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- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
冷藏
- 保质期:
长期
- 英文名:
NGS Library Quantification Kit for Ion torrent
- 库存:
673
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
北京百奥莱博专注于生命科学和生物技术领域,致力于为客户提供包括北京WE0233型DNA文库定量试剂盒(Ion Torrent平台)品牌在内的一系列分子生物学试剂产品,并提供一系列相关的技术服务。
名称:北京WE0233型DNA文库定量试剂盒(Ion Torrent平台)品牌
英文名:NGS Library Quantification Kit for Ion torrent
品牌:百奥莱博
产地:国产|进口
编号:WE0233
规格:1ml|5ml
本产品是采用染料法(SYBR Green I)对NGS建库后的产物进行实时荧光定量PCR(qPCR)。试剂盒提供了qPCR过程所需的反应混合液,DNA引物混合物、标准品以及样品稀释液,试剂体系完整,操作简单方便。反应混合物中所含的荧光染料SYBR Green I 可以与所有的双链DNA结合;使用的BaldStar Taq DNA Polymerase是一种经化学修饰的全新高效热启动聚合酶,酶的激活需在95℃下孵育10 min。该产品特异性强、扩增效率高,能够对构建的文库浓度进行快速准确的定量。
ROX染料用于校正定量PCR仪孔与孔之间产生的荧光信号误差,一般用于ABI、Stratagene等公司的Real Time PCR扩增仪。不同仪器的激发光学系统有所不同,因此ROX染料的浓度必须与相应的荧光定量PCR仪相匹配。
不需要ROX校正的仪器: Roche LightCycler 480,Roche LightCyler 96,Bio-radiCyler iQ,iQ5,CFX96等。
需要Low ROX校正的仪器: ABI Prism7500/7500 Fast,QuantStudio® 3 System,QuantStudio® 5 System, QuantStudio® 6 Flex System,QuantStudio® 7 Flex System,ViiA 7 system, Stratagene Mx3000/Mx3005P,Corbett Rotor Gene 3000等。
需要High ROX校正的仪器: ABI Prism7000/7300/7700/7900,Eppendorf,ABI Step One/Step One Plus等。
欲咨询购买北京WE0233型DNA文库定量试剂盒(Ion Torrent平台)品牌,请致电北京百奥莱博科技有限公司,为您提供最全面周到的产品服务,除此之外,我公司正在促销以下产品:
·Cy3标记山羊抗小鼠IgG(H+L)
编号:WE0383
英文名称:Goat Anti-Mouse IgG, Cy3 Conjugated
规格:100μl
本产品为Cy3标记的经抗原亲和纯化的山羊抗体,特异识别小鼠IgG重链和轻链,可以与TRITC使用相同的滤光片。使用本产品检测灵敏度高,本底低。
免疫原:小鼠IgG
缓冲液:0.01M PBS,50%甘油,pH7.6
稳定剂:15 mg/ml BSA(不含IgG和蛋白酶)
防腐剂:0.05%叠氮*
荧光团:Cy3 bis-NHS ester,Amax=550; Emax=570
应用范围:对于大多数实验(1:50-400)
·FITC标记驴抗大鼠IgG(H+L)
编号:WE0368
英文名称:Donkey Anti-Rat IgG, FITC Conjugated
规格:100μl
本产品为FITC(硫*酸荧光素)标记的经亲和纯化的山羊抗体,特异识别小鼠IgG重链和轻链。本产品检测灵敏度高,本底低,对其他种属IgG无明显交叉反应。荧光素标记抗体广泛应用于免疫学、细胞化学、流式细胞分析等研究,在临床检验上也用于细菌、病毒和寄生虫的检验及自身免疫病的诊断等。
免疫原:大鼠IgG
缓冲液:0.01M PBS,50%甘油,pH7.6
稳定剂:15 mg/ml BSA(不含IgG和蛋白酶)
防腐剂:0.05%叠氮*
荧光团:FITC,Amax=492; Emax=520
应用范围:对于大多数实验(1:50-200)
北京WE0233型DNA文库定量试剂盒(Ion Torrent平台)品牌关键词:DNA文库定量试剂盒(Ion Torrent平台),WE0233,NGS Library Quantification Kit for Ion torrent
