北京现货IPTG溶液销售

特别声明：本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品，严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。

百奥莱博专业生产销*(代"售")北京现货IPTG溶液销*(代"售")，我公司供应的分子生物学试剂品类齐全，且具有优势价格，欢迎新老客户垂询订购。

名称：北京现货IPTG溶液销*(代"售")
编号：BTN80909
规格：1.5mL
英文名：IPTG Solution
品牌：百奥莱博
产地：北京
本产品为浓度为200mg/mL的无色液体。IPTG是β-半乳糖苷酶的活性诱导物质。基于这个特性，当pUC系列的载体DNA(或其他带有lacZ基因载体DNA)以lacZ缺失细胞为宿主进行转化时，或用M13噬菌体的载体DNA进行转染时，如果在平板培养基中加入X-Gal和IPTG，由于β-半乳糖苷酶的α-互补性，可以根据是否呈现白色菌落(或噬菌斑)而方便地挑选出基因重组体。此外，它还可以作为具有lac或tac等启动子的表达载体的表达诱导物使用。

储存条件：低温运输、-20℃保存、有效期一年。

除北京现货IPTG溶液销*(代"售")外，我公司正在打折促销以下产品：

·潮霉素B
编号：BTN100839
英文名称：Hygromycin B Powder
规格：250mg
潮霉素B为无定形粉末。易溶于水、甲醇和乙醇，几乎不溶于低极性溶剂。熔点160~180℃。有催泪性和刺激性。

作用原理：蛋白质合成抑制剂，可干扰80S核糖体易位而造成翻译错译。

抗性机制：抗性基因hph特异性表达一种磷酸转移酶，可催化多醇环(hyosamine)的4-羟基磷酸化，产生7"-O-磷酸基-潮霉素B，后者在体内及体外均无生物活性。

储存条件：常温运输、4℃避光保存、有效期一年。

·Poly(U)聚合酶
编号：BTN130620
英文名称：Poly (U) Polymerase
规格：60U
Poly(U)聚合酶催化UTP或ATP转化的UMP或AMP添加到RNA 3´端，该反应不依赖模板的存在。

产品特点：
1．用UTP标记RNA
2．为RNA添加 poly(U)尾，用于克隆
3．研究 poly(U)加尾对转染至真核细胞的RNA在稳定性和翻译上的影响
4．2" O-甲基的3´修饰末端添加poly(A)尾
5．无DNase、RNase和磷酸酶污染。

储存条件：低温运输，-20℃保存，有效期一年。


北京现货IPTG溶液销*(代"售")关键词：BTN80909,IPTG溶液,IPTG Solution

SY0525 胰酶-EDTA溶液(0.25%)，含酚红 Trypsin-EDTA (0.25%), phenol red
KFS287 Catechin hydrate(抗氧化剂) (+)-Catechin hydrate
YT205 生物素标记ARE凝胶迁移探针(0.2μM) Biotin-labeled ARE Probe For EMSA
SV1398 p19 siRNA 结合蛋白
BTN3690B 蓝色DNA上样液，6× DNA Loading Buffer(Blue)
BTN111009 端粒酶重复片段扩增试剂盒(TRAP试剂盒) Telomeric Repeat Amplification Protocol Kit
YT616 His-tag蛋白纯化树脂(镍柱) His-tag Purification Resin
HR0019 膜蛋白和胞浆蛋白提取试剂盒 Membrane protein and Cytoplasmic Protein Extraction Kit
BTN120705 L-谷胱甘肽(还原型) Glutathione
RFT167 Top10化学感受态细胞 Top10 Competent cell
SY0269 总RNA提取试剂(同Trizol) Total RNA Extraction Reagent
KFS042 kFluor594标记抗兔免疫荧光染色试剂盒 Immunol Fluorescence Staining Kit with kFluor594-Labeled Goat Anti-Rabbit IgG
WE0298 一步法快速WB试剂盒(兔源一抗) One Step Western Kit HRP(Rabbit)
SV0845 Phusion 超保真 DNA 聚合酶
SY0748 Alexa Fluor 594标记链霉亲和素 Alexa Fluor 594 Streptavidin
KFS388 超氧化物歧化酶(SOD)测试盒(总SOD，WST-1法)
YT309 总SOD活性检测试剂盒(WST-8法) Total Superoxide Dismutase Assay Kit with WST-8
SV1562 蛋白酶 K，分子生物学级
BTN120676 Southern封堵液(NC专用) Southern Blocking Buffer (NC)
YT107 Cy3抗兔免疫荧光染色试剂盒 Immunol Fluorence Staining Kit with Cy3-Labeled Goat Anti-Rabbit IgG
SY0022 pUM19-T Vector TA克隆载体
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·一站式TA克隆试剂盒(含感受态细胞)
编号：BTN90801B
英文名称：One-Stop TA Cloning Kit(B)
规格：20次
TA克隆就是利用T载体两个3´端各带有一个T突出，而PCR扩增产物两个3´端各带有一个A突出的特点，在DNA连接酶的作用下，将PCR产物克隆到T载体中的过程，它是克隆PCR扩增产物的主要手段。

