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- 详细信息
- 技术资料
- 保存条件:
-20℃避光
- 保质期:
一年
- 英文名:
ECL Western Blotting Detection Kit(Rabbit IgG)
- 库存:
340
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
百奥莱博专业生产供应北京ECL化学发光法检测试剂盒(兔IgG)促销,我公司销*(代"售")高质量、高纯度的生化试剂,同时价格极具竞争力,满心期待您的咨询订购。
名称:ECL化学发光法检测试剂盒(兔IgG)
规格:1盒
编号:QN1157
英文名:ECL Western Blotting Detection Kit(Rabbit IgG)
品牌:百奥莱博
产地:国产|进口
本试剂盒主要用于western blotting的化学发光显色,含有HRP标记抗兔IgG二抗。
SDS-PAGE电泳后,蛋白质按照分子量大小分离,转移到固相载体(例如硝酸纤维素薄膜)后,固相载体以非共价键形式吸附蛋白质,以固相载体上的蛋白质或多肽作为抗原,与对应的抗体起免疫反应,再与酶标记的第二抗体起反应,加入发光底物后,能让胶片感光。经显影和定影后,可以在胶片上显示出条带(抗原所在位置)。
试剂盒组分:
封闭试剂———————————30g(可配制400ml)
10倍浓缩抗体稀释液——————50ml
HRP标记兔IgG二抗———————0.3ml,效价1:500~1000
ECL显色液-——————————25mlA+25mlB
常规电泳转膜后:
1)清洗转印膜:将膜剥离下后,作好标记,一般在左上角剪一缺口。室温用TBS-T漂洗3次每次5min,以尽量洗去转印膜上的SDS,防止影响后面的抗体结合。
2)按5g封闭试剂加100ml双蒸水计,配制膜封闭液,配好的膜封闭液为乳白色悬液,将漂洗过的转印膜放入封闭液内,置摇床孵育,室温封闭30min。用TBS-T缓冲液(PH7.6)洗膜,室温漂洗3次每次5min。
3)将10×抗体稀释液用双蒸水稀释成1×(10ml,10×抗体稀释液加入90ml双蒸水,混匀,可4℃保存三个月)。此稀释液可作为一抗和二抗的稀释液。
4)用1×的抗体稀释液稀释一抗。根据用量以及一抗的推荐稀释浓度来稀释一抗。将杂交膜放入杂交袋中,加入一抗工作液,封口,4℃孵育过夜或37℃摇动孵育2h。此用过的抗体一般可回收第二天再使用一次。
注:如果所加一抗不同,可在此步将膜沿电泳方向剪成条,分别作好标记,分开孵育。
5)用TBS-T缓冲液(PH7.6)洗膜,室温漂洗3次每次5min。
6)用1×的抗体稀释液稀释二抗。根据用量,按10ml抗体稀释液加入15ul的HRP标记二抗的比例,配制二抗工作液。将杂交膜放入杂交袋中,加入二抗工作液,封口,37℃摇动孵育1h。此用过的抗体一般可回收第二天再使用一次。
7)用TBS-T缓冲液(PH7.6)洗膜,室温漂洗3次每次10min。
8)根据用量,取ECL发光液A、B等量混匀,加在膜正面,暗室显色1~5分种。倾去显色液,小心用纸吸去显色液,在上面盖一层平整的透明纸。再取出感光胶片,做好标记,轻轻的放在膜上,显色30秒到1分钟,取出胶片浸入显影液中,观察显色情况,再放入定影液中1分钟。根据条带强弱,再次感光时可减短或者加长感光时间(从5秒到30分钟)以期达到理想结果。
注意事项:
1.请根据一抗来源选择试剂盒。
2.可以根据显色结果来优化实验反应时间。如背景过深,可延长膜封闭时间,加长最终漂洗次数与时间。如果
条带过弱,可增加抗体浓度,可延长抗体孵育时间或加长感光时间。
3.TBS-T(0.01M,PH7.6)配制方法:称取NaCl 8.5g,Tris 1.21g,用800ml的双蒸水溶解,用盐*(代"酸")调PH到7.6,再加入0.5ml Tween-20,用双蒸水加至1000ml,混匀即可。(也可按照自己的配制习惯来配制)
储存条件:-20℃避光,有效期一年。
关键词:ECL化学发光法检测试剂盒(兔IgG),ECL Western Blotting Detection Kit(Rabbit IgG),QN1157
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| QN0492 | a-葡萄糖苷酶 |
| QN0737 | 果胶 |
| QN0584 | 植酸 |
| QN1101 | TEMED |
| QN0318 | 牛纤维蛋白原(进口) |
| QN0815 | 对硝基*(代"*")甲*(代"酸")乙酯 |
| QN0425 | 酸性磷酸酶 ACP |
| QN0773 | PNPG |
| QN0444 | 苄眯盐*(代"酸")盐 |
| QN0423 | 弹性蛋白酶(猪胰) |
| QN0881 | 封闭山羊血清 |
| QN0043 | *唑西林* |
| QN0561 | 胞嘧啶核苷 |
| QN0524 | dTTP(100mM) |
| QN0191 | 棉子糖 |
| QN0971 | 2×Taq Plus PCR MasterMix (含染料) |
| QN0847 | 茜素络合指示剂 |
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| QN0039 | 盐*(代"酸")环丙沙星 |
| QN0046 | 头孢*苄 |
| QN1045 | pET-32a(+)载体 |
| QN0813 | 聚乙二醇600 |
| QN0704 | XTT*盐 |
| QN0381 | 甘油激酶 |
| QN1079 | 核蛋白提取试剂盒 |
| QN1165 | 40%Acr/Bis(37.5:1)制胶液 |
| QN1315 | 细胞凋亡Hoechst 33342/PI双染试剂盒 |
| QN0632 | 六水*化* |
| QN0578 | 四乙基*化铵 |
| QN1265 | 多聚-L-赖*酸(3-7万) |
| QN0930 | 乙酸*(pH5.2) |
| QN0115 | 烟酰胺 |
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