酿酒酵母AH109化学感受态细胞北京价格

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名称：酿酒酵母AH109化学感受态细胞北京价格
英文名：E.coli AH109 Chemical Competent Cell
品牌：百奥莱博
产地：国产|进口
编号：BTN140386
 AH109菌株来源于PJ69-2A 酵母菌株，将lacZ 报告基因引入PJ69-2A 诞生了AH109，此菌株是Clontech公司开发的GAL4 系统酵母双杂实验用菌株，MATa型，可直接转化质粒或与MATα型酵母菌株Y187 通过mating 操作进行蛋白互作验证或筛库试验。Transformation marker 为: trp1，leu2，报告基因为：lacZ，HIS3，ADE2，MEL1。AH109-GAL4酵母双杂系统需要两种质粒配套使用：PGBKT7和PGADT7。质粒PGBKT7的筛选标志为TRP1，用于表达DNA-BD(来自酵母转录因子GAL4N 端1～174 位*基酸)与目标蛋白(Bait)的融合蛋白；质粒PGADT7的筛选标志为LEU，用于表达AD(GAL4 C端768 ～881 位*基酸)与目标蛋白(Prey)的融合蛋白。

 GAL4系统原理：一个完整的酵母转录因子GAL4可分为功能上相互独立的两个结构域：位于N 端1 ～174 位*基酸区段的DNA 结合域(DNA-BD)和位于C 端768 ～881位*基酸区段的转录激活域(AD)。DNA-BD 能够识别GAL4-responsive gene的上游激活序列UAS，并与之结合。而AD可以启动UAS下游的基因进行转录。BD和AD 单独存在不能激活转录，但当二者接近时，则呈现完整的GAL4活性，使含有UAS的启动子下游基因转录表达。正常条件下，BD 不与AD 结合，将要检测的蛋白质分别与BD和AD 融合，形成 bait 融合蛋白(bait -BD)和prey 融合蛋白(prey-AD)，如果 bait和prey发生相互作用，就会促使 BD和AD的相互接近，形成完整的GAL4，从而激活报告基因的转录。AH109 有四个报告基因：lacZ，HIS3，ADE2，MEL1，分别由三种不同的启动子(GAL1，GAL2，MEL1)启动，这三种启动子只有GAL4 识别的17bp 核心区相同，其余部分均不同，大大降低了酵母双杂假阳性发生的概率。本产品经特殊工艺制作而成，经PGADT7质粒检测转化效率为＞104cfu/μg DNA。

菌株基因型：MATa，trp1-901，leu2-3，112，ura3-52，his3-200，gal4Δ,gal80Δ,LYS2::GAL1UAS-GAL1TATA-HIS3,MEL1 GAL2UAS-GAL2TATA-ADE2,URA3::MEL1UAS-MEL1TATA-lacZ

产品组成：

 

成分	规格
AH109感受态细胞	0.1ml×10支
PGADT7，10 ng/μL	10μl
Carrier DNA，5μg/μL	100μl
PEG/LiAc	5ml
说明书	1份

储存条件：感受态细胞干冰运输、-80℃保存，Carrier DNA -20℃保存；PEG/LiAc 4℃保存；有效期半年。

自备试剂：目的DNA、YPDA、 SD培养基等。

使用方法：
1. 取感受态细胞置于冰浴中。一次转化感受态细胞的建议用量为50-100μl，可以根据实际情况分装使用。
以下实验以100μL感受态细胞为例。
2. 待感受态细胞融化后，向感受态细胞悬液中依次加入2-5μg预冷的目的质粒、10μLCarrier DNA(95-100℃ 5分钟，快速冰浴，重复一次)、500μl PEG/LiAc，吹打混匀，30℃水浴30分钟(15分钟时翻转6-8次混匀)。
3. 42℃水浴15分钟(7.5分钟时翻转6-8次混匀)。
4. 5000rpm离心 40秒，弃上清。取400μl ddH2O 重悬沉淀，5000rpm离心 30秒，弃上清。
5. 取50μl ddH2O 重悬沉淀，涂板，29℃培养48-96小时。

