一步法耐热RT-PCR试剂盒价格

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名称：一步法耐热RT-PCR试剂盒价格
产地：国产|进口
英文名：One step reverse transcription heat-resistant PCR Kit
规格：50μl×50次|50μl×100次
品牌：百奥莱博
本试剂盒是专为一步法RT-PCR实验配制的，使用该试剂盒能够方便快捷的在同一个反应管内完成逆转录反应和PCR扩增反应。反应过程中无需打开管盖添加试剂，避免了污染的同时提高了检测灵敏度和实验效率。本试剂盒包括多点突变改造耐热M-MuLV逆转录酶、热启动HotMaster Taq DNA聚合酶和RNasin抑制剂mix、同时包含适用于逆转录和PCR扩增的优化独特反应体系。本酶M-MuLV(RNase Hˉ)的RNase H活性缺失，与M-MuLV 相比，具有更强的延伸能力和稳定性，可用于较长的cDNA合成以及高比例的全长cDNA文库的构建等。同时该酶可以在高达50-60℃反转录，大大提高了复杂二级结构，GC含量丰富模板反转录效率，产量敏感度和特异性比一般试剂盒显著特高。

试剂盒组分(50次)：
2×RT-PCR Mix——————————625μl
Enzyme Mix-———————————25μl
耐热RTase————————————25μl
RNase free H2O-—————————1.5ml

适用范围：适用于高拷贝、低拷贝基因检测；适用于高GC含量或具有复杂二级结构的RNA模板。

注意事项：
1. 避免RNase污染。
2. 为保证反应成功建议使用高质量的RNA模板
3. 不同的片段，所需最佳RNA模板用量不同，过多的RNA会抑制反应，建议根据反应调整模板用量。
4. 不能使用Oligo(dT) 和Random Primer 合成cDNA。

储存条件：-20℃，有效期半年。

本品别名：一步法耐热RT-PCR试剂盒|耐热一步法反转录PCR试剂盒

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·植物RNA大提试剂盒
编号：ALH040
英文名称：Plant RNA Extraction Kit
规格：10次
本试剂盒适用于植物组织细胞总RNA快速大量提取。使用独特的裂解液/β-巯基乙醇迅速裂解细胞和灭活细胞RNA酶，植物RNA助提剂帮助结合多糖多酚并通过离心去除,然后用乙醇调节结合条件后,RNA在高离序盐状态下选择性吸附于离心柱内硅基质膜，再通过一系列快速的漂洗－离心的步骤, 去蛋白液和漂洗液将细胞代谢物，蛋白等杂质去除， 最后低盐的RNase free H20将纯净RNA从硅基质膜上洗脱。

本试剂盒特点：
1.离心吸附柱内硅基质膜全部采用进口世界著名公司特制吸附膜，柱与柱之间吸附量差异极小，可重复性好。克服了国产试剂盒膜质量不稳定的弊端。
2.不需要使用有毒的苯酚，氯*(代"仿")等试剂，也不需要乙醇沉淀等步骤。
3.快速，简捷，单个样品操作一般可在60分钟内完成。
4.独特的植物RNA助提剂可以有效结合多糖多酚,提高清除效果。
5.多次柱漂洗确保高纯度，OD260/OD280典型的比值达1.9～2.0，基本无DNA残留,可用于RT-PCR，Northern-blot和各种实验。

试剂盒组份：

组份	10次
裂解液RLT	100 ml
去蛋白液RW1	120 ml
漂洗液RW	25ml×2
RNase-freeH2O	10ml
PLANTbalb	10ml X 2
吸附柱和收集管	10套

注意事项
1. 所有的离心步骤均可在室温完成，使用可容纳50ml 离心管的离心机。
2. 需要自备乙醇， β-巯基乙醇，一次性注射器（可选），研钵。
3. 裂解液RLT 和去蛋白液RW1中含有刺激性化合物，操作时要戴乳胶手套，避免沾染皮肤，眼睛和衣服。若沾染皮肤、眼睛时，要用大量清水或者生理盐水冲洗。
4. 植物组织裂解是否充分直接影响到RNA 提取的质量和产量，本试剂盒中提供的裂解液RLT，主要成分为异硫氰酸胍，适用于大多数植物组织的裂解，但有些植物组织（例如玉米的乳白色胚乳）或丝状真菌，由于次级代谢产物较特殊，异硫氰酸胍使样品产生固化，导致RNA 无法提取，此时可以向我们索取另一种裂解液RLC，将解决该问题。
5. 关于DNA 的微量残留:
一般说来任何总RNA提取试剂在提取过程中无法完全避免DNA 的微量残留,本试剂盒RNA提取产品，由于采取了本公司独特的缓冲体系和选择了特殊吸附能力的吸附膜，在大多数RT-PCR 扩增过程中极其微量的DNA 残留（一般电泳EB 染色紫外灯下观察不可见）影响不是很大, 如果要进行严格的mRNA 表达量分析如荧光定量PCR,我们建议在进行模板和引物的选择时：
1) 选用跨内含子的引物,以穿过mRNA中的连接区,这样DNA就不能作为模板参与扩增反应。
2) 选择基因组DNA和cDNA上扩增的产物大小不一样的引物对。
3) 将RNA提取物用RNase-free的DNase I 处理。本试剂盒还可以用于DNase I处理后的RNA清洁,请联系我们索取具体操作说明书。
4) 在步骤去蛋白液RW1漂洗前，直接在吸附柱上进行DNase I处理。请联系我们索取具体操作说明书。
6. RNA 纯度及浓度检测:
完整性： RNA 可用普通琼脂糖凝胶电泳(电泳条件：胶浓度1.2%；0.5×TBE 电泳缓冲液；150v，15 分钟)检测完整性。由于细胞中70%-80%的RNA 为rRNA，电泳后UV 下应能看到非常明显的rRNA 条带。动物rRNA 大小分别约为5 kb 和2kb，分别相当于28S 和18S rRNA。动物RNA 样品中最大rRNA 亮度应为次大rRNA 亮度的1.5-2.0 倍，否则表示RNA 样品的降解。出现弥散片状或条带消失表明样品严重降解。
纯度：OD260/OD280 比值是衡量蛋白质污染程度的指标。高质量的RNA，OD260/OD280 读数（10mMTris, pH7.5）在1.8-2.1 之间。OD260/OD280 读数受测定所用溶液的pH 值影响。同一个RNA 样品，假定在10mM Tris，pH7.5 溶液中测出的OD260/OD280 读数1.8-2.1 之间，在水溶液中所测读数则可能在1.5-1.9之间，但这并不表示RNA 不纯。
浓度：取一定量的RNA 提取物，用RNase-free 水稀释n 倍，用RNase-free 水将分光光度计调零，取稀释液进行OD260, OD280 测定，按照以下公式进行RNA浓度的计算：终浓度（ng/μl）= (OD260)×(稀释倍数n)×40

储存条件：室温，有效期6个月。


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