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★ 基于抗体对抗原的特异性识别
★ 磁性微珠直接或间接偶联在抗体上,从而与细胞相连
★ 在高强度、梯度磁场中达到细胞磁性分离的目的
MACS技术优点:
1.MACS微珠有氧化铁和多聚糖组成,直径只有50nm,体积大约为真核细胞的百万分之一
2.微珠易于降解,对细胞无毒性,分选后细胞仍旧保持生理功能
3.与流式细胞仪兼容,分选后细胞可以立即用于分析和后续实验
4.高纯度、高回收率、高活性
和序生物有多种分选试剂盒可供选择,同时也可以提供分选各种免疫细胞亚群服务。
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文献和实验而在无磁场时无磁性。7、不同的Dynabeads类型特殊的亲水和疏水特性能促进分子结合到它们的表面上。Dynal Biotech提供各种在其表面已包被或未包被有配基的磁珠。二、Dynabeads的大小在细胞分离和细胞修饰过程中,标准尺度的Dynabeads 磁珠是4.5 μm,可应用于各种样本(如全血、骨髓、白细胞层)的细胞分离。而2.8 μm的Dynabeads通常用于分子水平上,如DNA、RNA、蛋白质的分离等。Dynal Biotech拥有专门的技术来生产直径为1~10 μm的Dynabeads
,磁珠很小不影响流式分析 4、试剂可以在其它需要过柱子的免疫磁珠分选系统上应用 操作步骤 StemSep® 负选试剂为需要柱子的免疫磁珠负选方法设计 使用四聚体复合物(TAC)可将不需要的细胞与磁珠相连。TAC由两个小鼠的IgG1抗体和两个大鼠抗小鼠的IgG1组成。两个大鼠抗小鼠的IgG1将两个小鼠抗体联起来,其中一个小鼠抗体与需要的细胞特异结合,而另一个小鼠抗体与磁珠上包被的葡聚糖结合。当不需要的细胞与磁珠结合后,在通过放在磁极上的柱子时,不需要的细胞被留在了柱子
磁珠分选细胞注意事项1、待分选细胞中如有贴壁细胞,建议在分选前先贴壁培养去除,或者提高EDTA浓度。2、抗体包被磁珠对死细胞常有非特异性结合。因而分选前去除死细胞。3、新鲜分离骨髓细胞,先用胶原酶、DNA酶、胰酶联合消化,可使细胞团块解聚,从而提高分离效率。4、上分离柱前,充分振荡,混悬细胞,打散细胞团块。5、用分离柱分选,应用真空抽滤水,减少水中气泡,使分离柱不被气泡阻滞。6、细胞悬液加入分离柱中时,应将滴管伸至底壁后加入,避免将细悬液沿管壁流入,使管壁残流末分选细胞,以致后继洗柱过程中
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