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- 百奥莱博
- WE0241-HZC
- 北京
- 2025年07月10日
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522
- 英文名：
NGS Multiplex Oligos for Illumina(Index Primers Set I)
- 保质期：
长期
- 供应商：
北京百奥莱博科技有限公司
- 保存条件：
-20℃
特别声明：本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品，严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
北京百奥莱博专业生产供应二代测序接头引物试剂盒(Illumina平台 Index Primer1-12)价格厂家，我公司销*(代"售")全品类的分子生物学试剂，价格优惠，欢迎广大科研工作者垂询订购。
名称：二代测序接头引物试剂盒(Illumina平台 Index Primer1-12)价格厂家
品牌：百奥莱博
英*(代"文")名：NGS Multiplex Oligos for Illumina(Index Primers Set I)
产地：国产|进口
规格：24次|96次
编号：WE0241
本试剂盒提供了二代测序建库中使用的adaptor与primer，专为illumina平台建库设计，index primer的设计可满足多重高通量测序时制备多个文库样本的需要，制备的文库可用于Illumina GAIIx，HiSacnSQ、HiSeq 2500/2000/1000和MiSeq sequencing等测序平台的测序。
试剂盒组成：
| 组份 | 24次 | 96次 |
| Adaptor for Illumina | 60μl | 240μl |
| Universal Primer for Illumina | 30μl | 120μl |
| Index 1– 12 Primers for Illumina | 12×10 μ l | 12×20 μ l |
自备仪器、试剂和耗材：
1、磁力架：建议使用DynaMagTM-2(货号： 12321D)。
2、DNA纯化回收试剂盒：建议使用百奥莱博磁珠法DNA纯化回收试剂盒(货号： WE0205)。
3、DNA建库试剂盒：建议使用百奥莱博二代测序快速DNA建库试剂盒(货号： WE0229)。
4、无水乙醇。
5、反应管：建议使用低吸附的PCR管与1.5ml离心管；枪头：建议使用高质量过滤枪头防止试剂盒、文库样本污染。
实验前准备及重要注意事项/strong>：
1、Adaptor为双链结构，请勿将其置于室温温度以上，以免发生解链、影响使用。
2、Index primer开盖前请短暂离心，使液体收集到管底，以免不同引物间交叉污染。
使用流程
操作步骤：
百奥莱博二代测序多样本接头引物试剂盒使用方法请按照百奥莱博二代测序快速DNA建库试剂盒(Cat .No.WE0229)protocol进行。
Adaptor for Illumina：
5´-/5Phos/ GATCGGAAGAGCACACGTCTGAACTCCAGT*C -3´
5´-ACACTCTTTCCCTACACGACGCTCTTCCGATC*T-3´
Universal Primer for Illumina：
5-AATGATACGGCGACCACCGAGATCTACACTCTTTCCCTACACGACGCTCTTCCGATC*T -3´
Index 1–12 Primers for Illumina：
| Index Primers for Illumina | Index | |
| Index 1 Primerfor Illumina | 5-CAAGCAGAAGACGGCATACGAGATCGTGATGTGA CTGGAGTTCAGACGTGTGCTCTTCCGATC-s-T-3´ |
ATCACG |
| Index 2 Primerfor Illumina | 5-CAAGCAGAAGACGGCATACGAGATACATCGGTGA CTGGAGTTCAGACGTGTGCTCTTCCGATC-s-T-3´ |
CGATGT |
| Index 3 Primerfor Illumina | 5-CAAGCAGAAGACGGCATACGAGATGCCTAAGTGA CTGGAGTTCAGACGTGTGCTCTTCCGATC-s-T-3´ |
TTAGGC |
| Index 4 Primerfor Illumina | 5-CAAGCAGAAGACGGCATACGAGATTGGTCAGTGA CTGGAGTTCAGACGTGTGCTCTTCCGATC-s-T-3´ |
TGACCA |
| Index 5 Primerfor Illumina | 5-CAAGCAGAAGACGGCATACGAGATCACTGTGTGA CTGGAGTTCAGACGTGTGCTCTTCCGATC-s-T-3´ |
