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278
- 英文名:
E.coli JM109 Chemical Competent Cell
- 保质期:
半年
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
- 保存条件:
-80℃
特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
百奥莱博专业生产销*(代"售")大肠杆菌JM109感受态细胞北京现货促销,我公司供应的分子生物学试剂品类齐全,且具有优势价格,欢迎新老客户垂询订购。
名称:大肠杆菌JM109感受态细胞北京现货促销
编号:BTN90207
规格:0.1mL*10
英文名:E.coli JM109 Chemical Competent Cell
品牌:百奥莱博
产地:北京
本产品是采用大肠杆菌JM109菌株经特殊工艺处理得到的感受态细胞,可用于DNA的化学转化。
产品特点:
1. 使用pUC19质粒检测,转化效率可达108,-80℃保存几个月转化效率不发生改变。
2. recA1和endA1突变阻止对克隆DNA的修饰或对宿主菌染色DNA的重组,提高纯化质粒的产量和质量。
3. JM109菌株基因型:endA1 recA1 gyrA96 thi hsdR17(rk-mk+)relA1 supE44 D(lac-proAB)[F’traD36 proAB laqlqZ Δ M15 ]
4. 本产品质量稳定,使用方便,质优价廉。
储存条件:干冰运输、-80℃保存,有效期半年。
自备试剂:无菌超纯水,SOB和SOC液体培养基,相关抗菌素。
使用方法:
1. 取感受态细胞置于冰浴中。一次转化感受态细胞的建议用量为50-100μl,可以根据实际情况分装使用。
以下实验以50μL感受态细胞为例。
2. 待感受态细胞融化后,向感受态细胞悬液中加入目的DNA(根据实际情况加入适量的DNA,通常100μl感受态细胞能够被1 ng超螺旋质粒DNA 所饱和),用移液器轻轻吹打混匀,冰浴30分钟。
3. 42℃热击90秒,迅速将离心管转移到冰浴中,冰上静置2-3分钟。
4. 每个离心管中加入450μl无菌的SOC或LB培养基(不含抗生素),混匀后置于37℃摇床,150rpm振荡培养45分钟使菌体复苏。
5. 根据实验需求,取适量已转化的感受态细胞,加到含相应抗生素的SOC或LB 固体琼脂培养基上,用无菌的涂布棒将细胞均匀涂开,将平板置于37℃直至液体被吸收,倒置培养,37℃培养12-16小时。
注意事项:
1、涂布用量可根据具体实验调整。若转化的DNA 总量较多,可取少量转化产物涂布平板;若转化的DNA 总量较少,可取200-300μl转化产物涂布平板。若预计的克隆数较少,可通过离心(4,000rpm ,2分钟)后吸除部分培养液,悬浮菌体后将其涂布于平板中。
2、新制备的固体培养基不易涂干,可将平板正置于37℃直至液体被吸收后再倒置培养。
我公司的大肠杆菌JM109感受态细胞北京现货促销,性价比高,货期短,送货上门,欢迎您来电咨询购买,另外,我公司还生产供应销*(代"售")下列产品:
·30mL亲和层析柱
编号:BTN140652
英文名称:Affinity Chromatography Colum(30mL)
规格:30mL
本产品适用范围广泛,可用于纯化分离重组蛋白、抗体和抗原、多肽、糖蛋白、磷酸化蛋白、DNA及DNA结合蛋白等生物大分子;还可以用于去除生物样品中的内毒素等污染。
亲和层析是利用生物分子间所具有的专一亲和力而发明的纯化技术。它是利用生物分子间存在的特异性相互作用(如抗原-抗体、酶-底物或抑制剂、激素-受体等),通过将具有亲和力的两个分子中的一个固定在不溶性基质上,利用分子间亲和力的特异性和可逆性,对另一个分子进行分离纯化。
亲和层析柱常见的使用方法有重力法、手动加压法、蠕动泵法,其示意图如下:

储存条件:常温运输及保存,有效期一年。
常用亲和标签及纯化方案:

大肠杆菌JM109感受态细胞北京现货促销关键词:E.coli JM109 Chemical Competent Cell,大肠杆菌JM109感受态细胞,BTN90207
HR0624 Pluronic F-127 F-127 Pluronic
SV1547 胰蛋白酶酶切的 BSA MS 标准
YT299 总谷胱甘肽过氧化物酶检测试剂盒 Total Glutathione Peroxidase Assay Kit
BTN120682 杆菌肽溶液 Bacitracin Solution
SY0626 草甘膦(甘草磷)(95%) Glyphosate
SV0826 S-adenosylmethionine(SAM)
WE0288 SDS-PAGE上样缓冲液(还原,5×) SDS-PAGE Loading Buffer(Reducing, 5×)
BTN70701 柱式病毒DNA提取试剂盒 Virus DNA column extraction kit
SY0259 双链DNA(dsDNA)定量试剂 Picogreen dsDNA Quantitation Reagent
