北京现货动物RNA提取试剂(TRIzol)批发

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百奥莱博专业生产销*(代"售")北京现货动物RNA提取试剂(TRIzol)批发，我公司供应的分子生物学试剂品类齐全，且具有优势价格，欢迎新老客户垂询订购。

名称：北京现货动物RNA提取试剂(TRIzol)批发
英文名：Animal RNA Extraction Reagent TRIzol
品牌：百奥莱博
规格：100mL
编号：BTN3070
本试剂盒是类似于TRIzol、基于异硫*酸胍/酚/*仿提取原理的快速总RNA提取试剂，可用于从各种动物组织(包括白细胞)和部分植物材料中快速提取总RNA。

产品特点：
1. 操作简单快速，只要10分钟左右，可以全在室温下进行。
2. RNA 质量高，OD260/OD280一般在1.9左右。一般不含用RT-PCR可以检测到的基因组DNA污染。
3.适用于大部分实验材料，如培养细胞、各种动物材料和少数植物材料。植物RNA的提取最好使用植物RNA提取试剂盒。
4. 性价比高于进口TRIzol和TRI Reagent等同类产品。

储存条件：常温运输，4℃保存，有效期一年。

使用方法：
注意：下面的操作步骤是用1mL 本产品进行的微量提取的，细胞使用量一定要准确，不能超过下述用量，否则将超出本产品的裂解能力，RNA产量将急剧降低。如果样品量大，请按比例增加各成份的用量。RNA 工作环境最好用高效无毒的固相RNase清除剂(BTN3080)彻底处理。
1. 对贴壁细胞(10 平方厘米)：吸尽培养液，加入1mL的本产品用枪充分吹打确保细胞全部裂解，然后将裂解液转移至干净的1.5mL塑料离心管中，进入第6 步。
2. 对悬浮细胞(五百万至一千万个)：离心收集细胞，吸尽液体，加入1mL本产品，用枪充分吹打确保细胞全部裂解，然后将裂解液转移到干净的1.5mL塑料离心管中，进入第6 步。
3. 对新鲜组织(50-100mg)：将新鲜组织剪切成小块，放入10mL或15mL塑料离心管中，加入1mL的本产品，用Polytron 剪切式匀浆器冰上匀浆30秒左右，将匀浆液转移至新的1.5mL塑料离心管中，进入第6步。注意：对肝、脾、胰、肾等细胞分裂十分旺盛的组织(细胞中含大量正在复制的DNA)，使用量不要超过30-50mg，否则十分容易产生DNA污染。对10mg以下的组织，最好加入本公司的微量RNA 助沉剂。
4. 对RNAhold 保存的组织(50-100mg)：先用纸吸去RNAhold液体后再剪切成小块，其余操作同第3 步。RNAhold处理后的组织韧性很强，匀浆时间需要适当延长。
5. 对液氮中保存的组织(50-100mg)：在研钵中研磨成粉，加入1mL 本产品，用枪充分吹打确保细胞全部裂解，然后将裂解液转移到干净的1.5mL塑料离心管中，进入第6 步。
6.在装有裂解物/匀浆物的1.5mL塑料离心管中加入0.2mL自备*仿，振荡器上充分振荡混均30秒。注意：一定要把官底的溶液震荡起来，否则只是液面的振动。
7. 13000-15000g室温离心3分钟。
8. 将上清液(约0.6mL)转移到另一干净的1.5mL塑料离心管中。下层有机相(蓝色)和中间层含有DNA和蛋白质，避免触及，否则将产生蛋白质和DNA污染。为保险起见，可以留下50-100μl上清液不取。
9. 对脂类丰富的组织(如脂肪组织和脑组织)，需再重复*仿抽提一到两次以让*仿充分去除脂类分子。
10.在上清液中加入等体积的异丙醇，振荡器上振荡30秒混匀。
11. 13000-15000g室温离心5分钟，离心底的侧面将形成RNA沉淀。如果组织使用量低于10mg或需要提高RNA 回收率，可以将离心时间延长到20或30分钟。
12.小心吸弃上清液，注意不要吸弃RNA沉淀。
13.在含RNA沉淀的离心管中加入1mL 75%乙醇，振荡混匀30秒。
14. 13000-15000g室温离心1分钟。
15.小心吸弃上清液，注意不要吸弃RNA沉淀。
16. 重复第13-15的洗涤步骤一次(也可以省略)。
17. 短暂快速离心，用移液枪小心吸弃残留乙醇(约50μL)。注意不要吸弃RNA
沉淀。此步十分重要，否则残留的乙醇会影响RNA的后续使用。
18.室温放1-2分钟后立即加入50-100μl RNase-free 水使RNA沉淀溶解。
千万不要用真空离心法使RNA沉淀过于干燥，否则RNA 将变得十分难溶。RNA样品可以立即使用或存放于-80℃待用。
注意：由于RNase-free 水没有主动灭活残留RNase的功能，而任何方法提取的RNA 都可能有残留的RNase，所以强烈建议客户使用本公司推出的具有主动灭活残留RNase 功能的、同时跟后续RT-PCR等反应兼容的液相RNase 清除剂(BTN3091)。

