北京现货农杆菌EHA105化学感受态细胞品牌

特别声明：本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品，严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。

百奥莱博专业生产销*(代"售")北京现货农杆菌EHA105化学感受态细胞品牌，我公司供应的分子生物学试剂品类齐全，且具有优势价格，欢迎新老客户垂询订购。

名称：北京现货农杆菌EHA105化学感受态细胞品牌
编号：BTN140383
规格：10×100μL
英文名：E.coli EHA105 Chemical Competent Cell
品牌：百奥莱博
产地：北京
 本产品为EHA105农杆菌化学感受态细胞，为C58型背景，核基因中含有筛选标签-利福平抗性基因rif，为了便于转化操作，此菌株携带一无自身转运功能的琥珀碱型Ti质粒pEHA105(pTiBo542DT-DNA)，此质粒含有vir基因(vir基因是T-DNA 插入植物基因组必需的元件，pEHA105(pTiBo542DTDNA)质粒自身的T-DNA转移功能被破坏，但可以帮助转入的双元载体T-DNA顺利转移)。本产品适用于水稻、烟草等植物的转基因操作，经pCAMBIA2301质粒检测转化效率高达103cfu/μg。

储存条件：干冰运输、-80℃保存，有效期一年。

自备试剂：质粒DNA、液氮等

使用方法：

转化前准备
1. 冰水浴和37℃水浴。
2.液氮或干冰/乙醇混合物。
3. 将抗性平板在28℃培养箱中平衡至少15分钟。
转化方法
1. 取-80℃保存的农杆菌感受态细胞于冰水浴中融化。
2. 无菌条件下，向刚刚融化的感受态细胞悬液中加入需要转化的质粒，每100μL感受态细胞加1ug(体积不大于10μl)质粒DNA，轻柔混匀。冰水浴中静置5分钟。
3. 将离心管置于液氮中速冻5分钟(注：也可以用干冰和无水乙醇混合物替代液氮)。
4. 迅速将离心管置于37℃水浴静置中5分钟，不要晃动水面。然后快速转至冰水浴中静置5分钟。
5. 加入800μl 无抗生素的2×YT或LB液体培养基，28-30℃振荡培养2～3小时。使菌体复苏，表达抗性。
6. 5000rpm离心1分钟收菌，保留100μl左右上清，轻轻吹打重悬菌体，均匀涂布到含有相应抗生素的LB 固体培养基平板上，待平板中的液体完全吸收后，倒置平板，28-30℃培养48-72小时。
 注：当平板只含有50μg/mL kan时，28℃培养48 h 即可；平板中同时加入50μg/mL kan、20μg/mL rif时，需28℃培养60 h；如果使用的平板含有50μg/mL rif 则需要28℃培养72-90h。

注意事项：
1. 加入质粒时体积不应大于感受态体积的1/10；质粒不纯或存在乙醇等有机物污染，转化效率急剧下降；质粒增大一倍，转化效率下降一个数量级。
2. 混入质粒时应轻柔操作。转化高浓度的质粒可相应减少最终用于涂板的菌量。
3. 平板上阳性克隆密度过大时，由于营养不足，阳性克隆生长变慢，菌落变小，为了获得大的菌落，应减少质粒用量。
4. 利福平浓度不应高于25μg/mL，过高的利福平浓度不利于农杆菌生长，会降低其生长速度和转化效率。本公司感受态计算转化效率时所用平板只含有50μg/mL kan，若所用平板含有20μg/mL rif 则转化效率降低到1/2。
5.培养基中加入利福平的目的是防止杂菌生长、筛选农杆菌；根据所用菌株抗性加入Ti质粒筛选抗生素可防止Ti质粒丢失，但Ti质粒筛选抗生素不利于农杆菌的转基因操作，所以一般培养农杆菌时不考虑这些抗生素，Ti质粒丢失的概率极低(可以忽略)。

