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- 细胞系构建
- 武汉
- 2026年01月07日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 提供商：
合研生物
- 服务名称：
单克隆细胞株构建
武汉合研生物医药科技有限公司坐落于光谷生物城，是一家专注于提供新药发现阶段的技术服务，以中小微新药研发企业为服务主体的创新型公司。合研生物拥有一支训练有素的药物研发技术团队，提供的服务覆盖虚拟筛选、酶学靶点筛选、抗肿瘤药物活性评价、细胞功能学检测、药理病理学服务等各项技术。我们的技术团队在分子生物学、细胞生物学、结构生物学等领域具有丰富的经验，通过酶水平、细胞水平测定等技术平台帮助客户进行化合物筛选及化合物特性、作用机制等研究。合研生物以高效、高性价比的专业服务帮助客户更快地达到目标，帮助客户推进药物发现的进程。
我们的服务
单克隆细胞系和多克隆细胞系
多克隆细胞系是基因转染后直接用抗药筛选得到的。筛选出的细胞都表达抗性基因和目的基因。但是包含了各种不同的细胞克隆。不同克隆的目的基因整合位置和表达量均有所不同。如果转染的基因包含了荧光标签，多克隆细胞直观地表现为包含多种不同亮度的细胞集合。
单克隆细胞系是从多克隆细胞中经细胞克隆挑选得到的，由一个细胞扩增得到的细胞株。每个细胞的目的基因整合位置的表达量均高度一致。
我们的细胞系都通过功能学的验证和稳定性的测试，能够为客户的药物研发提供很好的支持：
- 多克隆细胞株转染构建
- 抗生素克隆筛选
- 功能试验鉴定阳性克隆
- 阳性克隆试验条件优化
- 阳性化合物验证
- 稳定性验证-支原体检测
| 服务项目 | 筛选目的 | 客户须知 |
| 单克隆重组细胞株 | Gq型G蛋白偶联受体重组细胞系构建 | 基于钙离子浓度检测的单克隆细胞模型，可稳定测试20代 |
| Gi/s型G蛋白偶联受体重组细胞系构建 | 基于cAMP浓度检测的单克隆细胞模型，可稳定测试20代 | |
| 离子通道重组细胞系构建 | 基于膜电位的单克隆细胞模型，可稳定测试20代 | |
| 报告基因重组细胞系构建 | 基于报告基因的单克隆细胞模型，可稳定测试20代 |
1、细胞名称、来源、培养条件
2、稳转细胞系的类型（过表达/干扰/其他）
3、客户是否已进行载体构建
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文献和实验。它的优点是能构建同基因型的稳定细胞株，可以是多克隆稳定细胞株，无需单克隆筛选。 2）UCOE系统 产生背景 在G418、GS及DHFR三个筛选系统中，由于外源基因与宿主基因组发生的是随机非同源重组，当外源基因整合位置处于非转录活跃区或不稳定的区域时，外源基因会发生静默表达。为了克服位置效应带来的影响，提高筛选成功率及外源基因表达量，研究者通过基因工程的手段对表达载体进行改造。 UCOE系统——是Millipore公司推出的一套表达筛选系统，UCOE是一个小的DNA片段，源于看家基因的调控
1. 2 稳定转染细胞株的构建 原理： 稳定转染，就是转染的质粒DNA 整合到宿主细胞染色体上，使宿主细胞可 长期表达目的基因及蛋白。需要在瞬时转染基础上对靶细胞进行筛选或者应用高转染效率的病毒，根据不同基因载体中所含有的抗性标志选用相应的药物进行细胞传代，从而得到可稳定表达目的基因的细胞系。 应用： 观察目的基因及其表达蛋白在某种细胞中的功能（稳定，可长期进行研究） 一般流程：
细胞株构建新技术——IOS(Integration Operating System)
Island, NY, USA）。虽然在多个物种上得以验证，但是，TALEN技术也不可避免的出现脱靶的现象。同时，因为其在质粒构建时比较困难，加之后来出现的CRISPR /Cas9操作上更简单，效率与其相当，导致TALEN技术的应用和推广步履艰难。 CRISPR /Cas9在上个世纪80年被发现，直到2002才被命名，但是一直没有被想到并应用在基因编辑方向。直到哈佛大学的遗传学家George Church 利用CRISPR方法成功用于基因打靶，才出现后续多方面的应用。同样，CRISPR /Cas
