High-GC DNA Polymerase

High-GC DNA Polymerase
High-GC DNA Polymerase由HiFiTaq DNA Polymerase和优化的扩增高GC含量片段的专用缓冲液组成，用于一般PCR方法无法实现的高GC含量DNA片段的扩增。优化的高GC PCR缓冲液系统可提高引物结合的特异性和HiFiTaq DNA聚合酶的热稳定性，从而有助于DNA聚合酶延伸通过二级结构区。使用High-GC DNA聚合酶扩增的一部分PCR产物3＇末端附有突出的A碱基，可直接进行TA载体克隆，加A处理后可提高TA克隆效率。
用途
·   高GC含量、复杂模板的PCR扩增
特点
·   高效扩增高GC含量片段：优化的缓冲体系可协助高GC模板解链，发挥聚合酶的最大扩增效力
·   高度灵敏：高纯度的酶带来优良的灵敏性
·   批次稳定：遵循标准化生产流程，经过严格的质量检测

产品组分

 

High-GC DNA Polymerase (5 U/μl)	100 μl
2 × High-GC PCR Buffer	1.3 ml × 2

 

保存条件
-20℃恒温保存一年
活性定义
用活性化的大马哈鱼精子DNA作为模板/引物，在74℃、30分钟内，摄入10 nmol的全核苷酸为酸性不溶物所需的酶量定义为1个活性单位（U）。
质量控制
·   以基因组DNA为模板，可以有效地扩增GC含量为75%的DNA片段
·   无内切酶、外切酶污染
·   PCR检测无残留宿主基因组DNA
·   室温存放一周无明显活性降低
FAQ:
Q1: High-GC DNA Polymerase 能够扩增的片段的GC含量上限是多少？
A1: 实验证明该产品可有效扩增以人基因组DNA为模板、GC含量高达85%的区域。但因模板来源及纯度等因素干扰，扩增效果可能受到影响。
Q2: 使用High-GC DNA Polymerase扩增高GC含量模板时应注意些什么？
A2: 应使用Tm值较高的引物。因此引物的长度最好设计在30个碱基以上。
Q3: High-GC DNA Polymerase的产物适合做TA克隆吗？
A3: High-GC DNA Polymerase的产物中大部分含有3’突出A碱基，所以纯化后可与T载体连接。若要提高TA克隆的效率，可以将最后一步的延伸反应延长到15分钟。当插入片段大于1 kb时，使用Taq酶对PCR产物进行一步加A反应，然后再进行TA克隆，则效果更佳。
应用实例