RFT104 M-MLV反转录酶(RNase H-) Reverse Transcriptase M-MLV(RNase H-)
KFS232 FAS-L蛋白检测试剂盒 FAS-L Detection Assay(Western Blot)
SY0472 细胞凋亡检测试剂盒(Annexin V-EGFP/PI) Annexin V-EGFP/PI Apoptosis Detection Kit
YT606 谷胱甘肽合成酶1 Glutathione Synthase 1 (Crude Enzyme)
BTN130863 碘化丙啶(PI)干粉 Propidiumodide,Powder
HR0387 His标签蛋白纯化填料(带柱子) His tag protein purification packing (with column)
SV1382 T4 RNA 连接酶 2,截短型 K227Q
YT195 生物素标记AP1凝胶迁移探针(0.2μM) Biotin-labeled AP1 Probe For EMSA
BTN70906 NTP溶液(10mM) NTP Solution,10mM
ALH601 血清miRNA提取试剂盒 Serum microRNA Extraction Kit
SV0547 NlaIV限制性内切酶 NlaIV Restriction Endonuclease
大肠杆菌JM109感受态细胞北京现货促销关键词:E.coli JM109 Chemical Competent Cell,大肠杆菌JM109感受态细胞,BTN90207
SV1019 SplintR 连接酶
RFT001 100bp DNA ladder(100~1500bp)
KFS129 溶酶体蓝色荧光探针 LysoBlue
SY0358 5×非还原蛋白上样缓冲液 5×Protein Loading Buffer (No Reducing Buffer)
YT456 AAT启动子荧光素酶报告基因质粒 AAT-promoter-luc Reporter gene plasmid
BTN100908A 一站式长效期SDS-PAGE套装A(>30KD) One-Stop Stable SDS-PAGE Pack(A)
HR0197 丝状真菌蛋白提取试剂盒(2D电泳用) Filamentous fungal protein extraction kit (2D electrophoresis)
SY0007 核糖核酸酶A(来源于牛胰腺) Ribonuclease A (RNase A) from bovine pancreas
YT092 Kisser封片液 Kisser’s Mounting Medium
BTN151203 生物素标记UTP溶液(Biotin-16-UTP ) Biotin-dUTP Solution
SV1537 β-N-乙酰*基葡糖苷酶
YT294 蛋白去除试剂S Protein Removal Reagent S(Used For YT293)
KFS373 游离脂肪酸(NEFA)测试盒
SY0620 3-吲哚乙酸 Indole-3-acetic acid(IAA)
SV0820 凝胶上样染料,紫色 (6X)
BTN130661 RecA蛋白 RecA Protein
KFS027 成神经细胞鉴定NF/NSE免疫荧光试剂盒(IF)
SY0254 2×RNA上样缓冲液(不含*化乙锭) 2×RNA Loading Buffer(Without Ethidium Bromide)
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文献和实验, 1ml 转至50 ml LB, 37oC 250 r/m至 A600=0.... 液氮或低温冰箱中取出的 大肠杆菌 *E.COLI DH5, JM109,HB101等,在LB平板上划线,37度过夜至长出单菌落.挑直径1-3毫米的单菌落*可多个, 接种到250毫升/3升锥形瓶 或80毫升/1升 锥形瓶 的SOC培养基. 培养基 量不可再多,会影响效率.在18度 150
短片段(5kb 以内)的序列克隆成功率。对于提高大片段克隆的成功率,可以从以下几方面考虑: ①选择合适的克隆载体,例如 pCC1-Brick 等适合装载大片段的载体; ②选择合适的克隆方法,通常无缝克隆技术如 Gibson 组装或者 Golden Gate 克隆对于大片段的组装效率更高; ③选择合适的纯化方式,纯化目的基因片段和线性化载体片段后再使用,并且注意两者的使用比例; ④选择合适的大肠杆菌感受态细胞,例如 stbl3,JM109 等; ⑤挑选单克隆菌落时需要注意,成功重组大片段的阳性单克
原理: 如何获得高的大肠杆菌感受态——可算是【一块砖头】吧 感受超级感受态细胞的制备 感受超级感受态细胞的制备1 超级感受态制备2 E.coli感受态: 一步法制备感受态: 一步法制感受态 急-关于感受态细胞 关于一步法制感受态的疑问 我所用过的最简单的制备感受态的方法! CaCl2法: 感受态细胞的制备 【鸡毛蒜皮】之6 Ultra-感受态 交流:大肠杆菌感受态细胞的几种制备方法 因为最近数次制作感受态转染生长失败
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