北京BTN131211型96孔板PCR片段纯化回收试剂盒(真

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百奥莱博专业生产销*(代"售")北京BTN131211型96孔板PCR片段纯化回收试剂盒(真空法)优惠促销，我公司供应的分子生物学试剂品类齐全，且具有优势价格，欢迎新老客户垂询订购。

名称：北京BTN131211型96孔板PCR片段纯化回收试剂盒(真空法)优惠促销
编号：BTN131211
规格：1次
英文名：PCR fragment Purification Kit(with 96-wells plate)
品牌：百奥莱博
产地：北京

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·制霉菌素溶液
编号：BTN120694
英文名称：Nystatin Solution
规格：10mL
本产品是浓度为10mg/mL的制霉菌素甲醇溶液。参考浓度为2mg/mL。制霉菌素(制霉素;米可定；Nystatin；Fungicidin ；Mycostatin)，分子式：C18H28O2，分子量：276.41，CAS：1400-61-9。微溶于水、甲醇、乙醇。

抗性机制：制霉菌素具有共轭多烯大环内酯结构，能抑制真菌和皮藓菌的活性，对细菌无抑制作用。通过与细胞膜上的固醇类物质结合增加细胞膜对渗透的敏感性，抗霉菌及酵母，可用于高纯细胞培养，防腐。

储存条件：低温运输，-20℃避光保存，有效期6个月。

·Sulfolobus DNA聚合酶IV
编号：BTN131182
英文名称：Sulfolobus DNA Polymerase IV
规格：100U
Sulfolobus DNA聚合酶IV是一种热稳定的Y家族DNA聚合酶，能在复制过程中绕过DNA损伤，因而能以多种损伤DNA为模板合成DNA。

产品特点：
1．以损伤DNA为模板合成DNA。
2．DNA修复。

产品组成：

 

成份	规格
Sulfolobus DNA聚合酶IV(2000U/mL)	50μL
10×Buffer	1.5mL
使用手册	1份

储存条件：低温运输，-20℃保存，有效期一年。


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·长效期SDS-PAGE上样液
编号：BTN100911
英文名称：Stable SDS-PAGE Loading Buffer
规格：1mL
本产品是专门用于长效SDS-PAGE电泳的上样液(5×)，即开即用，简便快捷。

储存条件：低温运输、-20℃保存，有效期一年。

·PCR法DNA探针标记试剂盒
编号：BTN90604A
英文名称：PCR DNA Labeling Kit
规格：5次
PCR标记的原理是用带标记的dNTP进行PCR，最后得到的PCR产物将带有标记，可以直接用于杂交试验。其原理示意图如下：


产品特点：
1.一站式，本试剂盒提供经过优化的试剂，不需要用户自己摸索。
2. 足够10次50μl体系的常规PCR(用于制备标记反应的模板和设置对照反应)和5次50μl体系的标记反应。
3.一次标记可以得到μg级的双链DNA探针或约700ng的单链DNA探针，足够多次杂交实验用。
4. 既可用于制备双链探针，也可以用于单链探针。
5. 90604A需自备含标记核苷酸的dNTP，90604B和90604C分别含生物素和地高*(代"辛")标记的底物。自备的标记包括fluorescein-dUTP、hydroxycoumarin-dUTP、resorufin-dUTP和aminoallyl-dUTP等。
6. 本产品得到的探针参入率一般为4-5%(每100个核苷酸中有4-5个将带有非同位素标记)，有效降低了空间阻碍，检测效果最佳。
7.可以用于Southern和Northern Blot、原位杂交、菌落和斑点印迹杂交等分析。

试剂盒组成：

成分	规格
2×标记专用PCR Mix	500μl
dNTP，2mM each	50μl
含Biotin-11-dUTP的dNTP	25μL(仅B有)
含DIG-11-dUTP的dNTP	25μL(仅C有)
超纯水	1ml
说明书	1份

注：标记专用PCR Mix不含dNTP。

储存条件：低温运输，-20℃保存，有效期一年。

使用方法：

一：准备工作
1. 按常规的方法设计PCR引物，使探针长度在400-800bp之间。过短则标记参入少，探针杂交信号强度减弱；过长则非特异杂交增加，背景变强。
2. 根据PCR引物优化PCR条件。
3. 由于标记的dNTP比较珍贵，所以本试剂盒不推荐以基因组DNA或其他复杂DNA为模板直接进行PCR标记，而是建议采取下述的两步法标记来提高成功率，即先制备非标记PCR产物，再以之为模板制备标记的PCR产物。
二：非标记PCR产物的制备
4. 设置50μL PCR的反应体系：

成份	用量
2×标记专用PCR Mix	25μl
dNTP，2mM each	5μl
自备的探针引物一(10pmol/μL)	1μL(10μM)
自备的探针引物二(10pmol/μL)	1μL(10μM)
自备的模板DNA	1μg基因组DNA或1ng质粒DNA
超纯水	补到50μL

