cl857 Sam7 λDNA(非甲基化)北京厂家现货

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名称：cl857 Sam7 λDNA(非甲基化)北京厂家现货
编号：BTN90407C
英文名：Lambda DNA
产地：国产|进口
本产品Lambda DNA(λDNA)为λ噬菌体中的DNA，是一种常见的DNA底物，分子量为31.5×106Da/48502bp，浓度为200～500μg/ml。A型为普通Lambda DNA。B型为不含N6-甲基腺嘌呤Lambda DNA。C型为非甲基化的cl857 Sam7 λDNA，是从感染的大肠杆菌GM119菌株中分离得到的。该菌株缺乏dam及dcm甲基化酶活性。非甲基化的λDNA以作为对DNA甲基化敏感的限制性酶的底物。

储存溶液：Tris-HCl(pH8.0)10mM；EDTA 1mM

储存条件：低温运输、-20℃保存、有效期一年。

纯度：
1. OD260nm/280nm＞1.8。
2. 琼脂糖凝胶电泳出现清晰单一条带。
3. 1μg的λDNA在Hind III酶切Buffer中37℃保温16小时后，琼脂糖凝胶电泳时出现清晰单一条带。
4. 1g的λDNA 用Hind III酶切(37℃，2小时)后，在琼脂糖凝胶电泳时出现8条清晰的DNA电泳带。

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·大肠杆菌BL21 Star(DE3)化学感受态细胞
编号：BTN150801
英文名称：E.coli BL21 Star(DE3) Chemical Competent Cell
规格：10*100μL
 BL21 Star(DE3)感受态细胞来源于BL21(DE3)菌株，由特殊工艺制作，使用pUC19质粒检测本产品，转化效率可达10⁷cfu/μg。
 BL21 Star(DE3)菌株的特点是含有rne131基因突变体。rne131突变基因能够增强菌株细胞内mRNA的稳定性，从而有效提高蛋白表达能力。本产品主要适用于T7启动子表达载体(如pET 系列)的高水平蛋白表达。
 菌株基因型为：F-ompT hsdSB(rB-mB-)gal dcm rne131(DE3)。

储存条件：干冰运输、-80℃保存，有效期半年。

自备试剂：目的DNA、LB培养基等。

使用方法：
1.从-80℃冰箱中取出感受态细胞，置于冰上解冻。一次转化感受态细胞的建议用量为50-100μL，可以根据实际情况分装使用。以下实验以100μL感受态细胞为例。
2. 取 100μL冰上融化的BL21 Star(DE3)感受态细胞，加入目的质粒并轻轻混匀，冰上静置25分钟。
3. 42℃水浴热激45秒，迅速放回冰上并静置2分钟，晃动会降低转化效率。
4. 向离心管中加入700μL不含抗生素的无菌培养基(LB)，混匀后37℃，200rpm 复苏60分钟。
5. 取100μL左右菌液涂布于含相应抗生素的LB培养基上。如果转化高浓度的质粒，可以减少涂布的量。
6. 将平板倒置放于37℃培养箱过夜培养。

·Bouin固定液
编号：BTN130819
英文名称：Bouin Fixative Solution
规格：250mL
Bouin氏液是组织化学中最常用的混合型固定液之一，由苦味*(代"酸")饱和液(1.22%)、甲醛和冰醋酸按15:5:1的比例混合而成。此固定液对大多数组织固定效果良好。

产品特点：
1．其渗透能力强，固定均匀，组织收缩小，染色效果好。
2．适用范围广，特别适合于富含结缔组织的标本和胚胎标本。能够软化皮肤角质，并可以用于植物组织的固定。
3．因为本产品含有苦味*(代"酸")，会溶解火棉胶，所以如果用于火棉胶包埋，必须进行洗脱苦味*(代"酸")处理。
4．标本尺寸不可太大，一般窄边不大于5mm。

储存条件：常温运输及保存，保存期为一年。

使用方法：
1．标本修块，厚度一般不超过5mm，置入本产品内固定8～24h(根据样品材料、大小不同，固定时间可能会有较大差异)。
2．固定后用70%～80%乙醇洗涤。


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·10nt随机引物(0.5μg/uL)
编号：BTN131227
英文名称：Octomer
规格：250
本产品为长度为10nt的随机引物，序列为5´-(NNNNNNNNNN)-3´，主要用于cDNA的合成和DNA探针标计。

储存条件：低温运输和-20℃保存，有效期一年。

疑难解答：
Q: 随机引物的长度对cDNA合成有何影响？
A: 文献报道，长度为10个nt的随机引物合成cDNA的效果好于6nt长的随机引物。

·包涵体蛋白溶解及复性套装
编号：BTN100302
英文名称：Inclusion Body Protein Solubilization & Refolding Pack
规格：100次
本产品用E.coli作为宿主表达得到的重组蛋白往往会形成包涵体，其中的重组蛋白质只完成部分折叠，还没形成最后的正确空间结构，所以没有生物活性，要得到有活性的重组蛋白，还需要后续的溶解和复性(重折叠)处理。目前最常用的溶解包涵体的方法是用尿素，Sarkosyl，盐*(代"酸")胍等强变性剂，其缺点是包涵体中的重组蛋白质被彻底变性，使后续的蛋白质复性处理效率降低。本产品根据包涵体中的重组蛋白质已经完成了部分折叠这一实事设计。

