- ￥138 - 253
- 晶抗生物
- JK_C6378
- 国内
- 2025年07月15日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 英文名：
Taq Plus DNA Polymerase(含预混Mg2+的10×Taq Plus Buffer)
- 保质期：
3年
- 保存条件：
低温保存
- 供应商：
上海晶抗生物工程有限公司
- 规格：
250 U,2.5 U/ul / 500 U,2.5 U/ul
| 规格： | 250 U,2.5 U/ul | 产品价格： | ￥138.0 |
|---|---|---|---|
| 规格： | 500 U,2.5 U/ul | 产品价格： | ￥253.0 |
Taq Plus DNA Polymerase(含预混Mg2+的10×Taq Plus Buffer)
产品特点
Taq Plus DNA Polymerase 是从克隆有 Thermu aquaticus DNA Polymerase 基因的大肠杆菌经诱导表达后分离纯化的，其分子量为 94 KD，经与 Pfu 按一定比例混合而成，该酶可增强扩增的保真性，大大增强扩增的特异性和扩增效率。Taq Plus DNAPolymerase具有 5’-3’DNA 聚合酶活性和 5’-3’外切核酸酶活性，较弱的 3’-5’外切酶活性。在PCR中，该酶延伸速度为 1 ~ 2 kb/min，产物 3’端带 A，可直接用 TA 载体克隆。一般用于DNA片段的 PCR 扩增、DNA 标记、引物延伸、序列测定等。
成分规格
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产品组成 |
规格 |
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Taq Plus DNA polymerase |
250Ｕ/ 2.5U/μl |
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10 × Taq Plus Buffer（含 Mg2+） |
1m / 2*1 ml |
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-20℃，有效期 1 年 | |
|
本产品仅供科研使用 ，不得用于其它用途 | |
注 意：以下举例为常规PCR反应体系和反应条件，实际操作中应根据模板、引物结构和目的片段大小不同进行相应的调整和优化）
1. PCR 体系：
推荐体系（50μl）
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试剂 |
用量 |
|
模板 DNA |
< 1μg |
|
10 × Taq Plus Buffer |
5μl |
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dNTP Mixture(2.5 mM each) |
4μl |
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Primer 1 (10 μM) |
2μl |
|
Primer 2 (10 μM) |
2μl |
|
Taq Plus DNA Polymerase (2.5 U/μl) |
0.5 ~ 1μl |
|
ddH2O |
Up to 50μl |
A. 引物浓度请以终浓度 0.1-1.0μM 作为设定范围的参考。扩增效率不高的情况下，可 提高引物的浓度；发生非特异性反应时，可降低引物浓度，由此优化反应体系。
B. 镁离子浓度请以终浓度 1.5-3mM 作为设定范围的参考。可根据不同的引物对和模板 来调节镁离子浓度，由此优化反应体系）
2. PCR 程序
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过程 |
温度 |
时间 | |
|
预变性 |
94℃ |
5min | |
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25－35cycles |
变性 |
94℃ |
30sec |
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退火 |
55－65℃ |
30sec | |
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延伸 |
72℃ |
1kb/30sec | |
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终延伸 |
72℃ |
5min | |
注 意：
A. 一般实验中退火温度比扩增引物的熔解温度 Tm 低 5℃，无法得到理想的扩增效率时，适当降低退火温度；发生非特异性反应时，提高退火温度，由此优化反应条件。
b. 延伸时间应根据所扩增片段大小设定，Taq Plus DNA Polymerase 的扩增效率为1 kb/30 sec。
C. 可根据扩增产物的下游应用设定循环数。如果循环次数太少，扩增量不足；如果循环次数太多，错配机率会增加，非特异性背景严重。所以，在保证产物得率的前提下，应尽量减少循环次数）
3. 结果检测：
反应结束后取 5 μl 反应产物，加入适量上样缓冲液后进行琼脂糖凝胶电泳检测。
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文献和实验out the E.coli strain carrying the Taq polymerase gene on an LB amp plate and innoculate a 5 ml overnight culture with a single colony.• Innoculate a 1 liter culture of LB-amp with the 5 ml of overnight culture and grow to an A600 of 0.2.Add IPTG to a final
High Specificity PCR Amplification Using AccuPrime Taq DNA Polymerase
Taq DNA Polymerase 0.25 µl 0.5 µl 1 µl Autoclaved distilled water To 10 µl To 25 µl
Dideoxy Sequencing Reactions Using Taq Polymerase
Tuq DNA polymerase is a highly stable polymerase isolated from the thermophilic organism Thermus aquaticus . Because of its unique properties this enzyme has been extensively used for amplification of DNA fragments by the polymerase chain
