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- 2025年07月06日
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上海经科化学科技有限公司
- 服务名称：
流式摄取实验服务
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个
流式摄取实验服务
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文献和实验实验目的： 通过 Aco600 染料标记外泌体，并与受体细胞共孵育，通过激光共聚焦显微镜观察外泌体被靶细胞的摄取情况。 实验材料： 外泌体红色荧光标记染料 Aco600（Umibio UR52423） Exosome 来自 MCF 细胞无血清培养基（Umibio，UR51102）条件下获得，通过超速离心方式获得。（也可直接采购 Umibio 的成品外泌体） Aco600-Exosome：24 孔板每孔外泌体总颗粒数: 1×1010 个（5×109-1×1010），外泌体体积 100-300ul
#01 什么是同型对照？ 同型对照（Isotype Control），是指与使用的流式抗体具有相同种属来源、亚型、荧光标记物、使用剂量和浓度，但对目标靶点无特异性结合的抗体。同型对照通常用来消除抗体与抗原的非特异性结合造成的背景染色。 #02 为什么要做同型对照？ 流式抗体与靶标的结合，是通过抗体的 Fab 端与靶标 Marker 进行特异性结合而完成的。白细胞（除T细胞外）表面大多表达 CD16、CD32、CD64 等 Fc 受体，这些受体可与各种抗体的 Fc 端非特异性结合，出现非特异
大部分老师做流式实验时，会用到空白对照、单阳对照、同型对照、生物学对照等，用到 FMO 对照的比较少。尽管如此，FMO 对照在设置圈门时仍具有重要的参考价值。 一方面，FMO 对照有助于精确地设置阴阳性群体界限。我们在做多色实验时，可能会出现某些通道信号难以区分的情况，主要是因为其他某个荧光对该通道的干扰很大。FMO 对照（Fluorescence Minus One，荧光扣除一）减少了其中一个通道的荧光抗体，能够帮助衡量其它通道的荧光漏溢情况。 如下图所示，PerCP/Cyanine
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