大肠杆菌JM110化学感受态细胞现货

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百奥莱博专业生产销*(代"售")大肠杆菌JM110化学感受态细胞现货，我公司供应的分子生物学试剂品类齐全，且具有优势价格，欢迎新老客户垂询订购。

名称：大肠杆菌JM110化学感受态细胞现货
编号：BTN130511
品牌：百奥莱博
英文名：E.coli JM110 Chemical Competent Cell
产地：国产|进口
 本产品是采用大肠杆菌JM110菌株经特殊工艺处理得到的感受态细胞，可用于DNA的化学转化。使用pUC19质粒检测本产品，转化效率可达106。本产品为dam-，dcm-的菌株，排除dam，dcm甲基化的影响。
 菌株基因型为：dam dcm supE44 hsdR17 thi leu rpsLlacY galK galT ara tonAthrtscΔ(lac-proAB)F-[traD36 proAB+ lacIq cZΔM15]

储存条件：干冰运输、-80℃保存，有效期半年。

自备试剂：目的DNA、SOC或LB培养基等。

使用方法：
1. 取感受态细胞置于冰浴中。一次转化感受态细胞的建议用量为50-100μL，根据实际情况分装使用。
以下实验以50μL感受态细胞为例。
2. 待感受态细胞融化后，向感受态细胞悬液中加入目的DNA(根据实际情况加入适量的DNA，通常100μl感受态细胞能够被1 ng超螺旋质粒DNA 所饱和)，用移液器轻轻吹打混匀，冰浴30分钟。
3. 42℃热击45秒，迅速将离心管转移到冰浴中，冰上静置2-3分钟。
4. 每个离心管中加入450μl 无菌的SOC或LB培养基(不含抗生素)，混匀后置于37℃摇床，150rpm 振荡培养45分钟使菌体复苏。
5. 根据实验需求，取适量已转化的感受态细胞，加到含相应抗生素的SOC或LB 固体琼脂培养基上，用无菌的涂布棒将细胞均匀涂开，将平板置于37℃直至液体被吸收，倒置培养，37℃培养12-16小时。

注意事项：
1. 涂布用量可根据具体实验调整。若转化的DNA 总量较多，可取少量转化产物涂布平板；若转化的DNA 总量较少，可取200-300μl转化产物涂布平板。若预计的克隆数较少，可通过离心(4,000rpm，2分钟)后吸除部分培养液，悬浮菌体后将其涂布于平板中。
2. 新制备的固体培养基不易涂干，可将平板正置于37℃直至液体被吸收后再倒置培养。
3. 涂布剩余的菌液可置于4℃保存，如果次日的转化菌落数过少，可以将剩下的菌液再涂布新培养基进行培养。

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·大肠杆菌Rosetta-gami(DE3)感受态细胞
编号：BTN130559
英文名称：E.coli Rosetta-gami(DE3) Rosetta Competent Cell
规格：0.1mL*10
 Rosetta-gami(DE3)是常规表达宿主菌，用于含二硫键真核蛋白表达，细胞质二硫化物还原途径有两个突变，可以增加E.coli细胞质中二硫键的形成。提供稀有密码子 tRNAs。抗性为四环素(12.5μg/ml)、卡那霉素(15μg/ml)、*霉素(34μg/ml)。

基因型：Δ(ara –leu)7697 Δlac X74 Δpho A Pvu II pho R ara D139 ahp C gal E gal K rps L F"[lac +lac Iq pro ](DE3)gor 522::Tn10(TcR)gor B::kan pRARE(CmR)。

储存条件：干冰运输、-80℃保存，有效期半年。

·菌体内毒素清除剂
编号：BTN90901
英文名称：Bacterial Endotoxin Scavenger
规格：200mL
内毒素是E.coli细胞壁的主要成分，传统的去除内毒素的方法是将内毒素和DNA一起纯化出来，然后再用各种方法去除其中的内毒素，操作繁琐，DNA 回收率低。本产品可以直接把E.coli 表面的内毒素去除，从根本上避免了内毒素对后续操作(如质粒DNA提取，重组蛋白质提取)的污染。

产品特点：
1. 首个在菌体收集阶段去除内毒素的产品，从源头上避免了内毒素跟DNA和胞浆蛋白的接触，从根本上防止了可能产生的污染。
2. 操作简单快速，用酶溶液温和清洗菌体3-4次即可去掉细菌表面的内毒素，只需要10分钟左右时间，不需要复杂仪器设备。
3.高效，能去除99%以上的内毒素。
4.跟各种质粒DNA提取、基因组DNA提取和蛋白质提取等操作兼容，DNA丢失率只有10%左右(其他方法DNA 丢失率可以高达50%)。
5. 不影响DNA和绝大部分蛋白质的活性，处理过的质粒DNA可用于转染实验。
6. 既可小规模使用(在1.5mL离心管内)，也可放量用于大规模无内毒素质粒DNA提取和无内毒素蛋白质纯化。

储存条件：常温运输和保存，有效期一年。

使用方法：

一：用于菌液小于3mL的样品
1. 收集1.5-3mL E.coli 饱和菌液，12000rpm离心1分钟，弃上清，得到细菌沉淀。
2. 加入1mL 本产品温和混匀后10,000-12000rpm离心1分钟，弃上清(含内毒素)。
3. 再重复上述操作3-4次，得到的菌体可以直接进入后续的无内毒素质粒DNA提取或无内毒素蛋白质提取程序。