ACAGTG |
| Index 6 Primerfor Illumina | 5-CAAGCAGAAGACGGCATACGAGATATTGGCGTGA CTGGAGTTCAGACGTGTGCTCTTCCGATC-s-T-3´ |
GCCAAT |
| Index 7 Primerfor Illumina | 5-CAAGCAGAAGACGGCATACGAGATGATCTGGTGA CTGGAGTTCAGACGTGTGCTCTTCCGATC-s-T-3´ |
CAGATC |
| Index 8 Primerfor Illumina | 5-CAAGCAGAAGACGGCATACGAGATTCAAGTGTGA CTGGAGTTCAGACGTGTGCTCTTCCGATC-s-T-3´ |
ACTTGA |
| Index 9 Primerfor Illumina | 5-CAAGCAGAAGACGGCATACGAGATCTGATCGTGA CTGGAGTTCAGACGTGTGCTCTTCCGATC-s-T-3´ |
GATCAG |
| Index 10 Primerfor Illumina | 5-CAAGCAGAAGACGGCATACGAGATAAGCTAGTGA CTGGAGTTCAGACGTGTGCTCTTCCGATC-s-T-3´ |
TAGCTT |
| Index 11 Primerfor Illumina | 5-CAAGCAGAAGACGGCATACGAGATGTAGCCGTGA CTGGAGTTCAGACGTGTGCTCTTCCGATC-s-T-3´ |
GGCTAC |
| Index 12 Primerfor Illumina | 5-CAAGCAGAAGACGGCATACGAGATTACAAGGTGA CTGGAGTTCAGACGTGTGCTCTTCCGATC-s-T-3´ |
CTTGTA |
储存条件：-20℃
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甲*-4-磺酸* Myristoylcholine chloride 657-84-1
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抗酒石酸酸性磷酸酶(TRAP)检测试剂盒(PNP比色法) 60T
BL1424 1.5M Tris-HCL (PH8.8)
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PY02-262 胆盐乳糖发酵培养基 250克
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·BaldStar TaqMan Mixture(dUTP+UNG酶)(高含量ROX校正染料)
编号：WE0156
英*(代"文")名称：BaldStar TaqMan Mixture(dUTP+UNG)(High ROX)
规格：5ml
本品是专用于探针法(TaqMan，Molecular Beacon等)实时荧光定量PCR的预混体系，浓度为2×，包含 BaldStar Taq DNA polymerase、PCR Buffer、dNTPs(dTTP全部被dUTP所取代)、UNG酶和Mg2+，操作简单方便。主要用于基因组DNA靶序列和RNA反转录后的cDNA靶序列的检测，如基因表达分析，拷贝数分析，SNP基因型分析等。本产品中运用了dUTP-UNG防污染系统，在PCR反应体系配制过程中加入了dUTP，因此就形成了含有dU碱基的扩增产物。而此产物可以在下次进行PCR反应前，由PCR体系中的UNG酶处理消除。这样就有效的去除了PCR产物的残留污染，大大降低了由于扩增产物污染而导致的假阳性。UNG酶在PCR循环中的预变性步骤即可被灭活，因此不会影响新的含dU碱基PCR产物的形成。本品含有的 BaldStar Taq DNA Polymerase是一种经化学修饰的、全新高效热启动酶，在常温下没有聚合酶活性，有效避免在常温条件下由引物和模板非特异性结合或引物二聚体而产生的非特异性扩增，酶的激活须在95℃下孵育10分钟。独特的 PCR缓冲体系与热启动酶的组合，显著提高了PCR的扩增效率，荧光信号更强，灵敏度更高，可以检测单拷贝的模板。使用本产品可以得到更广的线性范围，对目的基因定量更准确。
ROX染料用于校正定量PCR仪孔与孔之间产生的荧光信号误差，一般用于ABI、Stratagene等公司的Real Time PCR 扩增仪。不同仪器的激发光学系统有所不同，因此ROX染料的浓度必须与相应的荧光定量PCR仪相匹配。
不需要ROX校正的仪器(WE0154)：
Roche LightCycler 480，Roche LightCyler 96，Bio-rad iCyler iQ，iQ5，CFX96等。
需要Low ROX校正的仪器(WE0155)：
