- ¥390
- 钦诚生物
- QC-3070
- 上海
- 2025年07月10日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
大量
- 保质期：
一年
- 保存条件：
4℃保存
- 规格：
100ml
本产品是类似于 TRIzol、基于异硫酸胍/酚/氯仿提取原理的快速总RNA 提取试剂，可用于从各种动物组织（包括白细胞）和部分植物材料中快速提取总 RNA。
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| 成 份 | 编 号 | 玻璃瓶包装 | |||
| 动物 RNAout | 3070a | 100 mL | |||
| 使用手册 | 3070sc | 1 份 | |||
| 常温运输，4℃保存，有效期一年。 | |||||
注意：下面的操作步骤是用 1 mL 本产品进行的微量提取的，细胞使用量一定要准确，不能超过下述用量，否则将超出本产品的裂解能力，RNA 产量将急剧降低。如果样品量大，请按比例增加各成份的用量。RNA 工作环境最好用高效无毒的固相 RNase 清除剂（CAT#：3080）彻底处理。
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- 对液氮中保存的组织（50-100 mg）：在研钵中研磨成粉，加入 1 mL 本产品，用枪充分吹打确保细胞全部裂解，然后将裂解液转移到干净的 1.5 mL 塑料离心管中，进入第 6 步。
- 在装有裂解物/匀浆物的 1.5 mL 塑料离心管中加入 0.2 mL 自备氯仿， 振荡器上充分振荡混均 30 秒。注意：一定要把官底的溶液震荡起来，否则只是液面的振动。
- 将上清液（约 0.6 mL）转移到另一干净的 1.5 mL 塑料离心管中。下层有机相（蓝色）和中间层含有 DNA 和蛋白质，避免触及，否则将产生蛋白质和 DNA 污染。为保险起见，可以留下 50-100 uL 上清液不取。
- 对脂类丰富的组织（如脂肪组织和脑组织），需再重复氯仿抽提一到两次以让氯仿充分去除脂类分子。
- 13000-15000 g 室温离心 5 分钟，离心底的侧面将形成 RNA 沉淀。如果组织使用量低于 10 mg 或需要提高 RNA 回收率，可以将离心时间延长到 20 或 30 分钟。
- 小心吸弃上清液，注意不要吸弃 RNA 沉淀。
- 在含 RNA 沉淀的离心管中加入 1mL 75%乙醇，振荡混匀 30 秒。14. 13000-15000 g 室温离心 1 分钟。
- 小心吸弃上清液，注意不要吸弃 RNA 沉淀。
- 重复第 13-15 的洗涤步骤一次（也可以省略）。
- 短暂快速离心，用移液枪小心吸弃残留乙醇(约50 uL)。注意不要吸弃RNA 沉淀。此步十分重要，否则残留的乙醇会影响 RNA 的后续使用。
- 室温放1-2 分钟后立即加入50-100 uL RNase-free 水使RNA 沉淀溶解。千万不要用真空离心法使 RNA 沉淀过于干燥，否则 RNA 将变得十分难溶。RNA 样品可以立即使用或存放于-80℃待用。
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文献和实验【求助】有人用invitrogen的trizol 提取哺乳动物组织蛋白吗？效果如何？
iiyuan 有人用invitrogen的trizol 提取哺乳动物组织蛋白吗？效果如何？ O(∩_∩)O谢谢 回复 wangke80 这个问题我刚好前段时间检索过，你可以参见两个丁香园的帖子： 1：http://www.dxy.cn/bbs/thread/4474660#4474660 2：http://www.dxy.cn/bbs/thread/6296746#6296746
哺乳动物组织样品RNA的抽提最基本的要素是防止RNA在抽提过程中降解，以及尽可能得到最高的RNA抽提效率。以下介绍我们实验室认为最符合以上两个要素的抽提方法。一、实验材料：Trizol试剂（Invitrogen公司）研钵，匀浆器，镊子，铝箔都高温灭菌即可；二、具体过程：1、样品在离体后应迅速冷冻在液氮中，若是比较大块的组织，要尽量把组织剪切成黄豆大小的块，使液氮迅速渗透到组织内部而防止组织内部的RNA降解。组织用铝箔包好或放入冻存管中，并做好记号，注意不要把记号写在纸上，以防纸被组织的血水渗透
2.1 总RNA 提取 ………………………………………… 2.2 RT-PCR……………………………………………… 2.3 琼脂糖凝胶电泳…………………………………… 材料与方法 1. 材料 1.1 供试用动物组织/ 细胞 1.2 主要仪器设备 1.5ml 离心管、0.2ml PCR 管、高速离心机、5~10ul 加样器、2~20ul 加样器、20~200ul 加样器、TAKARA PCR 仪、551 可见光透射
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