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- 2025年07月14日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
大量
- 英文名：
HiFiTaq DNA Polymerase
- 保质期：
-20℃恒温保存一年
- 供应商：
上海信裕生物科技有限公司
- 保存条件：
一年
- 规格：
500 U/500 U×5/500 U×10
HiFiTaq DNA Polymerase
HiFiTaq DNA Polymerase系在Taq酶的基础上，按最佳比例混合了具有3＇到5＇端DNA外切酶活性（即校读活性）的高保真DNA聚合酶，并且配备精心优化的PCR缓冲液，完美实现了扩增效率与保真性的兼容。本产品适合扩增保真度要求较高，而Pfu酶无法有效扩增的片段，如基因诊断、较长DNA片段的克隆和点突变等应用。使用HiFiTaq DNA聚合酶扩增的一部分PCR产物3＇末端附有突出的A碱基，可直接进行T载体克隆，加A处理后可提高TA克隆效率。
用途
· 较长基因克隆、测序
· 定点突变
特点
· 高保真性：保真性是Taq酶的3~4倍，不含任何PCR反应增强剂
· 高效扩增：可扩增Taq酶无法合成的长片段DNA，对≤6 kb片段的扩增效率接近于Taq酶
· 高度灵敏：高纯度的酶带来优良的灵敏性，适合微量模板扩增
· 批次稳定：遵循标准化生产流程，经过严格的质量检测
产品组分
| HiFiTaq DNA Polymerase (5 U/μl) | 100 μl |
| 10 × HiFiTaq PCR Buffer | 1 ml |
保存条件
-20℃恒温保存一年
活性定义
用活性化的大马哈鱼精子DNA作为模板/引物，在74℃、30分钟内，摄入10 nmol的全核苷酸为酸性不溶物所需的酶量定义为1个活性单位（U）。
质量控制
· 以λ DNA为模板，可以有效扩增10 kb的DNA片段
· 以基因组DNA为模板，可以有效扩增单拷贝基因
· 无内切酶、外切酶污染
· PCR检测无残留宿主基因组DNA
· 室温存放一周无明显活性降低
FAQ:
Q1: HiFiTaq酶有哪些优势?
A1:HiFiTaq酶是由具有高效扩增能力的Taq酶与具有校读活性的高保真酶按最佳比例混合而成的。在适当的缓冲体系中，引物的延伸主要由Taq酶高效催化完成；一旦出现错配后，高保真酶即发挥其校对功能，通过其3＇到5＇端DNA外切酶活性去除错配碱基，使DNA链继续延伸。因此HiFiTaq酶将两种酶的优势互补，在不降低扩增效率的情况下提升了保真性。
Q2:HiFiTaq酶的产物适合做TA克隆吗?
A2: HiFiTaq酶是混合酶，含有Taq酶，其产物中大部分都是含有3＇突出A碱基的，所以直接做TA克隆没有问题，但预先多进行一步加A反应可以提高TA克隆的效率。当插入片段大于1 kb时，建议进行加A反应以提高效率。此外，选择克隆载体时，应考虑到插入片段与载体大小比例。当插入片段等于或大于载体时，连接效率明显降低。
应用实例
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文献和实验We report a simple homogeneous fluorescence assay for quantification of DNA polymerase function in high throughput. The fluorescence signal is generated by the DNA polymerase triggering opening of a molecular beacon extension of the template
The Polymerase Chain Reaction (PCR)
. Did He Really Invent PCR? • The basic principle of replicating a piece of DNA using two primers had already been described by Gobind Khorana in 1971:– Kleppe et al. (1971) J. Mol. Biol. 56, 341-346. • Progress was limited by primer synthesis and polymerase
能催化从四种5′-脱氧核苷三磷酸游离出焦磷酸而使DNA进行聚合反应的酶。EC2.7.7.7.。必须以DNA为模板，合成的DNA与模板具有互补的碱基排列（碱基互补性）。是与DNA复制和修复有关的重要的酶，虽可从许多组织分离出来，但对大肠杆菌的这种酶的研究较为先进。康伯格（A.Kornberg，1958）最初从大肠杆菌将此酶纯化，并弄清了其结构和特异性，但以后经过分子遗传学的研究，已明确了这种酶主要与DNA修复有关。因此重新进行与DNA复制有关酶的检索，发现两种新的酶。康伯格最初发现的酶称为
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