- ¥190 - 2250
- 百奥莱博
- BTN160686-25K-QLM
- 北京
- 2025年07月11日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
205
- 英文名：
SuperTOPO TA Cloning Kit
- 保质期：
一年
- 供应商：
北京百奥莱博科技有限公司
- 保存条件：
低温运输，-20℃
特别声明：本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品，严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
SuperTOPO-Kan TA克隆试剂盒厂家直销由专业试剂供应商北京百奥莱博提供，用于生化科研试验，本产品质量好，且极具价格优势，深为用户称道，了解更多SuperTOPO-Kan TA克隆试剂盒等克隆与表达产品请联*(代"系")我司咨询订购。
北京百奥莱博科技有限公司专业生产供应SuperTOPO-Kan TA克隆试剂盒厂家直销，产品信息：
类别：克隆与表达
英文名：SuperTOPO TA Cloning Kit
| 产品名 | 产品编号 | 包装规格 |
| SuperTOPO-Kan TA克隆试剂盒 | BTN160686-25K | 25次 |
品牌：百奥莱博
编号：BTN160686-25K
产地：国产|进口
规格：25次
英文名：SuperTOPO TA Cloning Kit
本试剂盒是基于Topoisomerase能够在几秒钟之内高速连接DNA片段的原理开发的无背景克隆试剂盒，它使用了本公司通过定点突变改良的TOPO酶，连接效率比野生型更高。
产品特点：
1.高效快速，连接反应几乎在几秒钟内完成，连接率几乎达到100%。
2.适用于具有A 尾巴的DNA片段使用。
3. 无杂带或引物二聚体的PCR扩增产物可以不经过纯化直接用于连接反应。
4.转化时只需要37℃,10分钟复苏即可涂盘，免去冰浴、热休克和复苏步骤。
5. 零背景，无需IPTG-X-Gal蓝白斑筛选，故不需要IPTG-X-Gal培养基。
6. 本试剂盒按10μL标准反应体系，有25次和50次两种规格包装供选择。
7. 提供含Amp和Kan两种抗性的载体供选择(BTN160686-25A是含Amp抗性TOPO载体，BTN160686-25K是含Kan抗性TOPO载体)。
试剂盒组成：
| 成分 | 规格 |
| SuperTOPO-Amp载体 | 25μl(BTN160686-25A) |
| SuperTOPO-Kan载体 | 25μl(BTN160686-25K) |
| 连接缓冲液 | 25μl |
| 超纯水 | 1ml |
| 说明书 | 1份 |
注意：BTN160686-25A提供SuperTOPO-Amp载体，BTN160686-25K提供SuperTOPO-Kan载体。
储存条件：低温运输，-20℃保存，有效期一年。
使用方法：
1. PCR扩增或酶切回收DNA插入片段。如果是PCR制备插入片段，所用引物不能磷酸化，使用Taq系列的DNA聚合酶。
2.电泳检测并相对定量PCR片段或酶切回收片段(跟DNA marker比较)。
并根据插入片段长度和下表确定每次连接反应需要的最佳用量：
| 插入片段长度 | 最佳用量 |
| 100-1000bp | 20-50ng |
| 1000-2000bp | 50-100ng |
| 2000-5000bp | 100-200ng |
3.在一个干净的塑料离心管中，室温下(不要放在冰上)设置如下连接反应体系：
| 成分 | 用量 |
| 纯化后的PCR产物 | 不超过8μl(详见注意事项) |
| SuperTOPO-Amp载体或 SuperTOPO-Kan载体 |
1μl |
| 连接缓冲液 | 1μl |
| 超纯水 | 补到10μL |
注意：如果使用未经纯化的PCR产物，则需要加入量不能超过1μL，否则PCR 体系会干扰连接体系。
4. 轻柔吹打混匀后，短暂离心，常温(20-30℃)放置0-5分钟。如果在冬天室温低于20℃，建议使用25℃水浴或金属浴。注意：连接时间超过5分钟的话连接效率会降低。
5. 如果当天不转化，可以将离心管放-20℃保存。如果转化，则取5μL连接液加到50-100μL刚刚融化的感受态细胞中，轻柔混匀。注意：本产品要求感受态细胞的转化效率不得低于5﹡10E7cfu/ug。
6. 如果片段长度小于2Kb，则不需要冰浴和热激，直接在离心管中加入500μL不含抗菌素的SOC或LB培养基，然后取200μL涂盘。也可以先3000g离心2分钟后，弃掉大部分上清，只留约100μl左右，然后重悬细菌后全部涂盘在含Amp(对SuperTOPO-Amp)或Kan(对SuperTOPO-Kan)的培养皿上，37℃过夜培养。
7. 如果片段长度长于2Kb，则按常规转化方式，先冰浴2-30分钟，然后42℃热激30秒，冰上防放置2分钟，再在离心管中加入500μL不含抗菌素的SOC或LB培养基，37℃ 250rpm培养60分钟，然后取200μL涂盘。也可以先3000g离心2分钟后，弃掉大部分上清，只留约100μL左右，然后重悬细菌后全部涂盘在含Amp(对SuperTOPO-Amp)或Kan(对SuperTOPO-Kan)的培养皿上，37℃过夜培养。
