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- roche
- 罗氏/ 11699113001
- 2025年11月06日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 英文名：
MgCl2, Stock Solution
- 保质期：
见产品外包装
- 供应商：
嵘崴达
- 保存条件：
−20°C
- 库存：
需确认
- 规格：
3 X 1 ML
MgCl 2 贮备液
pH 8.25-8.45 (25 °C), suitable for PCR, solution, pkg of 3 × 1 mL
别名:
氯化镁溶液
一般描述
MgCl2 储液用于单独调节PCR反应中Mg2+的浓度，同时可以与不含MgCl2的PCR缓冲液结合使用。 大多数应用中，1.5 mM浓度的MgCl2即可产生令人满意的结果，而 dNTP 的浓度均为200μM。 不过，在许多情况下，需要通过滴定获得最佳Mg2+ 浓度，以提高 PCR 反应的特异性和产量。
应用
对不含 MgCl 2 的 PCR 缓冲液和 MgCl 2 贮备液缓冲液组合进行了优化，以在常规 PCR（即 ，含 Taq DNA 聚合酶）中扩增特定 DNA 片段。然而，MgCl 2 贮备液可以与其他更合适的 PCR 缓冲液一起使用，以优化任何类型的 PCR（例如 热启动 PCR、高保真 PCR、长模板 PCR）。
生化/生理作用
镁（Mg2+）可螯合三磷酸核苷（dNTP），使用镁是聚合酶链反应（PCR）的一种优化策略。 它通过稳定核苷的磷酸酯基团，促进低聚磷酸酯的zheng磷酸酯合成。
外形
MgCl 2 贮备液在无菌水中含有 25 mM MgCl 2 。
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文献和实验PCR 反应体系的Mg2+ 的浓度 Mg2+ 是Taq DNA聚合酶活性所必需的,Mg2+ 浓度除影响酶活性与忠实性外,也影响引物的退火, 模板与PCR产物的解链温度,产物的特异性引物二聚体的形成等。Mg2+ 浓度过低时,酶活力明显降低;过高时,酶可催化非特异性扩增。PCR中Mg2+ 浓度在0.5～2.5mmol/L之间。如果溶液中存在EDTA,或在引物贮备液中有其他螯合物或者DNA模板,会干扰Mg2+ 的浓度。因此,要适当调整Mg2+ 的用量。 Mg2+ 浓度
x PCR缓冲液： 500mm01／L KCl； 100mmol／L Tris一HCl(pH8.4， 20c)，150mmol／L MgCl2， lmg／m1明胶。(4)5mmo1／L dNTP贮备液：将dATP，dCTP，dGTPT和dTTP钠盐各100mg合并，加3m1灭菌去离子水溶解，用NaoH调pH至中性，分装每份300v1， - 20℃保存，dNTP浓度最好用uv吸收法精确测定。另外。现在已有中性dNTP溶液商品供应(Sigma公司和Pharmacia公司等)。(5)标本处理试剂：不同标本所需
模板cDNA制备后用分光光度计精确定量,然后配制精确的系列稀释溶液，浓度为10ng～1pg/ml。 3. 4种浓度dNTP贮液均为2.5mmol/L，混合之前需测定浓度。 4. Taq酶5U/μl，AMV或mMLV逆转录酶，RNA酶抑制剂。 5. 20mmol/L DTT贮备液。 操作方法 1． 逆转录反应：制备的mRNA纯度愈高，定量的结果愈好，除使用商品化的试剂盒外，对于非常少量的细胞可在裂解液(0.5％NP-40，10mmol/L Tris-HCl（pH8.0），10
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