Super Phi29 DNA聚合酶

特别提示：包括Super Phi29 DNA聚合酶在内，本公司的所有产品仅可用于科研实验，严禁用于临床医疗及其他非科研用途！

产品名称：Super Phi29 DNA聚合酶
英文名称：Super Phi29 DNA Polymerase
产品规格：125U

  本酶是通过蛋白质工程改造的phi29 DNA 聚合酶在大肠杆菌中进行表达后，经多次纯化分离获得。与天然phi29 DNA 聚合酶相比，具有更高的扩增效率和灵敏度。Phi29DNA聚合酶具有高效的DNA合成能力，可连续合成多达70kb的DNA片段。同时该酶具有3′→5′外切酶校读功能，保真性高，还具有特殊的链置换和连续合成特性。

产品组成：

组份	JN0019-125U
Super phi29 DNA 聚合酶	125U
dNTP混合液（各10mM）	200μl
10×phi29 Buffer	1ml

产品特点：
1、极高的掺入率。
2、超强的链置换能力。
3、保真性高。
4、中温下反应。

产品用途：
1、恒温protein-primed DNA扩增。
2、利用随机引物扩增DNA。
3、滚环复制。
4、复制extended-region。

应用实例：


图例一）Super phi29 DNA Pol扩增
以菌液为模板，扩增pUC19质粒，自左向右模板量分别为10μl反应体系中加入0.5μl，1μl，2μl，3μl菌液做模板。左图：扩增产物直接电泳，由于产物量较大，部分DNA未电泳出加样孔（上样量2μl）；右图：扩增产物EcoRI酶切后电泳，显示与pUC19大小一致的均一条带。

图例二）Super phi29 DNA Pol与野生型phi29 DNA Pol 比较
1，2，3与4，5，6分别为扩增1小时，2小时，3小时的结果。10μl反应体系中加入1ng人基因组DNA，上样量2μl。1-3：野生型酶；4-6：Super phi29 DNA Polymerase。

常用反应体系（50μl）

10×phi29 Buffer	5μl
随机引物（1mM）	1.25μl
质粒模板（1μg/ml)	1μl
加ddH2O至45μl,95℃预变性3min,冰上冷却。
dNTP(各10mM)	2.5μl
100x BSA	0.5μl
phi29 DNA Pol	2.5μl
30℃	过夜

质量保证：经多次柱纯化，SDS-PAGE胶检测仅可见清晰单一的目的条带；PCR方法检测无大肠杆菌DNA残留，无核酸内、外切酶污染。

活性定义：在30℃条件下，10min内能使0.5 pmol的dNTP掺入酸不溶性物所需要的酶量定义为1个活性单位。

10×反应缓冲液：500mM Tris-HCl（pH 7.5）, 100mM MgCl2，100mM (NH4)2SO4，40mM DTT。反应时需要加入dNTP。

储存条件：-20℃