lncRNA测序

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      研载生物

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      lncRNA测序

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    一、服务介绍 
    长链非编码RNAs(long non-coding RNAs,lncRNAs)一般是指长度大于200 nt的RNA,位于细胞核内或胞浆中,不参与蛋白质编码功能,以RNA形式在多种层面上(表观遗传调控、转录调控以及转录后调控等)调控基因的表达水平,在生命活动中具有重要作用。
    长链非编码RNA测序(long non-coding RNA sequencing,lncRNA-Seq)是一种使用特定方法降低样本中rRNA 的丰度,对富集到的 RNA进行文库构建,再对高通量测序仪产出的数据进行信息分析的研究方法。lncRNA-Seq可一次性获得样本中几乎全部的lncRNAs信息,对lncRNAs的类别、功能进行全方位的深入分析,从而快速全面准确地获得与特定生物学过程(例如发育、疾病等)相关 lncRNA信息。
    二、测序流程 
    1.总RNA提取
    2.片段化
    3.去除tRNA
    4.连接3’/5’接头
    5.反转录
    6.PCR扩增
    7.文库定量
    8.上机测序
    9.数据质检
    10 生物信息学分析
    三、生物信息学标准化分析
    已知lncRNA鉴定
    计算已知lncRNA表达量及样品间lncRNA表达差异分析
    预测新lncRNA
    计算新lncRNA表达量及样品间新lncRNA表达差异分析
    新lncRNA二级结构预测
    四、样品要求 
    1样品类型:细胞、新鲜组织或RNA样品。
    2样品量:细胞样品请提供至少1×107个细胞,组织样品请提供至少300mg的组织块或切片,RNA样品请提供10 μg以上的总RNA。
    3样品质量:RNA无明显降解,提取的总RNA OD260/280值在1.8~2.2之间,浓度≥ 500 ng/μl,28S:18S ≥ 1.5,RIN ≥7。
    4样品保存:细胞样品或新鲜组织块(切成~50mg的小块)可用TRIZOL或RNA保护剂处理或液氮冻存后,-80℃保存。RNA样品可溶于乙醇或RNA-free的超纯水中,-80℃保存。样品保存期间避免反复冻融。
    5样品运输:样品置于1.5 ml管中,封口膜封好,干冰运输。
    五、质量承诺
    提供可靠数据和分析结果。
     

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