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肽 N-糖苷酶 F PNGase F

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  • P0704L/B0701S
  • 2025年07月31日
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      PNGase F

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    #P0704L
    75,000 units
    5,299.00 元
    有
    #P0704S
    15,000 units
    1,329.00 元
    有
    #B0701S
    129.00 元
    无

    识别位点
    概述
    肽 N- 糖苷酶 F，即 PNGase F，是一种酰氨酶，可以在 N- 连糖蛋白的高甘露糖、杂合和复合寡糖部分最内侧的 N- 乙酰氨基半乳糖（GalNAc）和天冬酰氨残基之间进行切割（1）。PNGase F 还以不含甘油的形式提供，便于在 HPLC 方法中取得最佳效果。
    来源
    从脑膜败血性黄杆菌（Flavobacterium meningosepticum）中提取纯化（2）。
    反应条件
    于糖蛋白变性缓冲液（含 5% SDS，400mM DTT）中100 ℃煮沸 10 分钟使糖蛋白变性。再在加入 1%NP-40 的 1X G7 反应缓冲液 [50 mM磷酸钠（pH 7.5@25 ℃）] 中于 37 ℃温育，以进行酶切反应。
    随酶提供的试剂
    10X 糖蛋白变性缓冲液
    10X G7     缓冲液
    10% NP-40
    比活性
    ~1,800,000 units/mg。
    品质保证
    无外切糖苷酶污染，无内切糖苷酶 F1、F2 和 F3 活性。无污染的蛋白水解活性。
    单位定义
    1 单位指在 10 μl 的反应体系中，37 ℃条件下1 小时从 10 μg 变性 RNase B 中除去超过 95% 的碳水化合物所需要的酶量（65 NEB units = 1 IUB milliunit）。
    浓度
    500,000 units/ml。
    贮存条件
    PNGase F：50 mM NaCl，20 mM Tris-HCl（pH 7.5@ 25 ℃），5 mM Na2EDTA 和 50% 甘油。保存于-20 ℃。
    PNGase F（无甘油型）：50 mM Nacl，20 mM Tris-HCl（pH7.5 @ 25 ℃），5 mM Na2EDTA，4 ℃保存，请勿冻存。
    热失活
    70 ℃ 10 分钟。
    使用事项
    已知 PNGase F 的活性受 SDS 的抑制，所以在反应混合物中必须加入 NP-40。
    要使天然糖蛋白去糖基化，或许需要增加酶量和延长温育时间。

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