欲咨询购买北京现货农杆菌EHA105化学感受态细胞品牌，请致电北京百奥莱博科技有限公司，为您提供最全面周到的产品服务，除此之外，我公司正在促销以下产品：

·橙黄G溶液(电泳级)
编号：BTN100948
英文名称：Orange G Solution,electrophoresis grade
规格：10mL
橙黄G分子式是C16H10N2Na2O7S2，分子量为452.36，CAS号为1936-15-8。 黄红色粉末或片状结晶，水溶液为橙黄色，溶于醇为橙色，不溶于酚和*仿，盐*(代"酸")对水溶液无变化，遇*氧化*呈黄红色，遇*氧化*生成结晶性*盐。有刺激性。本产是甲基橙的1%水溶液，用作制备电泳上样液和生物染色剂的母液。其泳动率在0.5-1.4%琼脂糖中相当于50bp dsDNA。

储存条件：常温运输及避光干燥保存，有效期一年。

·石蜡包埋组织直接RT-PCR试剂盒(免RNA提取)
编号：BTN131176
英文名称：FFPE direct RT-PCR Kit (RNA extraction-free)
规格：30次
橙黄G分子式是C16H10N2Na2O7S2，分子量为452.36，CAS号为1936-15-8。 黄红色粉末或片状结晶，水溶液为橙黄色，溶于醇为橙色，不溶于酚和*仿，盐*(代"酸")对水溶液无变化，遇*氧化*呈黄红色，遇*氧化*生成结晶性*盐。有刺激性。本产是甲基橙的1%水溶液，用作制备电泳上样液和生物染色剂的母液。其泳动率在0.5-1.4%琼脂糖中相当于50bp dsDNA。

储存条件：常温运输及避光干燥保存，有效期一年。

·非酶RNA清除剂2.0
编号：BTN60912
英文名称：Non-enzymatic RNA scavenger 2.0
规格：1.5mL
本品为非酶法质粒RNA去除试剂，专用于从DNA溶液中去除其中的RNA污染。

产品特点：
1.高效，能去除DNA溶液中70%以上的RNA污染。
2. 经过本产品处理过的样品在硅胶膜上的吸附率比没处理过的样品更高,与柱式硅胶膜离心吸附方法兼容。

储存条件：常温运输和保存，有效期一年。

使用方法：
使用前如果本产品有分层，请冰浴后振荡混匀。

1.在一干净的离心管中加入含RNA污染的DNA溶液。
2. 加入0.1倍体积的预冷的本产品，充分混匀后冰浴10分钟。
3. 65℃水浴直到溶液变浊或出现分层为止(一般需要1-5分钟)。
4.室温12000～15000×g离心2分钟(不能低温离心)，离心后上层为无色透明，下层为淡蓝色。
5. 将上清(DNA溶液)转移到新的离心管中。
6. 如果需要，可以重复步骤3～6。
7. 所得DNA(上清)可以直接使用。

使用效果：

图注：用柱式质粒DNA提取试剂盒提取质粒DNA时，在上柱前用本产品处理裂解液(+)，其余操作不变。上样量为所得DNA量的1/5。显然没经过本产品处理的(-)质粒DNA含有大量的RNA污染。

疑难解答：
Q： 本产品与百奥莱博的RNA Scavenger-1有何区别？
A：1.本产品处理过的样品不再需要醇/盐沉淀处理，而RNA Scavenger-1处理的样品还需要醇/盐沉淀去除RNA Scavenger-1；2.本产品与柱式硅胶膜纯化方法兼容，而RNA Scavenger-1 不兼容；3是本产品不但可以用于去除质粒DNA的RNA污染，还可以用于去除基因DNA的RNA污染，而RNA Scavenger-1只能用于质粒DNA样品。


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·超级电泳液(含染料)
编号：BTN151103A
英文名称：Superbuffer
规格：100mL
本品是我司开发的超级核酸电泳液套装，其中的溶液A含抗水解的核酸染料，用于配制琼脂糖凝胶(溶液A也可用于电泳，但不经济)；溶液B为不含染料的电泳液。

