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-20℃
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长期
- 英文名:
N-Flag plasmid(with CMV promoter)
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728
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
北京百奥莱博专业生产供应N端Flag标签融合蛋白质粒哪里卖,我公司销*(代"售")全品类的分子生物学试剂,价格优惠,欢迎广大科研工作者垂询订购。
名称:N端Flag标签融合蛋白质粒哪里卖
品牌:百奥莱博
英文名:N-Flag plasmid(with CMV promoter)
产地:国产|进口
编号:YT479
本质粒是用于在哺乳动物细胞中表达N端和Flag tag(Flag标签)融合的目的蛋白的表达质粒。含有CMV启动子可以高效启动目的蛋白在细胞中的表达;在多克隆位点的5"端含有一个可以编码Flag标签的序列,因此可以表达出含有Flag标签的融合蛋白,可以方便地使用抗Flag的抗体来识别目的蛋白,有利于目的蛋白检测和分离纯化。质粒为卡那霉素抗性。转染细胞后,可使用G418筛选稳定表达目的蛋白的细胞株。
本质粒质粒的主要信息如下:
| Feature Nucleotide | Position |
| CMV promoter | 1-602 |
| T3 promoter and T3 primer binding site | 620-639 |
| Flag tag | 679-702 |
| multiple cloning site | 705-778 |
| T7 promoter and T7 primer binding site | 821-842 |
| SV40 polyA signal | 854-1237 |
| f1 origin of ss-DNA replication | 1375-1681 |
| bla promoter | 1706-1830 |
| SV40 promoter | 1850-2188 |
| neomycin/kanamycin resistance ORF | 2223-3014 |
| HSV-thymidine kinase(TK)polyA signal | 3015-3473 |
| pUC origin | 3602-4269 |
本质粒的图谱如下:
使用说明:
1. 首次使用时请先取少量本质粒转化大肠杆菌,进行质粒小量、中量或大量抽提后再用于后续用途。抽提获得的质粒可以通过酶切电泳进行鉴定,或通过测序进行鉴定。
2. 本质粒在其多克隆位点适当酶切后可以插入待表达的目的基因,需注意插入基因片段和tag之间的读码框要一致,即需要避免发生移码突变。构建的质粒可以用常规方法转染细胞。
储存条件:-20℃。
我公司的N端Flag标签融合蛋白质粒哪里卖,性价比高,货期短,送货上门,欢迎您来电咨询购买,另外,我公司还生产供应销*(代"售")下列产品:
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N端Flag标签融合蛋白质粒哪里卖关键词:N-Flag plasmid(with CMV promoter),N端Flag标签融合蛋白质粒,YT479
·NF-κB激活-核转运检测试剂盒
编号:YT363
英文名称:NF-κB Activation,Nuclear Translocation Assay Kit
规格:>50次
本试剂盒是通过免疫荧光染色检测NF-κB的主要亚基p65是否转运到细胞核内从而确认NF-κB是否被激活的检测试剂盒。本试剂盒中的NF-κB p65抗体可以识别人、小鼠或大鼠的NF-κB p65亚基,因此本试剂盒可以检测人、小鼠或大鼠细胞或组织中的NF-κB核转运激活。本NF-κB激活-核转运检测试剂盒仅染色p65,不染色RelB、C-Rel、p50和p52。使用本试剂盒染色后NF-κB呈红色荧光,细胞核呈蓝色荧光。如果检测组织切片或6孔板内的细胞样品,至少可以检测50个样品,如果检测96孔板内的样品,至少可以检测250-500个样品。
试剂盒组分:
固定液————————————50ml
洗涤液————————————250ml ×2
免疫荧光染色封闭液——————50ml
NF-κB p65抗体————————6ml
抗兔Cy3————————————6ml
细胞核染色液(DAPI)——————50ml
抗荧光淬灭封片液———————10ml
本试剂盒提供了固定液、洗涤液、封闭液、一抗、荧光标记二抗、细胞核荧光染色液、封片液,使用时不必再配制其它任何溶液。提供了细胞核荧光染色液,可以把细胞核染成蓝色荧光,这样可以清楚地判断NF-κB是否被转运到细胞核内而被激活。
NF-κB是一种常见的转录因子,可以被炎症因子、生长因子或趋化因子等激活。常见的炎症因子(包括Interleukin-1和TNF-α等)都可以激活NF-κB。NF-κB由两类亚基形成同源或异源二聚体。一类亚基包括p65(也称RelA)、RelB和C-Rel;另一类亚基包括p50和p52。最常见的NF-κB亚基组成形式为p65/p50或p65/p65。
NF-κB未被激活时和IκB-α形成一个复合物,分布在细胞浆中。在炎症因子、生长因子或趋化因子等可以激活NF-κB的刺激存在的情况下,IκB-α会在Ser32和Ser36被磷酸化,随后被泛素-蛋白酶体途径降解。NF-κB和IκB-α解聚后,其核定位序列被暴露,从而被转运到细胞核内促进NF-κB依赖的基因转录。通过免疫染色检测NF-κB的主要亚基p65是否被转移到细胞核内,就可以判断NF-κB是否被激活。
注意事项:
1. 免疫荧光染色时,请注意回收使用过的NF-κB p65抗体和抗兔Cy3。回收后至少可以重复使用10次。
2. 需使用可以观察红色荧光和蓝色荧光的荧光显微镜。
储存条件:4℃,有效期6个月。
N端Flag标签融合蛋白质粒哪里卖关键词:N-Flag plasmid(with CMV promoter),N端Flag标签融合蛋白质粒,YT479
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F030410 胶体金标记山羊抗小鼠IgM抗体 Goat Anti-Mouse IgM*GOLD
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文献和实验出来,可能两个原因,第一个是抗体不好,第二个可能是质粒没做好,发生移码了,因为你用的是pEGFP-N2载体,gfp是在n端,就算发生了移码一样可以检测到绿色萤光,仔细检查下你做的质粒看看是否正确。 liuruya 谢谢大家的回复 1.WB应该是没有技术问题,用的是GFP或flag的标签抗体,而且设置了之前做过的基因做阳性对照 2.GFP质粒测序过是完整的且没有移码,flag的是自己构建的也反复check过没有问题 觉得很妖怪 问了当时给我质粒
也可以,这样用一个启动子CMV同时表达两个蛋白,而不是融合蛋白。 liuyicheng84427 VEGF应该加在GFP的N端还是C端? lmnsmu VEGF加在GFP的N端或C端均可以,而且有一些载体如pEGFP-N1或pEGFP-C1在N端或C端已经有GFP的序列,只需将你的目的基因序列插入到MCS区即可融合表达。 naj2007 多谢大家! hiqihong
的功能、分泌性以及转运发生改变。由于它的亲水性特点,FLAG标签倾向于定位在融合蛋白表面,因此更易与抗体结合以及被肠激酶酶解。 由于Flag标签可位于蛋白质的C端或N端,这一系统已用于各种细胞类型,包括细菌、酵母和哺乳细胞。由于Flag标签系统的纯化条件是非变性的,因此可以纯化所有有活性的融合蛋白。EarthOx的Anti-Flag Tag Monoclonal Antibody (货号#E022060 )可以用于检测和Flag标签融合表达蛋白的表达、细胞内定位,以及纯化、定性或定量检测Flag
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