肽 N-糖苷酶 F PNGase F

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货号P0704L/B0701S
更新日期2025年07月31日

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英文名：
PNGase F

货号#	规格	价格	库存
#P0704L	75,000 units	5,299.00 元	有
#P0704S	15,000 units	1,329.00 元	有
#B0701S		129.00 元	无

识别位点

概述

肽 N- 糖苷酶 F，即 PNGase F，是一种酰氨酶，可以在 N- 连糖蛋白的高甘露糖、杂合和复合寡糖部分最内侧的 N- 乙酰氨基半乳糖（GalNAc）和天冬酰氨残基之间进行切割（1）。PNGase F 还以不含甘油的形式提供，便于在 HPLC 方法中取得最佳效果。

来源

从脑膜败血性黄杆菌（Flavobacterium meningosepticum）中提取纯化（2）。

反应条件

于糖蛋白变性缓冲液（含 5% SDS，400mM DTT）中100 ℃煮沸 10 分钟使糖蛋白变性。再在加入 1%NP-40 的 1X G7 反应缓冲液 [50 mM磷酸钠（pH 7.5@25 ℃）] 中于 37 ℃温育，以进行酶切反应。

随酶提供的试剂

10X 糖蛋白变性缓冲液
10X G7 缓冲液
10% NP-40

比活性

~1,800,000 units/mg。

品质保证

无外切糖苷酶污染，无内切糖苷酶 F₁、F₂ 和 F₃ 活性。无污染的蛋白水解活性。

单位定义

1 单位指在 10 μl 的反应体系中，37 ℃条件下1 小时从 10 μg 变性 RNase B 中除去超过 95% 的碳水化合物所需要的酶量（65 NEB units = 1 IUB milliunit）。

浓度

500,000 units/ml。

贮存条件

PNGase F：50 mM NaCl，20 mM Tris-HCl（pH 7.5@ 25 ℃），5 mM Na₂EDTA 和 50% 甘油。保存于-20 ℃。

PNGase F（无甘油型）：50 mM Nacl，20 mM Tris-HCl（pH7.5 @ 25 ℃），5 mM Na₂EDTA，4 ℃保存，请勿冻存。

热失活

70 ℃ 10 分钟。

使用事项

已知 PNGase F 的活性受 SDS 的抑制，所以在反应混合物中必须加入 NP-40。

要使天然糖蛋白去糖基化，或许需要增加酶量和延长温育时间。

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