酶可以保证SABC具有很高的敏感性。所以SABC兼具高敏感性,低背景和操作简便的优点。
冰冻切片和培养细胞做免疫组化时,由于内源性抗体的抗原性完好保存,一般免疫组化试剂盒就会碰到严重的背景染色问题,尤其是丙*(代"酮")固定的标本。本试剂盒所用的二抗是生物素标记的抗兔IgG,具有高度的特异性,不和兔以外任何抗体起反应,所以不会因二抗引起背景染色。此外,本试剂盒也能用于兔标本石蜡切片的免疫组化,背景染色优于普通试剂盒。
试剂盒组成:
| 组分 | 规格 |
| 5%BSA封闭液 | 6ml/12ml |
| 生物素标记抗兔IgG | 6ml/12ml |
| SABC | 6ml/12ml |
保存条件:4℃可保存一年,应避免冷冻。
冰冻切片染色步骤:
1. 取出切片,浸于 PBS 中复温30分钟。
2. 灭活。30%H2O2 1 份+纯甲醇 50 份混合,室温浸泡10分钟,以灭活内源性过氧化物酶。蒸馏水洗1-2 次。
3. 根据需要选择抗原修复方式及强度。可热修复、酶修复或不修复。
4. 封闭。5%BSA封闭液 37℃孵育30分钟,甩干,勿洗。
5. 滴加一抗(兔IgG),37℃孵育1-2小时或4℃过夜。PBS冲洗,5分钟×3次。
6. 滴加生物素标记抗兔IgG,37℃孵育 30分钟。PBS冲洗,5分钟×3次。
7. 滴加 SABC,37℃孵育30分钟。PBS冲洗,5分钟×3次。
8. 显色液显色,镜下控制反应时间。显色剂可选DAB(ZN1968)或AEC(ZN1963)。自来水充分冲洗。
9. 根据需要进行苏木素(ZN1971)复染,染色时间为0.5-2分钟。脱水,透明。
10. 选用中性树胶,水溶性封片剂(ZN2946)或其他适当的封片剂封片。
建议:
1. 热修复可选用枸橼酸盐缓冲液(ZN1955)、EDTA抗原修复液(ZN1951)、PBS缓冲液、TBS缓冲液(ZN1953)等作为抗原修复液。
2. 酶修复可选用复合修复液(ZN1952)、抗原修复液Ⅰ(ZN1954,与热修复配合使用)、胰蛋白酶(ZN2944)、胃蛋白酶(ZN2945)消化组织。
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文献和实验一、石蜡切片和冰冻切片的比较? 1、要求做冰冻切片的不一定能做石蜡切片,这是我向一老师请教得出的结论。因为作石蜡切片时要高温烤片,可能会破坏组织的抗原性,如果组织的抗原性较稳定,则可作石蜡切片;但是要求做石蜡切片的,可作冰冻切片。 2、冰冻切片的优点是能够较好的保存组织的抗原免疫活性,做免疫组化时不需抗原修复这一步。缺点是细胞内易形成冰晶而破坏细胞结构,可能会使抗原弥散;切片厚度较石蜡的厚,做的片子没石蜡的漂亮。当你买一抗时,目录上都写着做什么样的切片,如果它写着只能做冰冻,就不能做石蜡,如写
后,入4℃丙酮固定10分钟。也可根据需要选择其它的固定方式。 PBS洗,5分钟×3。 用3%过氧化氢孵育5~10分钟,消除内源性过氧化物酶的活性。 PBS洗,5分钟×3。 下接石蜡切片免疫组化染色操作步骤(滴加一抗开始)。 石蜡切片免疫组化染色步骤 三步法(以SP试剂盒为例) 1. 石蜡切片脱蜡至水。 2. 蒸馏水冲洗,PBS浸泡5分钟,如需采用抗原修复,可在此步后进行。 3. 3%H2O2室温孵育5~10
一、石蜡切片和冰冻切片的比较? 1.要求做冰冻切片的不一定能做石蜡切片,这是我向一老师请教得出的结论。因为作石蜡切片时要高温烤片,可能会破坏组织的抗原性,如果组织的抗原性较稳定,则可作石蜡切片;但是要求做石蜡切片的,可作冰冻切片。 2.冰冻切片的优点是能够较好的保存组织的抗原免疫活性,做免疫组化时不需抗原修复这一步。缺点是细胞内易形成冰晶而破坏细胞结构,可能会使抗原弥散;切片厚度较石蜡的厚,做的片子没石蜡的漂亮。当你买一抗时,目录上都写着做什么样的切片,如果它写着只能做冰冻,就不能做石蜡,如写
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