注意事项：
1. 酵母菌株对高温敏感，最适生长温度为27-30℃；高于31℃，生长速度和转化效率呈指数下降。
2.菌落变粉不是污染，是酵母细胞生长中一个常见现象。当细胞在平板培养几天后，平板上的Adenine 被酵母消耗完毕，酵母试图通过自身代谢途径合成 Adenine以供利用，然而，有些菌株的ADE2基因被破坏，Adenine 合成途径受阻；又由于其ADE4,5,6,7,8基因均正常，所以造成中间产物P - ribosylamino imidazole(AIR)在细胞中积累而使菌落变为粉红色。
3. 酵母在缺陷培养基中生长速度比YPDA培养基慢，培养基中缺陷成分越多，生长越慢，以转化涂板为例：涂YPDA 平板29℃，48h培养可见直径1mm 克隆；涂SD 单缺平板29℃，48-60h培养可见直径1mm 克隆，涂SD 双缺平板29℃，60-80h培养可见直径1mm 克隆，涂SD 三缺或四缺平板29℃，80-90h培养可见直径1mm 克隆。
4.转化高浓度的质粒可相应减少最终用于涂板的菌量。
5. 同时转化2-3 种质粒时可增加质粒的用量。

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·大肠杆菌Tuner(DE3)化学感受态细胞
编号：BTN130562
英文名称：E.coli Tuner(DE3) Chemical Competent Cell
规格：0.1mL*10
 Tuner(DE3)为常规表达宿主菌，用于一般蛋白表达，lac 透性酶突变，可以精细控制表达水平。无抗性。

基因型：F–omp T hsd SB(rB– m–)gal dcm lacY1(DE3)

储存条件：干冰运输，-80℃保存，有效期6个月。

·LAMP扩增阳性对照
编号：BTN130923
英文名称：LAMP Positive Control
规格：50次
本产品为LAMP扩增专用的阳性对照，用于判断、分析LAMP等温扩增结果。LAMP等温扩增，即Loop-Mediated Isothermal Amplification(环介导等温扩增)，是2000年才出现的一种新颖的等温核酸扩增方法。它利用4条模板专一的特异引物和具有链置换能力的DNA聚合酶，在等温条件下(63℃左右)30－60分钟完成扩增。该技术在灵敏度、特异性和检测范围等指标上能媲美甚至优于PCR技术，同时还不需要模板的热变性、温度循环、电泳及紫外观察等过程，不依赖任何专门的仪器设备。目前已成功应用于人类及动植物、细菌、病毒、寄生虫、真菌等病原体的快速检测。

产品组成：

成分	规格
对照模板DNA	50μl
对照引物混合物	200μl
说明书	1份

储存条件：低温运输，-20℃保存，有效期一年。

使用方法：
1.在冰上溶解除酶外的各种组份，其中LAMP Mix(2×)、MgCl2(25mM)和Bst DNA聚合酶(8U/μL)等试剂自备(参照本公司产品100203组分)，混匀，稍离心。在反应管中加入以下组份：

成份	阴性对照管	阳性对照管
LAMP Mix(2×)	10μl	10μl
对照引物混合物	4.0μl	4.0μl
对照模板DNA	不加	1μl
MgCl2(25mM)	3μl	3μl
Bst DNA聚合酶(8U/μL)	1.5μl	1.5μl
水	1.5μl	0.5μl

2. 混匀，置于60-65℃保温120分钟。
3. 80℃下保温10分钟灭活Bst DNA聚合酶。
4.产物置于-20℃备用或立即用于下游检测。扩增产物可选下列方法之一检测:
a)琼脂糖凝胶电泳。取扩增产物5μL，1-2%的琼脂糖凝胶电泳，可见LAMP特征性电泳图谱；
b)向扩增产物中直接加入本公司PCR级绿如蓝染料(另售)1μL，混匀，稍离心。将反应管置于紫外透射仪或凝胶成像系统中，紫外灯下可见绿色荧光产生；
c)荧光定量检测。


