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-20℃
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长期
- 英文名:
N-EGFP plasmid(with CMV promoter)
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247
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北京百奥莱博科技有限公司
特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
北京百奥莱博主要从事生物试剂的生产和销售,产品线涵盖N端EGFP标签融合蛋白质粒(绿色荧光蛋白)促销在内的分子生物学试剂产品,还包括PCR及荧光定量PCR、核酸提取试剂盒类、样本核酸保护试剂、核酸提取、克隆与转化、蛋白纯化、蛋白检测、免疫组化、细胞凋亡与抗体等。
名称:N端EGFP标签融合蛋白质粒(绿色荧光蛋白)促销
英文名:N-EGFP plasmid(with CMV promoter)
编号:YT476
规格:1μg
产地:国产|进口
品牌:百奥莱博
本质粒是哺乳动物细胞表达质粒,用于表达N端含EGFP(Enhanced Green Fluorescent Protein, 增强绿色荧光蛋白)标签的融合蛋白。该质粒含有CMV启动子,可以高效启动目的蛋白在细胞中的表达。在多克隆位点的前面有一个EGFP的完整编码序列,因此在多克隆位点根据阅读框插入目的基因就可以表达N端含有EGFP标签的融合蛋白。利用EGFP的荧光特性可以比较容易地观察融合蛋白的表达水平和细胞内定位,也可以利用EGFP抗体来检测或免疫沉淀融合蛋白。该质粒为卡那霉素抗性。转染细胞后,可以使用G418筛选稳定表达目的蛋白的细胞株。
本质粒质粒的主要信息如下:
| Feature Nucleotide | Position |
| CMV promoter | 1-602 |
| T3 promoter and T3 primer binding site | 620-639 |
| EGFP | 677-1393 |
| Multiple cloning site | 1394-1483 |
| T7 promoter and T7 primer binding site | 1503-1524 |
| SV40 polyA signal | 1536-1919 |
| f1 origin of ss-DNA replication | 2057-2363 |
| bla promoter | 2388-2512 |
| SV40 promoter | 2532-2870 |
| Neomycin/kanamycin resistance ORF | 205-3696 |
| HSV-thymidine kinase (TK) polyA signal | 3697-4155 |
| pUC origin | 4284-4951 |
本质粒(5003bp)的图谱如下:
使用说明:
1. 首次使用时请先取少量本质粒转化大肠杆菌,进行质粒小量、中量或大量抽提后再用于后续用途。抽提获得的质粒可以通过酶切电泳进行鉴定,或通过测序进行鉴定。
2. 本质粒在其多克隆位点适当酶切后可以插入待表达的目的基因,构建的质粒可以用常规方法转染细胞。
储存条件:-20℃。
我公司的N端EGFP标签融合蛋白质粒(绿色荧光蛋白)促销,性价比高,货期短,送货上门,欢迎您来电咨询购买,另外,我公司还生产供应销售下列产品:
·环糊精糖基转移酶
编号:YT558
英文名称:Cyclodextrin Glucanotransferase (Crude Enzyme)
规格:100ml|1L
本酶为大肠杆菌表达的环糊精糖基转移酶,并经简单纯化获得的可以确保达到一定酶活力的粗酶液,用于催化淀粉转移葡萄糖基生成环糊精。
CAS:9030-09-5
外观:半透明黄色溶液