5. 按已经优化的PCR参数进行PCR。
6.电泳检测和胶回收所需的PCR产物，并定量。用10 pmol引物一般能得到1μg左右的PCR产物(具体取决于PCR产物的长度)。注意：最好采取胶回收而不是PCR回收以避免残留引物干扰后续的标记PCR。
三：标记PCR反应(最好做一个不加标记的对照用于定量)
说明：在设置下面反应时，如果加一种引物，就得到单链标记的PCR产物；如果加两种引物，则得到双链标记的PCR产物。由于双链PCR探针在杂交前虽然要变性成单链后使用，但杂交时变性的双链彼此还会复性，这种复性会与探针-靶DNA杂交反应相竞争，降低杂交效率，因此强烈推荐使用单链标记的DNA探针。

成份	样品	对照
2×标记专用PCR Mix	25μl	25μl
含Biotin-11-dUTP的dNTP或 含DIG-11-dUTP的dNTP或 自备的含其他标记dUTP的dNTP	5μl	不加
dNTP，2mM	不加	5μl
双链标记：探针引物一和引物二 单链标记：探针引物一或引物二	每种50 pmol 一种50 pmol	每种50 pmol 一种50 pmol
上步胶纯化所得PCR产物 (单链标记可用100ng)	10 ng	10 ng
超纯水	补到50μL	补到50μL

 注意：本试剂盒提供的dNTP混合物中，标记底物与非标记底物的比例已经进过优化，如果自备标记dUTP，其与dTTP的最佳比例需要优化，标记不同，比例不同。对DIG-11-dUTP，最佳比例1：3；对BrdUTP，最佳比例为1：1。
7. 按第5步的PCR参数进行标记PCR，但需要进行下列修改：一是循环数增加到35-55个循环。由于模板为纯化后的PCR产物，探针对扩增长度完整性要求不高(长度不均的探针由于能形成网络结构，效果反而更好)，所以可以增加循环数；二是延伸时间增加15秒，因为标记dUTP参入到DNA的速度比常规的dTTP慢；三是降低复性温度5-7℃，因为标记核苷酸参入到DNA后，新模板的Tm值将降低。
8. 标记探针的定量：取标记反应和对照反应的产物1-5μl，在琼脂糖凝胶上跟浓度已知的DNA marker一起电泳，并判断探针的浓度。由于标记反应的PCR产物中额外带有非同位素的配体(生物素，地高*(代"辛")等)、因此其泳动速度将慢于非标记PCR产物(但同位素标记不能用此法)。
 注意：如果扩增的是单链DNA探针，其结合EB的能力远低于双链DNA(EB是嵌合到双链碱基对之间的，而单链DNA没有碱基对，只有一些局部区域折叠形成的有限双链区，因此能结合的EB很少)，因此EB染色的强弱不能准确反应DNA的浓度，可以采用银染定量(跟marker比较)。一般100ng模板按上述条件经过单链PCR扩增可得到700ng左右探针。
9. 剩余的PCR标记产物可以不经过纯化，直接加入(对单链PCR探针)杂或加热变性并急冷后加入(对双链PCR探针)到杂交液中使用。如果暂时不用请放-20℃长期保存。如果需要纯化，请使用乙酸铵/乙醇沉淀法。


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KFS380 丙二醛(MDA)测试盒／脂质过氧化物(LPO)测试盒
SY0627 rac-GR24 独脚金内酯 strigolactones
SY0058 萤火虫荧光素酶报告基因检测试剂盒 Luciferase Reporter Gene Assay Kit
BTN130870 硫氧还蛋白 Thioredoxin
KFS034 多聚赖*酸溶液0.1%(Poly L-Lysine)
SY0261 琼脂糖(片剂, 0.5g/片) Agarose Tablets
YT347 FRAP/mTOR抑制剂(Rapamycin) AY 22989
BTN81202 真菌总蛋白质微量提取试剂盒 Fungal Total Protein Miniprep Kit
HR0003 核蛋白提取试剂盒 Nuclear Protein Extraction Kit
SV0921 Deep VentR DNA 聚合酶
WE0397 游离DNA样本保存管(5ml,PET) Cell-Free DNA Storage Tube(PET,5ml)
BTN151103 超级电泳液 Superbuffer
SV1384 T4 RNA 连接酶 2，截短型
RFT200 吉姆萨染色液 Giemsa Stain Solution
KFS279 紫杉醇(Paclitaxel) Paclitaxel；TAXOL
SY0515 小鼠纤连蛋白 Mouse Fibronectin
SV0552 NotI限制性内切酶 NotI Restriction Endonuclease
BTN131181 EDTA溶液 EDTA Solution
HR0464 TRAIL/Apo2L  TRAIL/Apo2L
SY0157 SREBP-GFP报告基因质粒 SREBP GFP Reporter Plasmid
YT242 p53凝胶迁移突变探针(10μM) p53 Mutation Probe For EMSA(10μM)

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