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北京WE0233型DNA文库定量试剂盒(Ion Torrent平台)品牌关键词:DNA文库定量试剂盒(Ion Torrent平台),WE0233,NGS Library Quantification Kit for Ion torrent
·miRNA cDNA第一链合成试剂盒
编号:WE0157
英文名称:miRNA cDNA Synthesis Kit
规格:25次
本试剂盒采用在miRNA 3’末端加多聚A尾的方法来使miRNA具有Poly(A)尾,之后再使用Oligo(dT)-Universal tag通用逆转录引物进行逆转录反应,最终合成miRNA对应的第一链cDNA。
miRNA cDNA第一链合成试剂盒包含miRNA 3’末端Poly(A)尾修饰过程及修饰后逆转录过程需要的全部试剂。该试剂盒具有非常高的Poly(A)修饰和逆转录效率,可以从1ng-2μg的total RNA中有效获得miRNA对应的cDNA第一链。并且操作简便、快捷,可以用于从一个反应合成的cDNA中同时检测多种miRNA,不仅减少了误差、节约了样品,同时还实现了检测的高通量。
试剂盒组成:
| 组份 | 25次 |
| Tris-Hcl,1 mM,PH 8.0 | 1ml |
| E.coli Poly(A)Polymerase,5U/μl | 15μl |
| 10×Poly(A)Polymerase Buffer | 80μl |
| ATP,10 mM | 15μl |
| RT Primer,25μM | 90μl |
| 5×UltraRT Buffer | 120μl |
| UltraPure dNTP Mix,10 mM each | 30μl |
| UltraRT | 15μl |
| RNase-Free Water | 1ml |
备注:本试剂盒须与miRNA荧光定量检测试剂盒(WE0158)配套使用。
自备实验材料:1ng-2μg的总 RNA,或0.1ng-1μg的小分子RNA。
注意事项:
预防RNase污染,应注意以下几方面:
1、使用无RNase的塑料制品和枪头,避免交叉污染。
2、玻璃器皿应在使用前于180℃高温下干烤4小时,塑料器皿可在0.5 M NaOH中浸泡10分钟,用水彻底冲洗后高压灭菌。
3、配制溶液应使用无RNase的水。
4、操作人员戴一次性口罩和手套,实验过程中要勤换手套。
使用方法:
A.miRNA加Poly(A)尾的过程:
1、首先根据所用RNA的量,按如下公式,用1 mM Tris(PH8.0)来稀释10 mM ATP:
ATP稀释系数=5000/__ng的总RNA
例:如果总RNA的起始用量为100ng,那么ATP稀释系数=5000/100=50。即将ATP稀释50倍(1μl的10 mM ATP加49μl的1 mM Tris,PH8.0)。
2、向冰浴中预冷的无RNase反应管中加入以下试剂至总体积25μl。
| 试剂 | 25μl反应体系 | 终浓度 |
| total RNA | Xμl | 可达2μg |
| 10×Poly(A)Polymerase Buffer | 2.5μl | 1× |
| 第“1”步中稀释好的ATP | 1μl | — |
| E.coli Poly(A)Polymerase, 5U/μl | 0.5μl | 2.5 U |
| RNase-Free Water | up to 25μl | — |
注意:反应中使用的total RNA必须含有小分子RNA。
此过程也可以直接使用小分子RNA(建议加入量为2-5μl。请根据目的miRNA的丰度来确定加入量)。
3、轻轻混匀上述反应液,短暂离心将液体收集于管底。37℃,孵育15分钟。此过程结束后,立刻进行第一链cDNA的合成,或于-20℃暂存。如需长期保存,建议存放于-80℃。
B.修饰后的miRNA cDNA第一链合成的过程:
1、向冰浴中预冷的无RNase反应管中加入下表中试剂,至终体积20μl:
| 试剂 | 20μl反应体系 |
| 上述Poly(A)反应液 | 4μl |
| UltraPure dNTP Mix,10 mM each | 1μl |
| RT Primer,25 μ M | 3μl |
| 5×UltraRT Buffer | 4μl |
| UltraRT | 0.5μl |
| RNase-Free Water | 7.5μl |
2、轻轻混匀上述反应液,短暂离心将液体收集于管底。42℃,孵育50分钟。
3、85℃,孵育5分钟,终止反应。合成的cDNA反应液可以直接进行荧光定量检测实验,也可以于-20℃保存备用。
储存条件:-20℃,避免反复冻融。
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