酶促反应:Cyclizes part of a (1→4)-α-D-glucan chain by formation of a (1→4)-α-D-glucosidic bond
储存条件:-20℃,有效期1个月。
注意事项:
1. 由于本产品需新鲜制备,在您确认订购后约8个工作日才能发货。
2. 粗酶液的每次冻融均可能会引起部分失活,所以收到酶液后请根据需要进行分装,并置于-20℃或更低温度保存。
3. 随着保存时间的延长,酶活力会有一定程度的下降,收到产品后应尽快使用。
4. 本产品在生产和保存的过程中可能会有混浊或沉淀产生,融化后混匀即可,不影响正常使用。
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·非变性非还原性蛋白上样缓冲液(5X)
编号:YT054
英文名称:Native Gel Sample Loading Buffer,5X
规格:2ml
本品是一种经过改良的以溴酚蓝为染料,5倍浓缩的蛋白上样缓冲液,本产品中不含SDS等变性试剂,也不含DTT、巯基乙醇等还原性试剂,可以用于常规的非变性非还原性聚丙烯酰胺凝胶(PAGE)蛋白样品的上样。
储存条件:-20℃,有效期一年。
·酵母膏
编号:YT439
英文名称:Yeast Extract
规格:500g
本品是以培养的酿酒酵母为原料,采用生物定向降解和膜超滤技术,再经浓缩、喷雾干燥得到的高纯度粉末状产品。本产品常与胰蛋白胨(例如我司YT436胰蛋白胨)一起用于细菌等培养基如LB、LB-Agar等的配制,品质及使用效果达到国外Oxoid等同类产品标准。
本产品与胰蛋白胨(YT436)搭配使用配制的LB培养液,与用国外Oxoid的胰蛋白胨和酵母膏配制的LB相比,色泽基本一致,用于DH5α和TG1细菌培养测试时,细菌的生长曲线完全一致(参考下图),本产品为浅黄色粉末,溶解性好,溶解后澄清透亮,最高可达40%溶解度,pH中性,高压灭菌后沉淀。
本品别名:酵母膏粉、酵母浸膏或酵母浸出粉。
我公司的胰蛋白胨(YT436)和酵母膏(YT439)配制的LB培养液与用国外Oxoid的胰蛋白胨和酵母膏配制的LB的细菌培养效果图。上图为大肠杆菌DH5α(A)和TG1(B)在百奥莱博和Oxoid产品配制的LB培养液中的生长曲线比较。
本产品富含游离氨基酸、多肽、B族维生素、核苷酸、微量元素等,且小分子肽含量丰富。本产品作为微生物培养有机营养源用途广泛,不仅适用于实验室微生物培养,并且在抗生素、维生素、氨基酸、有机酸、酶制剂、医药工业、生化制品等很多工业领域都有广泛应用。
储存条件:室温避光,有效期3年。
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·R-羰基还原酶
编号:YT534
英文名称:R-Carbonyl Reductase (Crude Enzyme)
规格:100ml|1L
本酶为大肠杆菌表达的R-羰基还原酶,并经简单纯化获得的可以确保达到一定酶活力的粗酶液常用于NADH的再生。
酶促反应:(S)-R-CHOH-R" + NAD+ = R-CO-R" + NADH + H+
储存条件:-20℃,有效期1个月。
注意事项:
1. 由于本产品需新鲜制备,在您确认订购后约8个工作日才能发货。
2. 粗酶液的每次冻融均可能会引起部分失活,所以收到酶液后请根据需要进行分装,并置于-20℃或更低温度保存。
3. 随着保存时间的延长,酶活力会有一定程度的下降,收到产品后应尽快使用。
4. 本产品在生产和保存的过程中可能会有混浊或沉淀产生,融化后混匀即可,不影响正常使用。
·Caspase 2 活性检测试剂盒
编号:YT139
英文名称:Caspase 2 Activity Assay Kit
规格:20次|100次
本试剂盒是采用分光光度法检测细胞或组织裂解液中caspase 2酶活性或纯化的caspase 2酶活性的试剂盒。本试剂盒用酶标仪检测或容量不超过100μl的分光光度检测杯检测时,除标准曲线外可以检测20个样品。