产品特点：
1.一站式，用户只需要准备PCR产物即可进行TA克隆。
2. T载体由Xcm I酶切方法制备，两个5´端100%含T突出，自连率几乎为零。
3. 克隆效率高，一次TA克隆实验一般能得到上百个重组子。
4. 阳性率高，一般能到90%以上，大大缩短了筛选工作。
5. 提供供两次实验用的对照插入片段，方便分析实验数据。
6. 插入位点两侧有对称的常见酶切位点(如EcoR I)，便于对克隆的PCR片段进行近一步的分析。
7. 克隆位点两侧分别有T3和T7 RNA聚合酶启动子，便于用克隆的PCR片段制备RNA探针。
8.可以使用pUC/M13 Forward和Reverse测序引物测定插入片段的序列。
9. T克隆位点位于β-半乳糖苷酶的α-肽编码区内，可以进行蓝白斑筛选。
10.含有丝状噬菌体f1 复制起始子，可以制备单链DNA。

成分	规格
即用型蓝白T载体(50ng/μL)	20μl
对照插入片段(50ng/μL)	5μl
T4快速连接缓冲液，2×	100μl
T4 DNA连接酶(5U/μL)	30μl
超纯水	1ml
高效感受态细胞	100μL×10只(只B型有)
说明书	1份

储存条件：低温运输，-20℃保存，有效期一年。感受态细胞需要干冰运输，-70℃保存，有效期6个月。

自备试剂：插入片段。

使用方法：

一：PCR产物的纯化和定量注意事项
1. 由于PCR体系中有大量会抑制DNA连接反应的dATP、还有一些可能在电泳胶上不一定会显示出来的非特异性扩增产物和引物二聚体，所以PCR产物必须用胶回收方法制备才能用于本试剂盒的连接。可以分别使用本公司柱式DNArc(BTN60202)和PAGE DNArc(包括柱式PAGE DNArc)从琼脂糖胶和PAGE胶上纯化回收PCR片段。具体操作见相关产品使用手册。
2. 琼脂糖胶回收的电泳缓冲液最好不要使用TBE缓冲液，因为它会影响DNA的胶回收效率。
3. 为避免UV对DNA的伤害，切胶最好在日光下进行(使用百奥莱博的绿如蓝染料的话，可以直接在黑色背景下看见DNA条带，不需要紫外光)。如果使用EB或其他染料，必须在紫外下切胶时，最好选择长波(360nm)紫外灯并以最快速度切胶，文献报道短波UV(300nm和240nm)会使DNA连接效率降低400多倍。使用短波UV时，可以使用百奥莱博的DNA防护剂UV Scavenger(BTN60601)减少伤害。
4. PCR片段的体积越小越便于后续操作。洗脱PCR片段时，用最少量的洗脱液洗脱。
 本试剂盒要求PCR回收片段的浓度最好为50ng/μL。如果浓度不够，最好用醇沉淀法沉淀后直接在管内设置连接反应，也可以使用本公司的核酸浓缩剂(BTN110801)直接浓缩。
5. 为准确定量回收的PCR产物同时又节约样品，最好使用微量分光光度计(只需用1μL样品测量)。如果分光光度计需要大量样品，建议使用电泳法定量：将回收的PCR片段与浓度已知的DNA Marker在含EB或绿如蓝染料的琼脂糖凝胶中电泳，通过比较DNA条带的相对荧光强度而估测PCR产物的浓度。