二：用于菌液多于3mL的样品
整个操作同上，只是在15或50mL塑料离心管中进行，离心速度不能超过离心管的承受力，本产品的用量按比例增加。

疑难解答：
Q:为何用常规的方法很难去除生物样品中的内毒素?
A:因为内毒素带电性跟DNA和部分蛋白质相同，所以基于带电性的分离方法(如硅胶膜吸附，离子交换吸附)不能将它们分开;同时内毒素又是双性分子(类似于细胞膜的磷脂分子)，能够形成大小不等的聚合物，跟质粒DNA和蛋白质大小接近，所以基于分子量大小的分离方法(如凝胶排阻过滤和*化铯超速离心)也不能将其有效分离。


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3,3-二*基联*(代"*")*(代"胺")四盐*(代"酸")盐 Calcium 167684-17-5
F020104 兔抗酪蛋白抗体 Rabbit Anti-casein
FMOC-S-叔丁基-L-半胱*酸 NADH Inhibitor 67436-13-9
F030406 胶体金标记山羊抗小鼠IgG2a抗体 Goat Anti-Mouse IgG2a*GOLD
BTN130530 His标签蛋白专用蛋白酶抑制剂 Protease Inhibitor for His-tagged Protein
肌苷 Lactic dehydrogenase(rabbit muscle) 58-63-9
BL0869 羊抗大鼠免疫血清
BL0607 琼脂糖凝胶2B Sepharose 2B
PY02-437  改良LETHEEN琼脂基础  250克  
BTN131086 HRP标记亲和素 HRP-Avidin
ARB10460 人生长激素结合蛋白(P)含量测试 Human growth hormone binding protein,p ELISA KIT
ARB10073 人CCAAT增强子结合蛋白ε(C/EBPε)Elisa定量检测 Human ccaat/enhancer binding protein epsilon,c/ebpε ELISA KIT
ARB11377 人前降*素(PCT)ELISA检测服务 Human procalcitonin,pct ELISA KIT
ARB14161 植物细胞分裂素(CYT)代做ELISA实验 
阿维菌素 Oligomycin 71751-41-2
ARB10743 人纤溶酶原(Plg)酶标法分析 Human plasminogen,plg ELISA KIT
BTN130501 柱式内毒素清除剂 Column Endotoxin Erasol
ARB13414 鸡8羟基脱氧鸟苷(8-OHdG)Elisa定量检测 Chicken  8-hydroxy-desoxyguanosine,8-ohdg ELISA KIT
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·一步法质粒DNA提取试剂盒2.0
编号：BTN70903
英文名称：One-step plasmid DNA extraction kit 2.0
规格：50次
基于碱变性原理的质粒小量制备(Miniprep)是分子克隆研究中最常用的方法之一，其操作包括三种溶液处理，一般需要30分钟左右的时间才能得到可以上柱的质粒DNA初提液。本产品采用百奥莱博自主开发的一步式细菌裂解技术，只需要一种溶液处理即可以完成细菌裂解，并且裂解物可以直接上柱纯化质粒DNA。

试剂盒特点：
1.一步式裂解细菌，比传统的碱变性方法更快捷。
2.产量跟经典碱变性法相当或更高，产率一般为3-5μg质粒DNA/mL 饱和菌液(对高拷贝质粒而言)。
3. DNA 纯度高，OD260/280一般在1.8左右，基因组DNA和RNA污染少。
4.可以直接用于电泳、酶切、PCR、细菌转化、分子克隆、测序等实验。
5. 重复性和稳定性好。

试剂盒组成：

 

成分	规格
溶液A	50ml
离心吸附柱	50只
通用预洗液	50ml
通用洗柱液	100ml
DNA洗脱液2.0	10ml
说明书	1份

储存条件：常温运输及保存(溶液A需要4℃保存)，有效期一年。

使用方法：
1. 用塑料离心管收集不超过3mL 过夜培养饱和菌液，室温12000～15000g离心半分钟，弃上清。注意:不能超过3mL菌液，否则质粒回收率将急剧降低。
2. 加入0.6-1mL溶液A(用前需摇匀)，充分吹打或振荡裂解细菌直到裂解变澄清，一般需要半分钟左右。注:此方法不同于碱裂解法，故可以充分吹打。
3. 将裂解液全部转移到离心吸附柱中，室温静置2分钟使质粒DNA与膜结合。室温12000～15000g离心半分钟，弃穿透液。如果一次不能将上清全部转移到离心吸附柱中，可以分两次进行。
4.在离心吸附柱中加入0.7mL的通用预洗液，室温12000～15000g离心半分钟，弃穿透液。注意: 如果通用预洗液放置在低温产生了沉淀，用前需要加热到60℃左右使之融化，混匀后再用。
5. 再在离心吸附柱中加入0.3mL的通用预洗液，室温12000～15000g离心半分钟，弃穿透液。此步预洗最好别省略，否则DNA 纯度不高。
6.在离心吸附柱中加入0.7mL的通用洗柱液，室温12000～15000g离心半分钟，弃穿透液。
7. 再在离心吸附柱中加入0.7mL的通用洗柱液，室温12000～15000g离心半分钟，弃穿透液。此为第二次洗涤。
8. 再在离心吸附柱中加入0.4mL的通用洗柱液，室温12000～15000g离心半分钟，弃穿透液。此为第三次洗涤，如果不洗涤三次，最后得到的质粒DNA的OD260和280的比值达不到1.8。
9.室温 12000～15000g离心半分钟，甩干残留液体。注意：此步不能省略，否则残留乙醇会影响后续的电泳上样(DNA 沉不到加样孔里去)和酶反应。
10. 将离心柱置于一个新的1.5mL自备塑料离心管中，加入30-100μl DNA 洗脱液2.0，室温放置2分钟。如果将DNA 洗脱液2.0预热到65-80℃，则效果更好。
11.室温 12000～15000g离心半分钟，离心管底溶液即质粒DNA，可以直接用于后续实验或放冰箱长期保存。
 注意：如果需要去除DNA样品中的内毒素，请使用百奥莱博的液相内毒素清除剂。

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