YT Taq DNA聚合酶(Taq酶)(含buffer)折扣

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名称：YT Taq DNA聚合酶(Taq酶)(含buffer)折扣价
编号：YT373
规格：200U|1000U
英文名：YT Taq DNA Polymerase
品牌：百奥莱博
产地：北京
YT Taq DNA Polymerase简称YT Taq酶，是一种兼顾了高保真性和高扩增效率的DNA聚合酶，是我司优先推荐的基因PCR克隆用酶。

YT Taq 酶可以催化5’至3’方向的依赖于DNA模板的脱氧核苷酸的聚合。同时YT Taq 酶有3’至5’的外切酶活性(proofreading activity)。另外，YT Taq 酶有5’至3’外切酶活性，但YT Taq 酶没有反转录酶活性。

由于YT Taq 酶有3’至5’的外切酶活性，因此在PCR扩增过程中出错的几率大大降低，出错率为1.6×10-6，略低于Pfu酶的2.6×10e-6
。
YT Taq 酶的DNA扩增效率大大高于Pfu酶，和Taq酶的扩增效率比较接近。因此YT Taq 酶很好地兼顾了扩增效率和扩增的准确性。

用途：高保真PCR (high fidelity PCR)、点突变、T载体克隆等各种常规PCR反应。
1)用YT Taq 酶扩增产生的PCR产物带有3’-dA overhangs，可以用于基于T载体的PCR片断克隆。
2)YT Taq 酶可以扩增长度达5kb的DNA片断，最长可以扩增长达10kb的DNA片断。通常适合扩增3kb以下的DNA片断。

活性定义：One unit of the enzyme catalyzes the incorporation of 10 nmol of deoxyribonucleotides into a
polynucleotide fraction (adsorbed on DE-81) in 30 min at 72℃. Enzyme activity is assayed in the following mixture: 20 mM Tris-HCl (pH 8.8 at 25℃), 2 mM MgSO4, 10 mM (NH4)2SO4, 10 mM KCl, 0.1% (v/v) Triton X-100, 0.1 mg/ml BSA, 0.75 mM activated calf thymus DNA, 0.2 mM of each dNTP, 0.4 MBq/ml [3H]-dTTP.

纯度：不含DNA内切酶、外切酶和磷酸酯酶，不含RNA酶，满足常规PCR反应要求。

酶储存溶液：20 mM Tris-HCl (pH 8.0), 1 mM DTT, 0.1 mM EDTA, 100 mM KCl, 0.1% (v/v) Nonidet P40, 0.1% (v/v) Tween 20 and 50% (v/v) glycerol。
10×YT Taq Buffer (with Mg2+)：200 mM Tris-HCl (pH 8.8 at 25℃), 100 mM (NH4)2SO4, 100 mM KCl, 20mM MgSO4, 1% (v/v) Triton X-100, 1 mg/ml BSA。

失活或抑制：酚*仿抽提可以使YT Taq 酶失活。

储存条件：-20℃

注意事项：
1）由于PCR反应非常灵敏可以扩增目的基因序列超过1000万倍，在使用YT Taq 酶时请注意避免微量待扩增DNA的污染，并尽量考虑设置不加模板的空白对照以确认是否有待扩增DNA的污染。
2）YT Taq 酶有3’至5’的外切酶活性，在没有dNTP的情况下可以降解引物。因此YT Taq 酶一定要最后加入，并且要在冰浴上操作。

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·溶酶体红色荧光探针
编号：YT177
英文名称：Lysosome Tracker Red
规格：50μl
本探针一种溶酶体红色荧光探针，可以用于活细胞溶酶体特异性荧光染色。

本探针为采用Molecular Probes公司的DND 99进行了荧光标记的带有弱碱性的荧光探针，可以选择性地滞留在偏酸性的溶酶体中，从而实现对于溶酶体的特异性荧光标记。中性红(Neutral Red)和吖啶橙(Acridine Orange)也都可以对溶酶体进行荧光染色，但中性红和吖啶橙的染色缺乏特异性。

本探针呈红色荧光，检测时的最大激发波长为577nm，最大发射波长为590nm。按照1:20000的比例稀释，可以配制1000ml探针工作液。

注意事项：
1. 本探针在4℃、冰浴等较低温度情况下会凝固而粘在离心管管底、管壁或管盖内，可以20-25℃水浴温育片刻至全部融解后使用。对于微量的液体，每次使用前先离心数秒钟，使液体充分沉降到管底。
2. 荧光染料均存在淬灭问题，请尽量注意避光，以减缓荧光淬灭。

储存条件：-20℃避光，有效期6个月。


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·PKCα抗体
编号：YT839
英文名称：anti-PKCα antibody
规格：>20次
本抗体是用经过适当修饰的人工合成的人PKCalpha羧基端一段多肽作为抗原免疫rabbit，制备得到的抗PKCα兔单克隆抗体。本抗体如果用于常规的Western检测，至少可以检测20次。

