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- 详细信息
- 技术资料
- 库存:
大量
- 保质期:
一年
- 保存条件:
4℃保存
- 规格:
100ml
本产品是类似于 TRIzol、基于异硫酸胍/酚/氯仿提取原理的快速总RNA 提取试剂,可用于从各种动物组织(包括白细胞)和部分植物材料中快速提取总 RNA。
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| 成 份 | 编 号 | 玻璃瓶包装 | |||
| 动物 RNAout | 3070a | 100 mL | |||
| 使用手册 | 3070sc | 1 份 | |||
| 常温运输,4℃保存,有效期一年。 | |||||
注意:下面的操作步骤是用 1 mL 本产品进行的微量提取的,细胞使用量一定要准确,不能超过下述用量,否则将超出本产品的裂解能力,RNA 产量将急剧降低。如果样品量大,请按比例增加各成份的用量。RNA 工作环境最好用高效无毒的固相 RNase 清除剂(CAT#:3080)彻底处理。
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- 对液氮中保存的组织(50-100 mg):在研钵中研磨成粉,加入 1 mL 本产品,用枪充分吹打确保细胞全部裂解,然后将裂解液转移到干净的 1.5 mL 塑料离心管中,进入第 6 步。
- 在装有裂解物/匀浆物的 1.5 mL 塑料离心管中加入 0.2 mL 自备氯仿, 振荡器上充分振荡混均 30 秒。注意:一定要把官底的溶液震荡起来,否则只是液面的振动。
- 将上清液(约 0.6 mL)转移到另一干净的 1.5 mL 塑料离心管中。下层有机相(蓝色)和中间层含有 DNA 和蛋白质,避免触及,否则将产生蛋白质和 DNA 污染。为保险起见,可以留下 50-100 uL 上清液不取。
- 对脂类丰富的组织(如脂肪组织和脑组织),需再重复氯仿抽提一到两次以让氯仿充分去除脂类分子。
- 13000-15000 g 室温离心 5 分钟,离心底的侧面将形成 RNA 沉淀。如果组织使用量低于 10 mg 或需要提高 RNA 回收率,可以将离心时间延长到 20 或 30 分钟。
- 小心吸弃上清液,注意不要吸弃 RNA 沉淀。
- 在含 RNA 沉淀的离心管中加入 1mL 75%乙醇,振荡混匀 30 秒。14. 13000-15000 g 室温离心 1 分钟。
- 小心吸弃上清液,注意不要吸弃 RNA 沉淀。
- 重复第 13-15 的洗涤步骤一次(也可以省略)。
- 短暂快速离心,用移液枪小心吸弃残留乙醇(约50 uL)。注意不要吸弃RNA 沉淀。此步十分重要,否则残留的乙醇会影响 RNA 的后续使用。
- 室温放1-2 分钟后立即加入50-100 uL RNase-free 水使RNA 沉淀溶解。千万不要用真空离心法使 RNA 沉淀过于干燥,否则 RNA 将变得十分难溶。RNA 样品可以立即使用或存放于-80℃待用。
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动物RNAout(TRIzol)
¥390