产品特点：
1.高浓度，溶液A和溶液B用去离子水稀释100倍后可以直接用作配胶工作液和电泳工作液，100mL的产品可以配制10 L工作液。
2.低产热，用溶液A配制的胶在溶液B配制的电泳液中电泳时可用30 V/cm的中等电压(cm是指电泳槽两电级之间的距离)，一般的mini胶电泳(如检查PCR扩增)只需要5-10分钟即可完成，比TAE和TBE快4-5倍(TAE和TBE电泳一般需要40分钟)。当然，也可以按常规的电泳参数电泳，所需时间约为40分钟左右。
3. 用本产品溶液A 配制的琼脂糖凝胶可以在TBE和TAE缓冲液中低压电泳。用TBE 配制的琼脂糖凝胶也可以在本产品溶液B配制的电泳液中电泳(低压中压均可)。但用TAE 配制的胶不能在溶液B中电泳。
4. 用本产品电泳得到的DNA片段的胶回收率高于使用TAE和TBE电泳的胶回收，不影响后续的DNA胶回收和DNA连接等反应。
5.溶液A(配胶用)和溶液B(电泳用)均可以单独购买。

产品组成：

 

成分	A型	B型
溶液A(配胶液，含染料)	100ml	-
溶液B(电泳液，不含染料)	-	100ml
说明书	1份	1份

储存条件：常温保存和运输，有效期两年。如果本产品有沉淀析出现象，请65℃水浴溶解后使用。

使用方法：
将本品溶液A用去离子水稀释100倍(1mL溶液A加99mL去离子水)，混匀后直接用于配琼脂糖胶，溶液B用去离子水稀释100倍(1mL本产品加99mL去离子水)后直接用于做电泳液，其余操作跟TAE，TBE缓冲液一样。需注意的地方是：

1.电压：对一般minigel，一般可以用250-350V 跑5-10分钟；对大的电泳槽，可用400-450V 跑5-10分钟。若在电泳时发生电流或电压逐渐下降的现象，请检查电泳仪是否设置了电流上限或功率上限。若继续存在，可能需要更换新的缓冲液。
2. DNA条带扭曲：DNA样品中所含SDS量过高时(SDS 主要来于上样液)，DNA条带将出现扭曲，影响实验效果。建议使用不含SDS的上样液，最好使用跟我公司超级电泳液兼容的上样液。
3. 反复使用：本溶液A配制的电泳液至少可以重复使用2-3次，如果使用大电泳槽，可以重复使用的次数会更多。
4. TBE胶：已经用TBE电泳液配置好的琼脂糖凝胶，如果不含EB，SYBR Green等染料，则可以直接放入本产品溶液A配制的电泳液中按上述电泳条件电泳(因为溶液A含染料，故不需要额外再加染料)。如果用TBE电泳液配置好的琼脂糖凝胶含EB、SYBR Green或绿如蓝等核酸染料，则可以直接在本产品溶液B配制的电泳液中进行电泳。
5.溶液A配制的胶在TAE或TBE电泳液中电泳：已经用本产品溶液A配置好的琼脂糖凝胶，也可以直接在TBE或TAE电泳液中电泳，电压跟常规TAE或TBE电泳一样。


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SV1405 通用 miRNA 克隆接头
YT211 C/EBP凝胶迁移突变探针(1.75μM) C/EBP Mutation Probe For EMSA(1.75μM)
BTN60106 平末端DNA加T试剂盒 dT Tailing Kit
ALH027 细菌RNA提取试剂盒 Bacterial total RNA Extraction Kit
SV0591 PleI限制性内切酶 PleI Restriction Endonuclease
WE0200 植物RNA提取试剂盒(含DNase I) RNAtiqu Plant RNA Extraction Kit(DNase I)
BTN100935 超纯水 Ultrapure Water
SY0171 IRF1-GFP报告基因质粒 IRF1 GFP Reporter Plasmid
RFT019 DNA Marker II(100～1200bp)
KFS146 死细胞核7-AAD染料 7-amino-actinomycin D
SY0374 12%预制胶，12孔 Precast Protein Gels, 12%, 12 wells
YT476 N端EGFP标签融合蛋白质粒(绿色荧光蛋白) N-EGFP plasmid（with CMV promoter）

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