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- 百奥莱博
- BTN90207-CYT
- 北京
- 2025年07月08日
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- 详细信息
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- 技术资料
- 库存：
588
- 英文名：
E.coli JM109 Chemical Competent Cell
- 保质期：
半年
- 供应商：
北京百奥莱博科技有限公司
- 保存条件：
-80℃
特别声明：本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品，严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
百奥莱博专业生产销*(代"售")北京大肠杆菌JM109感受态细胞优惠促销，我公司供应的分子生物学试剂品类齐全，且具有优势价格，欢迎新老客户垂询订购。
名称：大肠杆菌JM109感受态细胞
英文名：E.coli JM109 Chemical Competent Cell
产地：国产|进口
品牌：百奥莱博
规格：0.1mL*10
编号：BTN90207
本产品是采用大肠杆菌JM109菌株经特殊工艺处理得到的感受态细胞，可用于DNA的化学转化。
产品特点：
1. 使用pUC19质粒检测，转化效率可达108，-80℃保存几个月转化效率不发生改变。
2. recA1和endA1突变阻止对克隆DNA的修饰或对宿主菌染色DNA的重组，提高纯化质粒的产量和质量。
3. JM109菌株基因型：endA1 recA1 gyrA96 thi hsdR17(rk-mk+)relA1 supE44 D(lac-proAB)[F’traD36 proAB laqlqZ Δ M15 ]
4. 本产品质量稳定，使用方便，质优价廉。
储存条件：干冰运输、-80℃保存，有效期半年。
自备试剂：无菌超纯水，SOB和SOC液体培养基，相关抗菌素。
使用方法：
1. 取感受态细胞置于冰浴中。一次转化感受态细胞的建议用量为50-100μl，可以根据实际情况分装使用。
以下实验以50μL感受态细胞为例。
2. 待感受态细胞融化后，向感受态细胞悬液中加入目的DNA(根据实际情况加入适量的DNA，通常100μl感受态细胞能够被1 ng超螺旋质粒DNA 所饱和)，用移液器轻轻吹打混匀，冰浴30分钟。
3. 42℃热击90秒，迅速将离心管转移到冰浴中，冰上静置2-3分钟。
4. 每个离心管中加入450μl无菌的SOC或LB培养基(不含抗生素)，混匀后置于37℃摇床，150rpm振荡培养45分钟使菌体复苏。
5. 根据实验需求，取适量已转化的感受态细胞，加到含相应抗生素的SOC或LB 固体琼脂培养基上，用无菌的涂布棒将细胞均匀涂开，将平板置于37℃直至液体被吸收，倒置培养，37℃培养12-16小时。
注意事项：
1、涂布用量可根据具体实验调整。若转化的DNA 总量较多，可取少量转化产物涂布平板；若转化的DNA 总量较少，可取200-300μl转化产物涂布平板。若预计的克隆数较少，可通过离心(4,000rpm ，2分钟)后吸除部分培养液，悬浮菌体后将其涂布于平板中。
2、新制备的固体培养基不易涂干，可将平板正置于37℃直至液体被吸收后再倒置培养。
关键词：大肠杆菌JM109感受态细胞,E.coli JM109 Chemical Competent Cell,BTN90207
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| 编号 | 名称 |
| BTN140405 | 细菌内毒素标准品(10EU/支) |
| BTN130918 | dITP溶液(2.5mM) |
| BTN120686 | 细胞松弛素B溶液 |
| BTN140436 | 非蛋白型Western封堵液 |
| BTN120703 | 盐*(代"酸")万古霉素溶液 |
| BTN60402 | 超快非醇核酸沉淀剂 |
| BTN131108 | ONPG干粉 |
| BTN51208B | dNTP溶液(10mM) |
| BTN120654D | Southern DNA Marker DL2000(DIG标记) |
| BTN130899 | GAL指示剂培养基 |
| BTN111008 | 非酶多糖清除剂(DNA专用) |
| BTN100102A | His标记蛋白质微量纯化套装 |
| BTN120404 | 牛小肠碱性磷酸酶(CIAP) |
| BTN120643 | 硫*(代"酸")葡聚糖 |
| BTN90902 | 细菌总蛋白质微量提取试剂盒 |
| BTN91108 | T3体外转录试剂盒 |
| BTN101204 | 1M Tris-HCl(pH7.0)(DNA级) |
| BTN130804 | 单细胞裂解液(RNA提取) |
| BTN101201 | 10%SDS溶液(DNA级) |
| BTN90408 | 即用型荧光定量PCR试剂盒 |
| BTN131247 | 4%多聚甲醛(RNA专用) |
| BTN131042 | miRNA荧光定量RT-PCR检测试剂盒 |
| BTN70605 | miRNA marker(miRNA电泳分子量标准) |
| BTN120681 | 两性霉素B |
| BTN80903 | 柱式植物RNA大量提取试剂盒 |
| BTN131009 | NP-40裂解液 |
| BTN130874 | 人玻连蛋白 |
| BTN131056 | TCEP溶液(0.5M) |
| BTN131006 | 强RIPA裂解液 |
| BTN120403 | 虾碱性磷酸酶(SAP) |
| BTN71202 | 血液RNA柱式提取试剂盒 |
| BTN130530 | His标签蛋白专用蛋白酶抑制剂 |
| BTN120410 | 核酸外切酶I |
| BTN120601 | 革兰氏阳性菌质粒DNA提取试剂盒 |
| BTN131092 | 生物素 |
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文献和实验, 1ml 转至50 ml LB, 37oC 250 r/m至 A600=0.... 液氮或低温冰箱中取出的 大肠杆菌 *E.COLI DH5, JM109,HB101等,在LB平板上划线,37度过夜至长出单菌落.挑直径1-3毫米的单菌落*可多个, 接种到250毫升/3升锥形瓶 或80毫升/1升 锥形瓶 的SOC培养基. 培养基 量不可再多,会影响效率.在18度 150
短片段（5kb 以内）的序列克隆成功率。对于提高大片段克隆的成功率，可以从以下几方面考虑： ①选择合适的克隆载体，例如 pCC1-Brick 等适合装载大片段的载体； ②选择合适的克隆方法，通常无缝克隆技术如 Gibson 组装或者 Golden Gate 克隆对于大片段的组装效率更高； ③选择合适的纯化方式，纯化目的基因片段和线性化载体片段后再使用，并且注意两者的使用比例； ④选择合适的大肠杆菌感受态细胞，例如 stbl3，JM109 等； ⑤挑选单克隆菌落时需要注意，成功重组大片段的阳性单克
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