8. 用菌落PCR、直接测序或其他方法鉴定重组子。
SuperTOPO-Kan TA克隆试剂盒厂家直销专业优质供应商：北京百奥莱博科技有限公司
关键词：SuperTOPO-Kan TA克隆试剂盒,SuperTOPO TA Cloning Kit ,BTN160686-25K
我公司是一家生物高新技术企业，主要从事免疫学、分子生物学和常规生化试剂的研发、销*(代"售")。并代理销*(代"售")Omega、Sigma、R&D、GBD、ATCC、HYCLONE等二十多家国外知名品牌，致力于为广大高校、科研院所和企事业单位提供一流的科研试剂和完善的技术服务，满足生物化学、分子生物学 、SuperTOPO-Kan TA克隆试剂盒、细胞生物学、免疫学 ELISA试剂盒等生物科技实验需求。
更多有关SuperTOPO-Kan TA克隆试剂盒厂家直销的价格及使用说明等，请联*(代"系")我们的业务经理王欣女士咨询，我公司还销*(代"售")以下产品：
| 编号 | 类别 | 名称 |
| BTN81212A | 蛋白质研究 | 一站式蛋白质非变性PAGE电泳套装(高pH) |
| BTN100938 | 核酸扩增(PCR) | 单细胞全基因组扩增试剂盒 |
| BTN111116B | 蛋白质研究 | 一站式GST标记蛋白质微量纯化套装(含溶菌酶和核酸酶) |
| BTN100885 | 克隆与表达 | X-gal干粉 |
| BTN120695 | 克隆与表达 | 新生霉素溶液 |
| BTN90603C | 探针标记及检测 | 随机引物法DNA探针地高*(代"辛")标记试剂盒 |
| BTN100214 | 蛋白质研究 | 预混型BCIP/NBT溶液 |
| BTN131196 | 工具酶 | Therminator II DNA聚合酶 |
| BTN140388 | 克隆与表达 | 酿酒酵母NMY51感受态细胞 |
| BTN60705 | DNA纯化 | 一管式植物DNA提取试剂盒 |
| BTN121112 | 克隆与表达 | 大肠杆菌Stbl3化学感受态细胞 |
| BTN80206 | 核酸扩增(PCR) | 两管式RT-PCR试剂盒(MMLV-Taq) |
| BTN3091 | RNA纯化 | 液相RNase清除剂 |
| BTN131191 | RNA纯化 | 96孔板病毒RNA提取试剂盒(真空法) |
| BTN90605B | 探针标记及检测 | TdT加尾法DNA生物素标记试剂盒 |
| BTN100923 | 基因结构和功能 | 甲基化专一性PCR试剂盒 |
| BTN90602G | 核酸电泳和回收 | DNA marker(pBR322/BstN I) |
| BTN80926 | DNA纯化 | 柱式真菌DNA大量提取试剂盒(玻璃珠法) |
| BTN120684 | 克隆与表达 | 噻孢霉素溶液 |
| BTN131022 | 蛋白质研究 | AP标记的链霉亲和素 |
| BTN100842 | 其他生化试剂 | EDTA溶液(0.5M,pH8.0)(DNA级) |
| BTN160901 | 克隆与表达 | 大肠杆菌DH10B电击感受态细胞 |
| BTN71203 | RNA纯化 | 植物RNA柱式提取试剂盒 |
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文献和实验PCR克隆主要有TA克隆法, 限制性酶切与连接法，杂交法和近期开发出来的特异性重组法等。但因为TA克隆法操作最简单，快速和高效的原因，成为Taq聚合酶PCR产物的最佳克隆方法。TA克隆法由Invitrogen发明，并拥有全球TA Cloning商标的专利权。TA克隆方法（Original TA Cloning Kit）利用Taq聚合酶同时具有的末端连接酶的功能，在每条PCR扩增产物的3`端自动添加一个3`-A突出端。Invitrogen公司TA克隆系统和Topo TA克隆系统都提供一个线性含
PCR 克隆 主要有TA克隆 法, 限制性酶切与连接法，杂交法和近期开发出来的特异性重组法等。 但因为TA克隆 法操作最简单，快速和高效的原因，成为Taq聚合酶PCR 产物的最佳克隆 方法。TA克隆 法由Invitrogen发明，并拥有全球TA Cloning商标的专利权。 TA克隆 方法（Original TA Cloning Kit
形DNA结构、Holliday结构等，故易出现假阳性；测序耗时长（1-3天），常常出现测序无信号等问题。 今年年初，Genloci通过植物基因工程表达产生高纯度的Cruiser™酶，它是一种具天然强活性的核酸内切酶，与CelⅠ同源。该酶能够高效特异地识别异源双链DNA的突变位点，并从突变位点的3’-端高效地切割异源双链DNA，不会出现假阳性。 今年6月，Genloci推出Cruiser™基因敲除检测试剂盒，该试剂盒可广泛应用于精确检测人、哺乳动物、细菌、真菌、病毒以及植物基因的敲除，尤其适用于ZFN
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