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- 百奥莱博
- BTN60106-JSG
- 北京
- 2025年07月14日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
784
- 英文名：
dT Tailing Kit
- 保质期：
一年
- 供应商：
北京百奥莱博科技有限公司
- 保存条件：
低温运输，-20℃保存，有效期一年。使用方法：一：反应前纯化处理：平末端DNA片段或平末端质粒DNA可以采取胶回收和酚/氯仿抽提法等常规方法纯化，最后溶解在水或TE中，终浓度以0.1μg/μL为宜。必须注意的是，用Vent，Deep Vent，Pfu，Pwo等具有3到5外切活性的DNA聚合酶扩增得到的DNA片段，必须经过彻底的去除残留的酶的处理过程(如酚/氯仿抽提或Proteinase K处理)，否则它们将在加T反应时，切除掉加上的T尾巴，干扰反应。二：加T反应在干净的0.5mL或1.5mL离心管中，分别加入下列成分：<table width=450 border=1 style="border-collapse:collapse;text-align:center;border:black;"><tr><td>回收的DNA片段<td>0.2-2μg<tr><td>2×dT Tailing Buffer<td>25μL<tr><td>Taq DNA polymerase(5U/μL)<td>1μL<tr><td>补水到<td>50μL<tr><td colspan=2>72℃
特别声明：本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品，严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
北京现货平末端DNA加T试剂盒优惠是高品质的克隆与表达产品，由北京百奥莱博供应，用于生化研究，本产品质量好，且极具价格优势，深为用户称道，了解更多平末端DNA加T试剂盒等克隆与表达产品请联*(代"系")我司咨询订购。
名称：平末端DNA加T试剂盒
编号：BTN60106
规格：50次
英文名：dT Tailing Kit
品牌：百奥莱博
产地：北京
本产品利用Taq DNA polymerase的不依赖于模板的末端转移酶活性，在只有dTTP存在的情况下，在平末端的DNA片段加上一个dT尾巴，主要用于制备T载体。其流程图如下：
产品特点：
1. 简单，2X Tailing Buffer中含有所需要的所有成分,不需要单独准备。
2.适用于任何平末端的DNA片段，包括Pfu DNA成本polymerase等酶合成的DNA片段。
3. 加T后的载体可以作为T载体使用。
产品组成：
| 成分 | 规格 |
| Taq DNA olymerase(5U/μL) | 50μl |
| 2×dT Tailing Buffer | 1.25ml |
| 说明书 | 1份 |
储存条件：低温运输，-20℃保存，有效期一年。
使用方法：
一：反应前纯化处理：
平末端DNA片段或平末端质粒DNA可以采取胶回收和酚/*仿抽提法等常规方法纯化，最后溶解在水或TE中，终浓度以0.1μg/μL为宜。必须注意的是，用Vent，Deep Vent，Pfu，Pwo等具有3到5外切活性的DNA聚合酶扩增得到的DNA片段，必须经过彻底的去除残留的酶的处理过程(如酚/*仿抽提或Proteinase K处理)，否则它们将在加T反应时，切除掉加上的T尾巴，干扰反应。
二：加T反应
在干净的0.5mL或1.5mL离心管中，分别加入下列成分：
| 回收的DNA片段 | 0.2-2μg |
| 2×dT Tailing Buffer | 25μL |
| Taq DNA polymerase(5U/μL) | 1μL |
| 补水到 | 50μL |
| 72℃保温2小时 | |
三：反应后处理
加T反应后，Taq DNA polymerase将与DNA末端紧密结合，所以必须酚/*仿抽提去除。如果使用Proteinase K处理后再用酚/*仿抽提效果会更好。得到的DNA溶于适量水和TE中后即可用于后续连接反应。
关键词：平末端DNA加T试剂盒,BTN60106,dT Tailing Kit
我公司的北京现货平末端DNA加T试剂盒优惠，性价比高，货期短，送货上门，欢迎您来电咨询购买，另外，我公司还生产供应销*(代"售")下列产品：
| 编号 | 名称 |
| BTN140378 | 大肠杆菌BL21-CondonPlus(DE3)-RIPL化学感受态细胞 |
