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401
- 英文名:
Lambda Exonulease
- 保质期:
半年
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
- 保存条件:
-20℃
- 规格:
1000U
特别提示:包括λ核酸外切酶在内,本公司的所有产品仅可用于科研实验,严禁用于临床医疗及其他非科研用途!
产品名称:λ核酸外切酶
英文名称:Lambda Exonulease
产品货号:BTN130628
产品规格:1000U
λ核酸外切酶作用于双链DNA,沿 5´→3´方向逐步切去 5´单核苷酸。最适底物是5´磷酸化的双链DNA,也能缓慢降解单链DNA和非磷酸化底物。该酶不能从 DNA的切刻或缺口处起始消化。
产品特点:
1.高效5´→3´核酸外切酶;
2.切下双链DNA的5´单核苷酸。
储存条件:低温运输,-20℃保存,有效期半年。
活性定义:1单位指在50μl反应体系中,37℃条件下,30分钟内能从双链DNA底物上催化产生10nmol酸溶性脱氧核糖核苷酸所需的酶量。
备注:5´-0H端的切割速度比5´-PO4端慢20倍。单链DNA比双链DNA慢100倍。
我公司销售的λ核酸外切酶优惠促销,质量上佳,价格普惠,欢迎广大新老客户踊跃订购。
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文献和实验【交流】关于NEB的T4 DNA连接酶和快速连接试剂盒的常见问题及解答
核苷酸激酶缓冲液中进行。 质量保证: 无核酸内、外切酶污染。每批T4 DNA连接酶均通过模拟克隆实验进行检测,该实验可以检测出待连接DNA末端的任何破坏。结果表明>99.9%的DNA末端未受任何降解。 单位定义(粘性末端活性单位):在20µl连接反应体系、0.12µM (300µg/ml)的5'-末端浓度条件下,16°C反应30分钟,能使50% 的经Hind Ⅲ消化的λDNA片段连接所需的酶量定义为一个NEB单位。 一个粘端连接活性单位=0.015个韦氏(ATP-PP交换)单位
表达 ATP依赖型 DNA重组酶,它在λ-噬菌体与基因组 DNA的溶原重组时起作用,同时具有对 DNA放射性损伤的修复功能。由 recA基因的变异所产生的基因型使同源或异源 DNA的重组不能进行,保持插入 DNA的稳定性,对 DNA的转化有利。一个菌株的基因型如果是 recA,则说明此菌株的表现型是重组缺陷的。 recB (Recombination) 功能:recB基因表达 ATP依赖型 DNase和核酸外切酶V的一个亚基,对recA的DNA重组酶起辅助和促进作用。DNase催化双链DNA的解旋和解
臂区域如果 GC 含量过高过低,或者有重复序列,都可能在核酸外切酶切割后形成发卡结构,影响重组效率,可以使用质粒设计软件来检查同源重组臂的设计。 ⑤插入序列本身的问题:有些序列本身存在连接载体困难、连接产物不稳定、连接产物在大肠杆菌中复制困难等问题。对于这类序列可以考虑将序列打断后分步构建,或者更换载体或感受态的方式尝试解决。 2. 质粒提取量不足 质粒提取量少常见的原因可能是: ①摇菌时间过长:大肠杆菌生长已经超过对数期,细菌老化,导致细胞和 DNA 降解。 ②摇菌时间不足:细菌生长不充分
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