产品特点：
1.一站式，提供包涵体洗涤、溶解和蛋白质复性的所有试剂。
2. 采用温和法溶解包涵体，释放的包涵体蛋白质不彻底变性，还能保持其部分折叠的结构，使后续的复性处理效率提高。
3. 所用复性液基于稀释复性，经过精心优化，有利于大部分蛋白的复性。
4.还提供五种不同的添加剂，它们可以单独加入复性液，也可以按一定比例进行自由组合，以适应不同的蛋白质折叠需求。
5. 本试剂盒提供实惠的小规格，用于做预实验用，用户如果选择到合适的溶液组合后，可以单独购买其中的溶液以用于大量制备。
6. 本试剂盒足够100次小规模(1mL规模)的蛋白质复性实验。

试剂盒组成：

 

成分	规格
包涵体洗涤液	250mL
包涵体温和溶解液(10种各一套)	10×10ml
包涵体蛋白质复性液	250ml
说明书	1份

储存条件：常温运输和保存，有效期一年。

自备试剂：去离子水、BCA蛋白浓度测定试剂盒、0.22μm注射器式滤膜。

使用方法：

一、洗涤包涵体
 说明：用常规方法得到的包涵体常常含有去污剂和细胞碎片，因此需要经过充分的洗涤才能用于本实验。
1．将10mg包涵体沉淀溶解在5mL包涵体洗涤液中，超声波处理8次或充分吹打混匀。可以适当留取10-30μL作为SDS-PAGE电泳样品待用。
2．4℃ 12000rpm离心20分钟后弃上清。
3．重复上面的洗涤步骤3次，每次留取10-30μL作为SDS-PAGE电泳样品待用。
4．将包涵体沉淀溶解在1mL包涵体洗涤液中，超声波处理8次或充分吹打混匀。
5．检查包涵体的纯度：将上步得到的包涵体溶液和前几步得到的预留样品一起用于SDS-PAGE电泳，检查每次洗涤去除杂带的情况。
6．检查包涵体的浓度：用自备的BCA蛋白检测试剂盒测试第4步得到的包涵体溶液的蛋白质浓度。
7．将第4步得到的包涵体溶液的蛋白质浓度调到5-10mg/mL(如果低于此范围，则离心后用适量的洗涤液再溶解；如果高于此范围，则用洗涤液稀释)，然后均分到10个1.5mL塑料离心管中，每管100μl。
8．4℃ 12000rpm离心20分钟后弃上清。
9．所得沉淀即纯化的待用的包涵体。

二、确定溶解包涵体的最佳条件
1．标记上步得到的10个离心管，并分别加入10种包涵体温和溶解液，每种1mL。注意：准确记录它们的对应关系。
2．充分振荡后，室温放置30分钟。
3．450nm检测浑浊度并记录下数据。
4．4℃ 12000rpm离心10分钟后收集上清，此即包涵体溶解液。
5．用0.22μm注射器式滤膜过滤包涵体溶解液。
6．280nm检测包涵体溶解液的光吸收。
7．溶解液溶解包涵体能力跟包涵体溶液浊度跟成反比，跟包涵体溶解液中OD280数值成正比。根据上面的数据即可确定哪种溶解液对实验中所用包涵体具有最佳溶解能力，并将在此溶解液中溶解的包涵体溶解液用于下面的复性实验。大量处理需要从本公司单独大量订购包涵体温和型溶解液10种中的1种。

三、包涵体蛋白的复性
1．在2.5mL 4℃预冷的、处于轻柔搅拌中的复性缓冲液中，逐滴加入上步得到的包涵体溶解液。
2．待所有包涵体溶解液都加完后，将包涵体蛋白复性溶液用孔径为0.22μm注射器式滤膜过滤，除去包涵体(直径一般在0.5-0.8μm)和大的聚合物。
3．将得到的溶液用于活性检测或离子交换柱层析和分子筛层析。


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BL0840 羊抗人C3纯化抗体
N-三(羟甲基)甲基-2-*基乙磺酸 PBS(Phosphate buffer saline)  powdered 7365-44-8
BL0940 生物素化人IgG抗体
CYB167070 兔抗HRP
F030812 BIOTIN标记山羊抗兔IgG抗体 Goat Anti-Rabbit IgG*BIOTIN
N96 植物基因组DNA提取试剂盒 
ARB10564 人过氧化物酶体增殖因子活化受体γ(PPAR-γ)elisa测定使用说明书 Human peroxisome prolifeRator-activated receptor γ,ppar-γ ELISA KIT
PY02-352  假单胞菌琼脂基础培养/CN琼脂基础  250克  
苏丹Ⅲ酒精饱和溶液   100ml
BL1213 0.1%吕氏碱性美蓝染色液
ARB14006 鹿红细胞膜蛋白(EMP)Elisa分析 Deer erythrocyte membrane protein,emp ELISA KIT
ARB13897 猪血小板活化因子(PAF)定量分析 Porcine platelet activating factor,paf ELISA KIT
F030104 HRP标记小鼠抗HIS标签抗体 Monoclonal Mouse Anti-His*HRP
*甲*(代"酸")酐 Thymol Blue sodiu*(代"m") salt 93-97-0
BL0898 FITC标记羊抗人纤维蛋白原抗体
ARB12101 大鼠甘丙肽/甘丙素(GAL)酶标法分析 Rat galanin,gal ELISA KIT
BL0482 NP-40 LYSIS BUFFER 裂解液
ARB11304 人促分裂素原活化蛋白激酶激活的蛋白激酶3(MAPKAPK3)Elisa定量检测 Human mitogen-activated protein kinase-activated protein kinase 3,mapkapk3 ELISA KIT
改良Krebs-Henseleit溶液(不含*)   500ml
86-74-*(代"8") Carbazole 咔唑
CYB161066 人纤维蛋白原(冻干粉)

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