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维生素D2 Fmoc-lle-OH 50-14-6
3,3,5,5-四甲基联*(代"*")*(代"胺")盐*(代"酸")盐 Molybdic acid 64285-73-0
BL0290 Medium 199
HC0132 玻璃纸
ARB12366 大鼠转化生长因子β2(TGFβ2)免费代测 Rat transforming growth factorsβ2,tgfβ2 ELISA KIT
147-94-4 β-D-阿糖胞苷 Cutosine
人血清白蛋白(组份五) NTA 70024-90-7
BTN101104 3"-RACE试剂盒 3"-RACE Kit
PY01-067  α-淀粉酶(1:3700)  250克  
ARB11679 人超敏C反应蛋白(hs-CRP)代做ELISA实验 Human high sensitivity c-reactive protein,hs-crp ELISA KIT
ARB13402 羊棘球蚴(echInococcIosIs)elisa检测 
ARB11305 人促甲状腺素(TSH)含量分析 Human thyroid stimulating hormone,tsh ELISA KIT
A7218-17 豚鼠血清 100ml|500ml
BTN130426 丁基介质 Buty Medium
ARB14119 大鼠*卫蛋白(cAlproteIn)酶标法分析 
ARB13455 鸡白痢抗体检测(PD)Elisa方法检测 chiken pullorum diseaes,pd ELISA KIT
ARB13101 小鼠骨成型蛋白7(BMP-7)elisa检测 Mouse bone morphogenetic protein 7,bmp-7 ELISA KIT
PY02-315  3%*化*胰蛋白胨大豆琼脂  250克  
ARB12163 大鼠白介素2可溶性受体(IL-2sR)检测服务 Rat soluble interleukin 2 recepter,IL-2sr ELISA KIT
ARB11365 人前白蛋白(PA)代做ELISA实验 Human prealbumin,pa ELISA KIT
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PY02-055  察氏琼脂培养基  250克  
酸性品红 DL-Pyroglutamic acid 3244-88-0
ARB11791 人碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)含量测试 Human basic fibroblast growth factor,bfgf ELISA KIT
ARB11020 人尿蛋白(UP)ELISA代测服务 Human proteinuria,up ELISA KIT
F010101 小鼠抗乙肝表面抗原抗体 Monoclonal Mouse Anti-HBsAg
E0617 抗凝裂解山羊血
ARB12233 大鼠肌酸激酶(CK)酶免分析 
聚对丙*(代"烯")基茴香醚* Deoxycholic acid sodiu*(代"m") salt 27206-35-5
9012-90-2 Taq DNA 聚合酶
L-*丙*酸 MMC 63-91-2
尿酸酶 1-Naphthylamine 9002-12-4
组胺 Gentamycin sulfate 51-45-6
ARB10345 人长效甲状腺刺激素(LATS)酶联免疫定量检测 Human long acting thyroid stimulator,lats ELISA KIT
ARB11549 人凋亡信号调节激酶I(ASK-1)ELISA代测服务 Human apoptosis signal regulating kinase 1,ask-1 ELISA KIT
ARB10046 人Ⅳ型胶原(Col Ⅳ)ELISA检测服务 Human collagen type Ⅳ,col Ⅳ ELISA KIT
(不需DNA酶消化)"
ARB11671 人维生素D受体(VD R)Elisa分析 Human vitamin d receptor,vd r ELISA KIT
BL0798 人纤维蛋白原抗原(干粉)
邻*二甲醛 Monoacetone glucose 643-79-8
BOC-D-脯*酸 EDTA-MgNa2 37784-17-1

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