附一：RNA 完整性的电泳检测(仅供参考，本产品不含相关试剂)
如果需要做Northern杂交，强烈建议用户使用甲醛变性胶进行RNA电泳，因为非变性胶不能分离所有的RNA分子(BioTechniques，28：414，2000)。如果是简单检测，可以使用TAE缓冲液或超快核酸电泳液进行常规电泳，但文献报道必须使用RNAload这样的变性上样液(BioTechniques，9：558，1990)。普通DNA上样液不含变性剂，也没经过去RNase处理，所以最好不要使用，否则RNA容易降解。
动物RNA电泳后应该在UV下呈现三条清晰的rRNA 带，28S rRNA条带的荧光强度一般比18S rRNA 条带的荧光强度强1.5-2.3倍。如果这两条rRNA 带不清晰或比例小于此范围则表示RNA 有降解(因为大的RNA 被酶降解的可能更大)。
跟动物一样，植物果实和种子的RNA一般有三条电泳带，但植物叶片的RNA 有四条或更多rRNA带，多余的RNA 来源于叶绿体。
如果电泳发现RNA样品中有DNA污染(一般是使用过多样品造成)，可分别用非酶DNA 清除剂或RNase-free DNase 清除。

附二：RNA产量和纯度测定(仅供参考，本产品不含相关试剂)
用pH在7.5-8.2的TE缓冲液将5-10μL RNA稀释10-20倍后在OD260和OD260测光吸收，通过光吸收可以得出RNA浓度(1 OD260的RNA=40μg/mL)，进而计算出RNA的产量(浓度×体积)和产率(RNA产量/组织用量)。RNA的产率还随组织的营养状态和组织的种类不同而不同，一般来说，代谢旺盛的组织(如肝脏和肾脏)RNA的产率高，代谢不旺盛的组织(如肌肉和脂肪组织)RNA的产率低，下面是常见动物组织的RNA产率:
肌肉，胎盘和脑组织: 1-2μg RNA/mg 组织
肝，胰和肾组织: 5-10μg RNA/mg 组织
培养细胞: 5-15μg/10E6细胞
RNA的纯度通过OD260/OD280 来确定，一般在1.8-2.1之间即算合格。但即使低于此范围，一般也不会影响RT-PCR等反应。
蛋白质污染可以通过酚/*仿抽提一次然后酒精沉淀去除，多糖污染可以用多糖清除剂去除。

北京现货动物RNA提取试剂(TRIzol)批发极具性价比，此外，我公司正火爆促销以下产品：

·柱式酵母质粒DNA提取试剂盒
编号：BTN70202
英文名称：Yeast plasmid DNA column extraction kit
规格：50次
本试剂盒是专门用于提取酵母质粒DNA的产品(不适用于酵母dsRNA质粒)。本产品根据酵母细胞壁十分坚硬的特点，在细菌质粒碱裂解法的基础上，增加了高效裂解酵母细胞壁的预处理步骤，可在1小时左右得到可以用于PCR或转化酵母质粒DNA。