是一个在细胞凋亡过程中起重要作用的蛋白酶家族。Caspase 2也称Ich-1或Nedd-2,有时被写作caspase-2或caspase 2,在细胞凋亡的信号转导过程中可以被激活。Caspase 2 mRNA可以被剪切成两种不同长短的形式。Caspase 2全长的mRNA产物可以促进凋亡,而短的mRNA的蛋白产物则可以抑制细胞凋亡。在体外,caspase 2可以被caspase 1、caspase 3和granzyme B激活。
本Caspase 2 活性检测试剂盒是基于caspase 2可以催化底物Ac-VDQQD-pNA(acetyl-Val-Asp-Gln-Gln-Asp p-nitroanilide)产生黄色的pNA(p-nitroaniline),从而可以通过测定吸光度来检测caspase 2的活性。pNA在405nm附近有强吸收。
试剂盒中提供了caspase 2催化产生的黄色产物pNA,可以作为定量caspase 2酶活性的标准品。
试剂盒组分:
裂解液——————8ml
检测缓冲液——————8ml
Ac-VDQQD-pNA(2mM)———200μl
pNA(10mM)——————200μl
注意事项:
1. 须自备可以测定A405或A400的酶标仪或容量不超过100μl的分光光度检测杯及相应分光光度计。优先考虑测定A405,如有困难可以测定A400。
2. Ac-VDQQD-pNA需尽量避免反复冻融,请注意适当分装。
3. 测定蛋白浓度需Bradford蛋白浓度测定试剂盒(YT034),可向百奥莱博订购。建议样品用水稀释1倍后再用Bradford法测定蛋白浓度,以降低DTT对蛋白浓度测定的干扰。
4. pNA(中文名为4-硝基苯胺)有毒,请注意小心防护。pNA(10mM)在4℃、冰浴等较低温度情况下会凝固而粘在离心管管底、管壁或管盖内,可以20-25℃水浴温育片刻至全部融解后使用。
5. 本试剂盒的裂解液可以和百奥莱博的其它caspase活性检测试剂盒的裂解液通用,即本试剂盒裂解液制备的蛋白样品可以用于百奥莱博其它caspase活性检测试剂盒的检测。
储存条件:-20℃。
我公司强烈推荐克隆与表达系列产品,热情期待您的咨询选购N端EGFP标签融合蛋白质粒(绿色荧光蛋白)促销。
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文献和实验前言: NusA融合蛋白表达系统于9年前(1999年)由Davis发明,并在2000年由Novagen首先进行商业化设计和开发,特别推荐用于以NusA作为N端标签时提高在大肠杆菌中难溶的重组表达蛋白的可溶性。NusA融合蛋白表达系统面市至今,已经通过一些高通量表达筛选的评估确认其在可溶性改善方面的有效性。关于NusA融合表达蛋白去除或不去除NusA标签,目的蛋白仍然具有活性的报道也有很多。正是由于NusA标签系统的这种特性,使其成为目前在大肠杆菌表达体系中使用最为广泛的三个融合标签
检测、鉴定。 融合在N端的FLAG,其可以被肠激酶切除(DDDK),从而得到特异的目的蛋白。因此现FLAG标签已广泛的应用于蛋白表达、纯化、鉴定、功能研究及其蛋白相互作用等相关领域。 MBP(麦芽糖结合蛋白) MBP(麦芽糖结合蛋白)标签蛋白大小为40kDa,由大肠杆菌K12的malE基因编码。MBP可增加在细菌中过量表达的融合蛋白的溶解性,尤其是真核蛋白。MBP标签可通过免疫分析很方便地检测。有必要用位点专一的蛋白酶切割标签。如果蛋白在细菌中表达,MBP可以融合
绿色荧光蛋白的表达、检测及应用 2013-11-27 12:42:10 来源: 评论:0 我要评论
突变的方式,把第65位丝氨酸换成苏氨酸或胱氨酸,荧光强度提高了4~6倍。后来的研究中用到的gfp突变体都是在此基础上通过改变若干碱基而得到的。 gfp作为一种新型的非酶性报告基因,能与多种不同蛋白质的N端或C端融合表达而不影响各自的特征,即融合蛋白质在细胞内仍能行使正常功能,而且融合蛋白保持与GFP 相似的荧光特性,所以应用范围很广。如,将目的基因与gfp融合,导入 生物 体内进行表达,然后观察融合蛋白在细胞内的位置。检测简便,不需要任何外源底物或辅助因子,是一种直观性很强
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