BTN71202型血液RNA柱式提取试剂盒价格

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名称：BTN71202型血液RNA柱式提取试剂盒价格
规格：50次
英文名：Blood RNA column Extraction Kit
品牌：百奥莱博
编号：BTN71202
本试剂盒是在血液RNA提取试剂盒(BTN3071)基础上开发的柱式升级产品，专门从动物全血样品中快速提取总RNA。

试剂盒特点：
1. 比BTN3071更加简单快捷，直接使用新鲜的或冷冻的抗凝全血样品，不需裂解红细胞等任何预处理步骤，整个提取过程只需要十分钟左右，可以全在室温下进行。
2.产量和纯度更高，OD260/280 均在2.0左右，产率一般为2-5μg/mL人血。
3. 每次微量提取的最大样品处理量可以达到1.5mL，高于进口的同类产品。
4.与常用的抗凝剂(包括肝素，EDTA，柠檬酸*，草酸*)兼容，得到的RNA可以直接用于RT-PCR和Northern杂交等研究。

试剂盒组成：

 

成分	50T
溶液A	50ml
溶液B	15ml
溶液C	50ml
离心吸附柱	50套
通用洗柱液	50ml
RNA洗脱液	10ml
说明书	1份

储存条件：常温运输，4℃保存，有效期一年。

使用方法：
1. 将0.2-1.5mL 新鲜或解冻后的抗凝全血加入到1.5mL塑料离心管中。
2. 12000～15000g室温离心3分钟，弃上清(血浆)。如果此时血液细胞沉淀体积大于0.2mL，则需要减少血液的使用量，具体减少量需根据具体情况决定，因为各个个体(尤其是患者)血液中白细胞数目差别很大。
3. 将1mL溶液A加入到血液细胞沉淀中，用移液枪吹打沉淀使细胞裂解。
4. 将0.3mL的溶液B加入到离心管中，剧烈震荡30秒。
5.和0.2mL *仿加入到离心管中，剧烈震荡30秒。
6. 12000～15000g室温离心3～5分钟，将上清液(为无色或浅红色，约0.5-0.9mL)转移到另一干净离心管中。注意：转移的液体不要超过0.7mL，否则下一步不能加入等体积的溶液C。为防止污染，最好留100μL左右的上清液。下层有机相一般呈深红色，中间层为白色，含有DNA，蛋白质和其他细胞破碎物，避免触及或吸取。
7. 加入等体积的溶液C，充分颠倒混匀。
8. 分两次将溶液转移到离心吸附柱中，每次转移后12000～15000g室温离心半分钟，弃穿透液。
9. 加0.7mL 通用洗柱液，室温离心半分钟，弃穿透液。
10. 如果有必要，可以再加0.3mL 通用洗柱液，室温离心半分钟，弃穿透液。注意：增加此步可以进一步提高RNA的纯度。
11.室温12000～15000g离心半分钟。此步十分重要，否则残留的通用洗柱液会影响RNA的后续反应。
12. 将离心吸附柱转移到一个RNase-free的收集管中，加入50-100μL RNA洗脱液，室温放置1-2分钟。
13. 12000～15000g室温离心半分钟，离心管中溶液即为RNA样品，可以立即使用或存放于-80℃待用。
14. RNA 完整性的电泳检测：如果需要做Northern杂交，强烈建议用户使用甲醛变性胶进行RNA电泳，因为非变性胶不能分离所有的RNA分子(BioTechniques，28：414，2000)。
15. RNA产量产率测定：将5-10μL RNA溶于TE缓冲液中(pH7.5-8.2 之间)检测其在OD260的光吸收。通过光吸收可以得出RNA浓度(1 OD260的RNA=40μg/mL)，进而计算出RNA的产量(浓度X体积)和产率(RNA产量/组织用量)。人血RNA产率一般为2-5μg/mL。
16. RNA 纯度测定：无污染的总RNA的OD260/OD280一般在2.0左右(具体数值与其碱基组成和溶液成分等多种因素有关)，高于此范围则分别表示样品可能有蛋白质污染，但一般不影响RT-PCR等反应。

疑难解答：
Q：如何去除RNA样品中的DNA污染？
A：可以使用百奥莱博的非酶DNA 清除剂DNA ERASOL-2。
Q：为何有的样品在第6 步离心后有很厚的中间层，上清很少。
A：这是因为蛋白质变性不充分，可以适当减少血液的用量。白细胞多的血液容易产生这种情况。
Q：离心吸附柱的RNA 最大吸附量是多少？
A：是40μg。


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·石蜡包埋组织DNA提取试剂盒
编号：BTN70502
英文名称：FFPE DNA extraction kit
规格：30次
本试剂盒是专门用于从甲醛和非甲醛固定的石蜡包埋组织中快提基因组DNA的试剂。石蜡包埋组织本是珍贵的分子生物学研究材料，但是由于它们的保存时间一般都比较长，很不容易从中提取到高质量的DNA，存在的主要问题是DNA的断裂和脱蜡过程中样品的丢失。

产品特点：
1.一管式操作，避免了可能的交叉污染和样品DNA的丢失。
2.含一步离心式脱蜡试剂，不需要使用有毒的二甲*，健康环保。
3. 得到的提取物可以直接用于PCR反应。
4. 得到的DNA的OD260/280一般在1.6左右，长度在0.4-25 Kb 之间，可以直接作为PCR 模板。
5. 即开即用，客户自己不需要准备额外的试剂。

试剂盒组成：

成分	规格
溶液A	30ml
溶液B	3ml
溶液C	5ml
说明书	1份

储存条件：常温运输及保存(溶液C需要-20℃保存)，有效期一年。

使用方法：
1. 将一片常规的石蜡包埋组织切片转移到1.5mL塑料离心管(最好使用螺旋盖离心管)中并加入1mL溶液A，在振荡器上以最大速度振荡10秒。
2. 加入75μl溶液B，在振荡器上以最大速度振荡10秒。
3. 7000g室温离心2分钟，溶液将形成两个相，其中组织切片位于下相。
4.小心吸弃上层液体。
5. 将离心管放入真空离心机中，7000g离心，抽干下层的液体，一般需要一小时。
6. 加入150μL溶液C，55℃保温过夜。
7. 7000g 短暂离心，95℃保温10分钟。
8. 7000g室温离心5分钟，转移上清到新的离心管中待用。
9. PCR 检测时，一般在50μl PCR体系中加入1-5μL的模板DNA。
 注意:很多时候样品中会有未明的PCR 抑制物，多加模板反而会抑制PCR反应。加入百奥莱博的PCR抑制物清除剂(BTN60804)可能会有帮助。


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