农杆菌EHA105化学感受态细胞品牌

特别声明：本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品，严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。

百奥莱博专业生产供应农杆菌EHA105化学感受态细胞品牌，我公司销*(代"售")全品类的分子生物学试剂，价格优惠，欢迎广大科研工作者垂询订购。

名称：农杆菌EHA105化学感受态细胞品牌
品牌：百奥莱博
产地：国产|进口
编号：BTN140383
 本产品为EHA105农杆菌化学感受态细胞，为C58型背景，核基因中含有筛选标签-利福平抗性基因rif，为了便于转化操作，此菌株携带一无自身转运功能的琥珀碱型Ti质粒pEHA105(pTiBo542DT-DNA)，此质粒含有vir基因(vir基因是T-DNA 插入植物基因组必需的元件，pEHA105(pTiBo542DTDNA)质粒自身的T-DNA转移功能被破坏，但可以帮助转入的双元载体T-DNA顺利转移)。本产品适用于水稻、烟草等植物的转基因操作，经pCAMBIA2301质粒检测转化效率高达103cfu/μg。

储存条件：干冰运输、-80℃保存，有效期一年。

自备试剂：质粒DNA、液氮等

使用方法：

转化前准备
1. 冰水浴和37℃水浴。
2.液氮或干冰/乙醇混合物。
3. 将抗性平板在28℃培养箱中平衡至少15分钟。
转化方法
1. 取-80℃保存的农杆菌感受态细胞于冰水浴中融化。
2. 无菌条件下，向刚刚融化的感受态细胞悬液中加入需要转化的质粒，每100μL感受态细胞加1ug(体积不大于10μl)质粒DNA，轻柔混匀。冰水浴中静置5分钟。
3. 将离心管置于液氮中速冻5分钟(注：也可以用干冰和无水乙醇混合物替代液氮)。
4. 迅速将离心管置于37℃水浴静置中5分钟，不要晃动水面。然后快速转至冰水浴中静置5分钟。
5. 加入800μl 无抗生素的2×YT或LB液体培养基，28-30℃振荡培养2～3小时。使菌体复苏，表达抗性。
6. 5000rpm离心1分钟收菌，保留100μl左右上清，轻轻吹打重悬菌体，均匀涂布到含有相应抗生素的LB 固体培养基平板上，待平板中的液体完全吸收后，倒置平板，28-30℃培养48-72小时。
 注：当平板只含有50μg/mL kan时，28℃培养48 h 即可；平板中同时加入50μg/mL kan、20μg/mL rif时，需28℃培养60 h；如果使用的平板含有50μg/mL rif 则需要28℃培养72-90h。

注意事项：
1. 加入质粒时体积不应大于感受态体积的1/10；质粒不纯或存在乙醇等有机物污染，转化效率急剧下降；质粒增大一倍，转化效率下降一个数量级。
2. 混入质粒时应轻柔操作。转化高浓度的质粒可相应减少最终用于涂板的菌量。
3. 平板上阳性克隆密度过大时，由于营养不足，阳性克隆生长变慢，菌落变小，为了获得大的菌落，应减少质粒用量。
4. 利福平浓度不应高于25μg/mL，过高的利福平浓度不利于农杆菌生长，会降低其生长速度和转化效率。本公司感受态计算转化效率时所用平板只含有50μg/mL kan，若所用平板含有20μg/mL rif 则转化效率降低到1/2。
5.培养基中加入利福平的目的是防止杂菌生长、筛选农杆菌；根据所用菌株抗性加入Ti质粒筛选抗生素可防止Ti质粒丢失，但Ti质粒筛选抗生素不利于农杆菌的转基因操作，所以一般培养农杆菌时不考虑这些抗生素，Ti质粒丢失的概率极低(可以忽略)。

除农杆菌EHA105化学感受态细胞品牌外，我公司正在打折促销以下产品：

·*蛋白酶抑制剂Ⅰ溶液(10mg/mL)
编号：BTN130537
英文名称：Calpain InhibitorⅠSolution
规格：10mL
本品为10mg/mL的甲醇溶液，工作浓度为17μg/mL。*蛋白酶抑制剂Ⅰ(N-acetyl-Leu-Leunorleucinal,Ac-LLnL-CHO)，分子量是383.5，不溶于水。可以抑制*依赖性的中性半胱*酸蛋白酶活性。

储存条件：低温运输，-20℃保存，有效期6个月(4℃稳定一周)。避免反复冻融。

·BAL 31核酸酶
编号：BTN120409
英文名称：BAL 31 Nuclease
规格：50U
BAL 31核酸酶纯化自埃氏交替单胞菌BAL-31培养物。BAL-31核酸外切酶降解双链DNA的3´和5´末端，不切割分子内部。该酶同时还是高度特异性的单链核酸内切酶，在切刻、缺口、双链DNA单链区和双链RNA的单链区进行切割。其工作原理图如下：