本PKCα抗体识别的是总PKCα(total PKCα)，可以检测内源性的PKCα，未发现和其它PKC激酶如PKCβ和PKCγ有交叉反应。

PKC(protein kinase C)属于丝*酸/苏*酸蛋白激酶，参与体内多种重要生理过程，包括细胞存活、细胞增殖、细胞分化、细胞迁移、细胞粘附、基因转录调控、发育等。PKC被分为三类。经典的PKC(classical PKC)是*离子依赖的，可以被磷酯酰丝*酸、二酰基甘油或佛波酯(phorbol ester，如TPA/PMA)所激活，包括PKCα、PKCβI、PKCβII和PKCγ。经典的PKC有独立的*离子依赖的磷酯酰丝*酸结合位点和独立的二酰基甘油或佛波酯结合位点。新型PKC(novel PKC)不依赖于*离子，但还是可以被磷酯酰丝*酸、二酰基甘油和佛波酯所激活，包括PKCδ、PKCε、PKCη和PKCθ。非典型PKC(atypical PKC)不依赖于*离子，也不需要磷酯酰丝*酸、二酰基甘油和佛波酯来激活其酶活性，包括PKCζ、PKCμ和PKCι/λ。在缺乏一些辅助因子(cofactor)或激活因子(activator)时，这三类PKC都有假底物(pseudo substrate)或自抑制结构域结合到其催化结构域的底物结合位点，从而阻止其激活。PKCα激活结构域的Thr497被PDK1(phosphoinositide-dependent kinase-1)磷酸化是其Thr638发生自身磷酸化所必需的。PKCα的Thr638磷酸化是调节PKCα去磷酸化和失活的关键步骤。

产品组份：
PKCα抗体————20μl
Western一抗稀释液————20ml

抗体参数：

免疫原物种：人
免疫原：人工合成的人PKCalpha羧基端一段多肽
克隆性：单克隆
宿主：兔
用途：WB,IP,IC, IHC-P, FCM
交叉反应性：人，小鼠，大鼠
抗体识别位点：PKCα C-terminal
PKCα分子量：～75-80kD
推荐稀释比例：WB(1:1000),IP(1:50),IC(1:100),IHC-P(1:100),FCM(1:30)


注意事项：
1. 在Western实验后，请注意回收稀释的抗体。回收的抗体在进行Western实验时至少可以重复使用10次。稀释后的抗体，包括已经使用过的稀释抗体，4℃保存。
2. 回收后重复使用的抗体，使用方法同新鲜稀释的抗体。如果在重复使用过程中发现抗体出现轻微混浊现象，可以10000g离心1-3分钟，取上清用于后续检测。如果回收的抗体出现明显的絮状物或长霉长菌等情况，则可以考虑废弃该抗体。

储存条件：-20℃，有效期一年。


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·磷酸化Rb(Ser807/811)抗体
编号：YT842
英文名称：anti-Phospho-Rb(Ser807/811) antibody
规格：>20次
本抗体是用人工合成的含磷酸化Ser807/811的一段人Rb多肽经过适当修饰后免疫rabbit，然后用protein A和抗原多肽亲和柱经过两步纯化得到的高纯度抗体。本抗体如果用于常规的Western检测，至少可以检测20次。

本Phospho-Rb(Ser807/811)抗体识别Ser807/Ser811被磷酸化的Rb，可以检测内源性的Phospho-Rb(Ser807/811)，和Ser608磷酸化的Rb有一定的交叉反应。

Rb(retinoblastoma protein，也称pRb)，是一种抑癌基因，可以通过调控细胞周期G1期的控制点来调节细胞增殖。Rb含有3个功能上不同的蛋白结合结构域，这些不同结构域的结合蛋白包括E2F家族转录因子，C-Abl tyrosine kinase和含有保守的LXCXE motif的蛋白。细胞周期依赖的CDK磷酸化会抑制Rb结合其靶蛋白，从而使细胞周期顺利进行。Rb失活和细胞周期的顺利进行，需要cyclin D-CDK4/6的磷酸化和随后的cyclin E-CDK2的磷酸化。Rb有至少16个CDK磷酸化位点，其中Ser807和Ser811可以被CDK4复合物如cyclin D-CDK4/6所磷酸化，从而抑制其和相关转录调控因子的结合。Rb在G1期的磷酸化水平比很低，但进入M期Rb会处于高度磷酸化状态。低磷酸化水平的Rb可以通过结合E2F等转录调控抑制而抑制细胞增殖，而Rb的高度磷酸化则会释放E2F等转录调节因子，促进S期所需基因的转录。

产品组份：
Phospho-Rb(Ser807/811)抗体————20μl
Western一抗稀释液————20ml

抗体参数：

免疫原物种：人
免疫原：含磷酸化Ser807/811的一段人Rb多肽
宿主：兔
用途：WB,IP,IHC-P
交叉反应性：人，大鼠，猴子
Rb分子量：～110kD
推荐稀释比例：WB(1:1000),IP(1:200),IHC-P(1:300)

注意事项：
1. 在Western实验后，请注意回收稀释的抗体。回收的抗体在进行Western实验时至少可以重复使用10次。稀释后的抗体，包括已经使用过的稀释抗体，4℃保存。
2. 回收后重复使用的抗体，使用方法同新鲜稀释的抗体。如果在重复使用过程中发现抗体出现轻微混浊现象，可以10000g离心1-3分钟，取上清用于后续检测。如果回收的抗体出现明显的絮状物或长霉长菌等情况，则可以考虑废弃该抗体。

储存条件：-20℃，有效期一年。

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