试剂盒特点：
1.快速，整个过程只需要一个小时左右，可同时处理多个样品。
2. 得到的酵母质粒DNA 纯度高，可直接用于转化和PCR等实验。
3.可以从平板上的菌斑或液体培养的酵母中抽提质粒DNA。
4. 安全，不需使用玻璃珠、酚、*仿等试剂。
5. 每5-10mL 酵母培养液一般可以提取到1μg左右的高拷贝酵母质粒DNA。
6. 即开即用，经济实惠，客户自己不需要准备额外的试剂。

试剂盒组成：

 

成分	规格
溶液A	30ml
溶液B	13ml
溶液C	13ml
溶液D	18ml
破壁酶	50mg
RNase A溶液10mg/mL)	0.15ml
离心吸附柱	50套
通用洗柱液	50ml
DNA洗脱液2.0	10ml
说明书	1份

储存条件：常温运输及保存(RNase A溶液4℃保存)，有效期一年。

使用方法：
1. 将5-10mL 酵母过夜液体培养物分多次转移到1.5mL塑料离心管中。每转移一次后，需要12000～15000×g室温离心1分钟，然后吸弃液体培养基。注意：不要使用培养时间超过16小时的酵母液体培养物，否则质粒DNA产量偏低；也不要使用超过10mL的酵母液体培养物，否则破壁不充分，降低质粒DNA产量。
2. 加入1mL自备的无菌水，充分震荡混匀，12000～15000×g室温离心1分钟，吸弃上清。
3. 加入600μl溶液A，充分震荡细胞沉淀重悬，95℃保温10分钟。
4. 12000～15000×g室温离心1分钟，弃上清液。
5. 加入250μl含破壁酶的溶液B(配制方法是将本试剂盒提供的50mg 粉末状的破壁酶和0.15mL RNase A溶液全部加入到装有13mL溶液B的塑料瓶中，轻柔摇晃混匀后使用。未用完的部分需要分装成小份然后放-20℃保存，否则破壁酶很容易失去活性)，吹打混匀。
6. 37℃保温30分钟，延长保温时间到60分钟有利于细胞壁的裂解。注意：放置较长时间后，溶液B中的裂壁酶会逐渐失活，额外再加入一些裂壁酶(如蜗牛酶、Lyticase、Zymolyase、Lywallzyme等，总浓度为1mg/mL)可以极大提高产量。
7. 将离心管放冰浴冷却后，加入250μl溶液C，轻轻颠倒混匀直至裂解液变得澄清，然后室温放置5-10分钟。注意：不要剧烈震荡，否则基因组DNA 将断裂并污染质粒DNA。
8. 加入350μl溶液D，轻轻颠倒混匀几次，管内将出现白色沉淀物，然后冰浴放置10-30分钟(如果质粒较长，最好放置30分钟)。
9. 12000～15000×g室温离心6-10分钟，将上清液转移到离心吸附柱中。
 注意：不要将漂浮在液面的沉淀物(如果有的话)转移到离心吸附柱中。上清液可以分多次转移。
10.室温下放置至少2分钟以让质粒DNA 充分结合到离心吸附柱上。
11.12000～15000×g室温离心1分钟，弃穿透液。
12. 将500μl 通用洗柱液加入离心吸附柱中，12000～15000×g室温离心1分钟，弃穿透液。
13. 重复上步操作一次。
14.12000～15000×g室温离心1分钟去除离心吸附柱中残留液体。不要此步省略，否则残留洗液将影响后续的电泳、PCR和转化实验。
15. 将离心吸附柱套在一干净的1.5mL塑料离心管中，加入30-100μl DNA 洗脱液2.0(加入的量取决于预期的DNA浓度)至离心吸附柱的膜的中央。
16.室温下放置至少2分钟。
17.12000～15000×g室温离心1分钟以洗脱DNA。
18. 如有必要，可以再加入适量DNA 洗脱液2.0洗出残留的DNA。第二次洗脱得到的DNA的产量约为第一次的30-50%。不要将已经洗脱的、含DNA的溶液再加上去。


北京现货动物RNA提取试剂(TRIzol)批发关键词：Animal RNA Extraction Reagent TRIzol,动物RNA提取试剂(TRIzol),BTN3070

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