ABI Prism7500/7500 Fast，QuantStudio® 3 System，QuantStudio® 5 System，QuantStudio® 6 Flex System，QuantStudio® 7 Flex System，ViiA 7 system，Stratagene Mx3000/Mx3005P，Corbett Rotor Gene 3000等。
需要High ROX校正的仪器(WE0156)：
ABI Prism7000/7300/7700/7900，Eppendorf，ABI Step One/Step One Plus等。
产品组成：
| 组份 | WE0154-5ml | WE0155-5ml | WE0156-5ml |
| 2×BaldStar TaqMan Mixture(UNG) | 5×1ml | 5×1ml | 5×1ml |
| 50×Low ROX | - | 200μl | - |
| 50×High ROX | - | - | 200μl |
| ddH2O | 5×1ml | 5×1ml | 5×1ml |
注意事项：
1、使用前请上下颠倒轻轻混匀，尽量避免起泡，并经短暂离心后使用。
2、避免反复冻融本品，反复冻融可能使产品性能下降。本产品长期保存可置于-20℃，避光。如果在短期内需要频繁使用，可在2～8℃保存。
使用方法：
以下举例为常规PCR反应体系和反应条件，实际操作中应根据模板、引物结构和目的片段大小不同进行相应的改进和优化。
1、PCR反应体系
| 试剂 | 50μl反应体系 | 终浓度 |
| 2×BaldStar TaqMan Mixture(UNG) | 25μl | 1× |
| Forward Primer，10μM | 1μl | 0.2μM |
| Reverse Primer，10μM | 1μl | 0.2μM |
| Probe，10μM | 1μl | 0.2μM |
| Template DNA | 2μl | |
| 50×Low ROX or High ROX(可选) | 1μl | 1× |
| ddH2O | up to 50μl |
注意：
1)通常引物浓度以0.2μM可以得到较好结果，可以在0.1-1.0μM作为设定范围的参考。
2)使用的探针浓度，与使用的荧光定量PCR仪、探针种类、荧光标记物质种类有关，实际使用时请参照仪器说明书，或各荧光探针的具体使用要求进行浓度的调节。
3)通常DNA模板的量以10-100ng基因组DNA或1-10ng cDNA为参照，因不同物种的模板中含有的目的基因拷贝数不同，可对模板进行梯度稀释，以确定最佳的模板使用量。
4)不同仪器的激发光学系统有所不同，根据使用荧光定量的仪器选择加入50× Low ROX or 50×High ROX。
2、PCR反应程序
注意！本产品预变性反应必须在95℃ 10分钟下完成！
两步法PCR：
| 步骤 | 温度 | 时间 | 循环数 |
| UNG酶消化 | 37℃/50℃ | 2-10 min | |
| 预变性 | 95℃ | 10 min | |
| 变性 | 95℃ | 15 s | 35-40个循环 |
| 退火/延伸 | 60℃ | 1 min |
注意：
1)本产品所采用的热启动酶须在预变性95℃、10 min条件下实现酶的活化。
2)建议采用两步法PCR反应程序，若因使用Tm值较低的引物等原因，得不到良好的实验结果时，可尝试进行三步法PCR扩增。
三步法PCR：
| 步骤 | 温度 | 时间 | 循环数 |
| UNG酶消化 | 37℃/50℃ | 2-10 min | |
| 预变性 | 95℃ | 10 min | |
| 变性 | 95℃ | 15 s | 35-40个循环 |
| 退火 | 55℃-65℃ | 30s | |
| 延伸 | 72℃ | 30s |
储存条件：-20℃，避免反复冻融
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最近市面上出现了很多新一代测序仪产品，例如美国Roche Applied Science公司的454基因组测序仪、 美国Illumina公司和英国Solexa technology公司合作开发的Illumina测序仪、美国Applied Biosystems公司的 SOLiD测序仪、Dover/Harvard公司的Polonator测序仪以及美国Helicos公司的HeliScope单分子测序仪。所 有这些新型测序仪都使用了一种新的测序策略——循环芯片
如Corall total RNA seq library preparation kit，这一点可以忽略）。 利用所选的RNA样本和文库生成引物进行逆转录进行一链合成。 然后通过沿cDNA链随机引物进行第二链合成。 进行末端修复，接头连接。 最后进行PCR扩增，为文库添加index，或文库扩增以以获得足够量的文库，以及进行文库质量控制。 Lexogen mRNA-Seq文库准备与其他全转录组测序文库制备方法略微不同。在Lexogen mRNA-Seq文库准备中
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