产品特点：
1．从两端逐步对双链DNA进行切割，缺失的长度适合于100～1000个碱基左右。
2．加入EGTA可失活。
3．限制性酶切图谱的构建。

储存条件：低温运输，-20℃保存，有效期一年。

活性定义：1单位指在50μl反应体系，1X核酸酶BAL-31反应缓冲液，30℃条件下，10分钟从线性双链φX174 DNA(40μg/ml)的两端各切下200个碱基对所需要的酶量。

使用方法：
1．在离心管中加入下列溶液：

 

成分	用量
pBR322 -Ava I fragment	3μg(2.0pmol)
2×反应 Buffer	37.5μl
BAL 31 Nuclease	3～6U
H2O	up to 75μl

2．30℃保温。分别于1、2、3 min时各取样25μl。
3．加入20mM EGTA，65℃加热10分钟灭活酶。
4．用1% Agarose电泳确认DNA片段。

注意事项：
1．该核酸外切酶的双链产物是平齐末端和粘性末端的混合物。尽管要达到最佳连接效率需要用合适的聚合酶修复粘性末端，但该混合物仍可以直接进行克隆。
2．如果需要，可以在使用前用反应缓冲液稀释该酶。
3．只有在20mM EGTA存在条件下，酶的热失活才有效。


农杆菌EHA105化学感受态细胞品牌关键词：E.coli EHA105 Chemical Competent Cell,BTN140383,农杆菌EHA105化学感受态细胞

5,5-二巯基-2,2-二硝基*(代"*")甲*(代"酸") Non-fat Powdered Milk 69-78-3
ARB10070 人cAMP反应元件结合蛋白(CREB)免费代测 Human cyclic amp response element binding protein,creb ELISA KIT
ARB12753 小鼠CXC趋化因子受体3(CXCR3)酶标法分析 Mouse cxc-chemokine receptor 3,cxcr3 ELISA KIT
BTN81025 双染细胞凋亡检测试剂盒 Double-Stain Apoptosis Detection Kit
ARB13112 小鼠骨胶原交联(Cr)Elisa定量检测 Mouse crosslaps,cr ELISA KIT
ARB11501 人脂肪型脂肪酸结合蛋白(FABP4)血清中含量检测 Human  fabp4 ELISA KIT
分子筛3A型 DL-Alanine 308080-99-1
PY02-044  庆大霉素培养基基础  250克  
钯碳加*催化剂 1,8-Dihydroxyanthraquinone 7440-05-3
ARB10704 人多巴胺D2受体(D2R)Elisa分析 Human dopamine d2 receptor,d2r ELISA KIT
酚酞单磷酸环己*(代"胺")盐 Besmarck brown Y 14815-59-9
ARB13666 兔白细胞介素1(IL-1)酶联免疫定量检测 Rabbit  interleukin 1,IL-1ELISA KIT
BTN90805 即用型PCR试剂盒3.0 Instant PCR Kit 3.0
ARB10441 人甲状腺素(T4)elisa检测说明书 Human thyroxine,t4 ELISA KIT
农杆菌EHA105化学感受态细胞品牌关键词：E.coli EHA105 Chemical Competent Cell,BTN140383,农杆菌EHA105化学感受态细胞

BL1062 乳糖胆盐培养基
普鲁士蓝 Azodicarbonamide 14038-43-8
BTN131053 蛋白级DTT DTT,Protein Grade
9002-17-9 Xanthione oxidase  黄嘌呤氧化酶
E0620 抗凝裂解驴血
1239-45-8 Ethidium Brmide   *化乙锭
1461-15-0 Calcein *黄绿素
L0201 小鼠IgA类单克隆抗体腹水纯化试剂盒 
藜芦醛 6-PG-Ba 120-14-9
BTN60201 非酶DNA清除剂 DNA Erasol
BTN60705 一管式植物DNAOUT One-Tube Plant DNAOUT
4-**甲*(代"酸") Penicillin G Na salt 74-11-3
PY04-017  新鲜番茄汁  5ml×10支  每支添加于95ml改良番茄汁琼脂培养基基础中制成改良番茄汁琼脂培养基，用于乳酸菌菌落总数的测定
ARB10589 人血小板因子3(PF-3)elisa测定使用说明书 Human platelet factor 3, pf3 ELISA KIT
PL1401 大型/大量质粒提取试剂盒(溶液型，转染级)

我公司生产供应销*(代"售")的克隆与表达产品正全系列现货促销，满分期待您的垂询选购农杆菌EHA105化学感受态细胞品牌。