北京末端脱氧核糖核酸转移酶(TdT酶)大量库存促销

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名称：末端脱氧核糖核酸转移酶(TdT酶)
规格：500U
编号：YT512
产地：国产|进口
英文名：Terminal Deoxynucleotidyl Transferase
品牌：百奥莱博
本酶是一种模板依赖的DNA聚合酶，可以催化在寡核苷酸、单链或双链DNA的3"羟基端加上dNTP。可以催化的寡核苷酸的最短长度为3个核苷酸。

用途：寡核苷酸或DNA 3"羟基末端标记；DNA末端加尾(DNA tailing)；5"-RACE；合成同一种脱氧核苷酸的寡聚链等。
来源：由大肠杆菌表达，表达基因的来源为小牛胸腺。
活性定义：37℃60分钟内，催化1nmol dNTP加入到多聚核苷酸3"羟基末端中所需的酶量定义为1个活性单位。
酶活性检测条件：200mM potassiu*(代"m") cacodylate(pH7.2),1mM CoCl2,0.1mM DTT,0.01%(v/v)Triton X-100,10μM oligo(dT)10,1mM dTTP and 0.4MBq/ml[3H]-dTTP。
纯度：不含DNA内切酶和外切酶，不含RNase。
酶储存溶液：100mM KAc(pH6.8),2mM 2-mercaptoethanol,0.01%(v/v)Triton X-100 and 50%(v/v)glycerol 。
Reaction Buffer(5X)：0.125M Tris(pH7.2 at 25℃),1M potassiu*(代"m") cacodylate,0.05%(v/v)Triton X-100,5mM CoCl2。
失活或抑制：70℃加热10分钟或加入适量EDTA均可导致Terminal Deoxynucleotidyl Transferase失活。金属离子螯合剂，较高浓度的铵根离子、*离子、碘离子和磷酸根均对Terminal Deoxynucleotidyl Transferase有抑制作用。
储存条件：-20℃。

使用说明：

1. DNA 3’末端标记：
a. 参考如下表格设置反应体系：
待标记DNA————————————————————10 pmol of 3"-termini
Reaction Buffer (5X) ——————————————10µl
[α-32P]-ddATP, ~10TBq/mmol (3000Ci/mmol)————1.85 MBq (50µCi)
TdT (20U/µl) ——————————————————2µl
补充无核酸酶的去离子水 —————————————至50µl
b. 按上表设置好反应体系后，轻轻混匀(可以用移液器吹打混匀或用 Vortex在最低速度轻轻混匀)，随后离心沉淀液体。
c. 37℃孵育15分钟。
d. 70℃孵育15分钟或加入5µl 0.5M EDTA终止反应。
说明：标记的效率和3’羟基末端的类型有关，3’突出末端的标记效率要显著高于3’缩进末端或平末端的标记效率。

2. DNA末端加尾(DNA Tailing)：
a. 参考下表格设置反应体系：
DNA片段 ————————————————————1 pmol of 3"-termini
Reaction Buffer (5X)——————————————4µl
dATP or dTTP——————————————————130pmol
或 dGTP or dCTP (四种中通常只需加入一种)————60pmol
TdT (20U/µl)——————————————————1.5µl
补充无核酸酶的去离子水—————————————至20µl
b. 按上表设置好反应体系后，轻轻混匀(可以用移液器吹打混匀或用 Vortex在最低速度轻轻混匀)，随后离心沉淀液体。
c. 37℃孵育15分钟。
d. 70℃孵育15分钟或加入5µl 0.5M EDTA终止反应。
说明：在上述反应条件下，每个3’羟基末端可以加上100-130个dA或dT，或20-30个dC或dG。

3. 其他用途可以参考上述用途或适当的文献资料进行。
关键词：TdT酶,末端脱氧核糖核酸转移酶(TdT酶),Terminal Deoxynucleotidyl Transferase,YT512


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编号	名称
YT858	Alexa Fluor 488标记山羊抗兔IgG(H+L)
YT706	兔抗Cyclin D1抗体
YT565	D-*基酸转*酶
YT012	哺乳动物基因组DNA抽提试剂盒
YT080	改进型柠檬酸*抗原修复液(50X)
YT527	总RNA抽提试剂(Trizol法)
YT611	RIPA裂解液(弱)
YT715	兔抗GAP43抗体
YT788	HIF-1α抗体
YT172	微丝绿色荧光探针
YT037	蛋白浓度测定试剂盒(BCA法)
YT094	PVP封片液
YT045	细胞与组织裂解液(一氧化*(代"氮")检测用)
YT901	L-谷*酰胺溶液(100X)
YT041	细胞核蛋白与细胞浆蛋白抽提试剂盒
YT408	T3 RNA聚合酶
YT592	L-谷*酸脱羧酶
YT428	*苄青霉素*(细菌培养用)
YT769	兔抗VEGFR-1抗体
YT623	30% Acr-Bis (29:1)
YT541	过氧化*酶
YT671	兔抗α-Tubulin抗体
YT510	Klenow片段(无外切酶活性)
YT347	FRAP/mTOR抑制剂(Rapamycin)
YT036	蛋白浓度测定试剂盒(增强型BCA法)
YT867	Cy3标记山羊抗小鼠IgG(H+L)
YT394	M-MLV反转录酶II(RNase H-)(逆转录酶)
YT581	L-乙酰*基酸水解酶
YT180	磷酸*法细胞转染试剂盒
YT718	小鼠抗GPX1抗体(谷胱甘肽过氧化物酶1抗体)
YT657	磷酸化cdc2(Tyr15位点)抗体
YT806	IkB-α抗体
YT417	3M醋酸*溶液(pH5.2)
YT790	HDAC1抗体
YT789	His-tag抗体