| BTN90603A | 随机引物法DNA探针标记试剂盒 |
| BTN131069 | 还原剂兼容型BCA蛋白定量试剂盒 |
| BTN90313 | TBE电泳液，10× |
| BTN60602 | 柱式植物DNA提取试剂盒 |
| BTN70102A | 蛋白marker(3.3～20.1kD) |
| BTN61205 | 血清白蛋白清除剂 |
| BTN140649 | 1mL亲和层析柱 |
| BTN70602 | DNA快速连接试剂盒 |
| BTN3070 | 动物RNA提取试剂(TRIzol) |
| BTN90605A | TdT加尾法DNA探针标记试剂盒 |
| BTN80915B | 超级杂交液(含50%甲酰胺) |
| BTN91103 | 非冻型拭子病毒保存液 |
| BTN70503X | DNA marker(100-1500bp) |
| BTN131247 | 4%多聚甲醛(RNA专用) |
 |
|
| BTN130536 | 抑*肽酶溶液(5mg/mL) |
| BTN100875 | DNA非变性PAGE上样液 |
| BTN131013 | ATP溶液，1mM |
| BTN90603B | 随机引物法DNA探针生物素标记试剂盒 |
| BTN140383 | 农杆菌EHA105化学感受态细胞 |
| BTN130918 | dITP溶液(2.5mM) |
| BTN130627 | 核酸外切酶T |
| BTN51203 | 非酶RNA清除剂1.0 |
| BTN60201 | 非酶DNA清除剂(＞200nt) |
| BTN100937 | phi29 DNA聚合酶 |
 |
|
| BTN140405 | 细菌内毒素标准品(10EU/支) |
| BTN131187 | Acryl DNA助沉剂 |
| BTN130630 | 糖原PAS染色液(真菌专用) |
| BTN101219 | 即用型荧光定量RT-PCR试剂盒 |
| BTN130914 | dGTP溶液(2.5mM) |
| BTN3130B | 三合一RNA上样液(B型,6X) |
| BTN90308 | 亲和硅烷 |
| BTN140576 | 大肠杆菌DH10Bac化学感受态细胞 |
| BTN70601 | 粪便DNA提取试剂盒 |
| BTN100823 | SOC培养基 |
| BTN130533 | 木瓜蛋白酶抑制剂溶液(0.5mg/mL) |
| BTN90602I | DNA marker(φX174 DNA/Hinc II) |
| BTN120506 | T4聚核苷酸激酶 |
| BTN121206 | DNA稀释液 |
 |
|
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文献和实验一、Lighteningssembly Cloning Kit 传统克隆方法：引物设计合成、PCR、连入克隆载体、酶切获得插入片段，酶切获得线性载体，连接获得重组质粒。需酶切，引物设计受酶切位点限制；需连入克隆载体；步骤多，耗时长；效率低。 北京康碧泉公司代理的Gene-Foci试剂盒的克隆方法：引物设计合成、PCR获得插入片段，PCR或酶切获得线性载体，连接获得重组质粒。无需酶切，引物设计不受酶切位点限制；无需连入克隆载体；步骤少，速度快；高连接效率，高
/GATCY) 这几个酶切产物粘端突出部分都一样是 5’GATC，能互补，可以相互连接。此外，所有平末端酶切产物都可以相互拼接，只是连接效率低些。要是运气再背点、酶切粘端怎么都不配对？用 Klenow 大片段或者T4聚合酶或“削平”或“补齐”得到平末端，再“强行连接”。。。这种目标片段前后都是平端的、或者单酶切的，载体“自恋”（自我连接）还可以用大小区分，目标片段可能正向接入或者倒装，如何在筛选时进行区分，又多了一个麻烦事儿。要是用到甲基化敏感的内切酶，比如 HPhI（对 Dam、Dcm 甲基化敏感
血液基因组 DNA提取试剂盒操作指南（DP348）——200μl 以内抗凝全血
血液，红细胞有核细胞，因此处理量为5-20 μl，加缓冲液GS补足200 μl；当处理血样为血凝块，可选择液化柱CX1（TIANGEN，RK165）（需自备）对血凝块进行液化处理。实验准备-试剂盒准备：使用前先在漂洗液PWB中加入无水乙醇，加入体积请参照瓶上的标签。本文版权归天根生化科技（北京）有限公司所有,仅供个人学习使用,请勿转载
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