二：连接反应
1. 短暂离心装有蓝白T载体、连接缓冲液和T4连接酶的离心管。
2.在三个离心管中加入下列成分(注意，对照可以不做，在出现问题时再做)：

成份	样品管	阳性对照管	自连对照管
T4快速连接缓冲液，2×	5μl	5μl	5μl
蓝白T载体(50 ng/μL)(=0.03 pmol/μL)	1μl	1μl	1μl
自备PCR 纯化产物(0.03-0.1 pmol/μL)	Xμl(见注)	不加	不加
对照插入片段(50ng/μL)(=0.06 pmol/μL)	不加	1.5μl	不加
T4 DNA连接酶(5U/μL)	1-1.5μL	1-1.5μL	1-1.5μL
超纯水	补到10μL	补到10μL	补到10μL

注: 如何根据T载体的用量计算PCR纯化片段的最佳用量？
第一：确定插入片段与载体的最佳摩尔比，在本产品的T载体的长度固定(3Kb)时，最佳摩尔比跟插入片段的长度关系如下：

插入片段长度	与载体的摩尔比
1Kb以下	2:1或3:1
跟T载体接近(±1Kb)	1:1
比T载体长1Kb或更多	1:2或1:3

第二：根据选定的最佳摩尔比按下面方程式计算用量：

本产品提供的T载体长度为3 Kb，推荐用量为50ng，如果PCR片段长度为0.5 Kb，最佳摩尔比设定为3:1，则其用量为:

3. 用移液器吹打连接反应液使之混匀，然后放置在16℃孵育30分钟-过夜。
4. 65℃5分钟灭活连接酶后直接用于转化或-20℃保存。

三：细菌转化及筛选(仅供参考，本产品不提供相关试剂)
1. 将100μl转化效率在1×108 cfu/μg以上的感受态细胞于冰上解冻。
2. 取5-10μl连接产物加入到感受态细胞中，轻轻旋转几次以混匀内容物。
3.在冰上放置30分钟。
4. 将离心管放42℃热休克90秒，然后快速将其转移到冰浴中放置1～2分钟。
5. 每管中加900μl LB培养基，37℃振荡培养1小时复苏细胞。
6. 将100μL复苏涂布到含Amp的LB琼脂平板上(也可加上X-gal和IPTG)。
7.室温4,000rpm离心剩余的900μl复苏细胞5分钟，弃去800μl上清，用剩余100μL培养基重悬细胞并涂布到含Amp的LB琼脂平板上(可加X-gal、IPTG)。
8. 将平板置于室温直至液体被吸收。此步非常重要，否则培养板将在37℃排除水分，细菌将随水在培养基上到处游动，不能形成单个菌落。
9. 倒置平皿，于37℃培养，12～16小时后可出现菌落。一般情况下阳性对照组总共会有上千个菌落(100μl转化液产生的菌落数×10)，自联对照只有少数几个菌落，样品组的菌落数取决于PCR回收片段的质量。
10. 按常规方法筛选重组子。

MCS位点：

我公司正在打折促销克隆与表达全系列产品，恭候您的咨询选购北京现货IPTG溶液销*(代"售")。