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- 百奥莱博
- YT480-UWA
- 北京
- 2025年07月16日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
302
- 英文名：
N-HA plasmid（with CMV promoter）
- 保质期：
长期
- 供应商：
北京百奥莱博科技有限公司
- 保存条件：
-20℃
特别声明：本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品，严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
北京百奥莱博主要从事生物试剂的生产和销*(代"售")，产品线涵盖N端HA标签融合蛋白质粒 克隆与表达在内的分子生物学试剂产品，还包括PCR及荧光定量PCR、核酸提取试剂盒类、样本核酸保护试剂、核酸提取、克隆与转化、蛋白纯化、蛋白检测、免疫组化、细胞凋亡与抗体等。
名称：N端HA标签融合蛋白质粒 克隆与表达
规格：1μg
产地：国产|进口
品牌：百奥莱博
编号：YT480
本质粒是用于在哺乳动物细胞中表达N端和HA tag(HA标签)融合的目的蛋白的表达质粒。含有CMV启动子可以高效启动目的蛋白在细胞中的表达；在多克隆位点的5"端含有一个可以编码HA标签的序列，因此可以表达出含有HA标签的融合蛋白，可以方便地使用抗HA的抗体来识别目的蛋白，有利于目的蛋白检测和分离纯化。质粒为卡那霉素抗性。转染细胞后，可使用G418筛选稳定表达目的蛋白的细胞株。
本质粒质粒的主要信息如下：
| Feature Nucleotide | Position |
| CMV promoter | 1-602 |
| T3 promoter and T3 primer binding site | 620-639 |
| HA tag | 679-705 |
| multiple cloning site | 708-781 |
| T7 promoter and T7 primer binding site | 824-845 |
| SV40 polyA signal | 857-1240 |
| f1 origin of ss-DNA replication | 1378-1684 |
| bla promoter | 1709-1833 |
| SV40 promoter | 1853-2191 |
| neomycin/kanamycin resistance | ORF 2226-3017 |
| HSV-thymidine kinase(TK)polyA signal | 3018-3476 |
| pUC origin | 3605-4272 |
本质粒的图谱如下：
使用说明：
1. 首次使用时请先取少量本质粒转化大肠杆菌，进行质粒小量、中量或大量抽提后再用于后续用途。抽提获得的质粒可以通过酶切电泳进行鉴定，或通过测序进行鉴定。
2. 本质粒在其多克隆位点适当酶切后可以插入待表达的目的基因，需注意插入基因片段和tag之间的读码框要一致，即需要避免发生移码突变。构建的质粒可以用常规方法转染细胞。
储存条件：-20℃。
更多有关N端HA标签融合蛋白质粒 克隆与表达的价格及使用说明等，请联*(代"系")我们的业务经理王欣女士咨询，我公司还销*(代"售")以下产品：
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N端HA标签融合蛋白质粒 克隆与表达关键词：N-HA plasmid（with CMV promoter）,YT480,N端HA标签融合蛋白质粒
·兔抗β-Catenin抗体（β连环蛋白抗体）
编号：YT686
英文名称：β-Catenin Rabbit Polyclonal Antibody
规格：50μl
本品为来源于兔的抗β连环蛋白抗体的多克隆抗体
宿主：兔
用途：WB,IHC,FC
交叉反应性：人小鼠大鼠
分子量：85KDa
推荐稀释比例：WB(1:1000),IHC(1:200),FC(1:50-1:100)
克隆性：多克隆抗体
| About this Antibody | |
| Name | β-Catenin Rabbit Polyclonal Antibody |
| Category | Polyclonal antibody(pAb); Primary antibody |
| Isotype | IgG |
| Purification | Peptide affinity purified |
| About the Immunogen | |
| Immunogen | This antibody is produced by immunizing rabbits with a synthetic peptide (KLH-coupled) corresponding to β-catenin. |
| Gene ID | 1499 |
| SwissProt | P35222 |
| Synonyms | CTNNB; DKFZp686D02253; FLJ25606; FLJ37923; β-catenin; Beta-Catenin |
| Category | Developmental Biology |
| Background | β-Catenin is a key downstream effector in the Wnt signaling pathway. It is implicated in two major biological processes in vertebrates: early embryonic development and tumorigenesis. Phosphorylation at Ser-552 by AMPK promotes stabilizion of the protein, enhancing TCF/LEF-mediated transcription. Phosphorylation on Tyr-654 decreases CDH1 binding and enhances TBP binding. GSK-3β destabilizes β-catenin by phosphorylating it at Ser33, Ser37, and Thr41. Mutations at these sites result in the stabilization of β-catenin protein levels and have been found in many tumor cell lines. In the presence of Wnt ligand, CTNNB1 is not ubiquitinated and accumulates in the nucleus, where it acts as a coactivator for transcription factors of the TCF/LEF family, leading to activate Wnt responsive genes. |
注意事项：
1. 如果本抗体用于Western blot (WB)、免疫荧光(IF)、免疫细胞化学(ICC)等实验，请注意回收使用过的稀释抗体。回收的抗体通常至少可以重复使用5-10次。稀释后的抗体，包括已经使用过的稀释抗体，请4℃保存。
2. 回收后重复使用的抗体，使用方法同新鲜稀释的抗体。如果在重复使用过程中发现抗体出现轻微混浊现象，可以10,000g离心1-3分钟，取上清用于后续检测。如果回收的抗体出现明显的絮状物或长霉长菌等情况，则可以考虑废弃该抗体。
3. 提供的Western一抗稀释液也可以用于免疫荧光(IF)、免疫组化(IHC)、免疫细胞化学(ICC)等适当用途。如果希望获得最佳的检测效果，请考虑使用上述检测专用的一抗稀释液。
储存条件：-20℃，有效期一年。
我公司强烈推荐克隆与表达系列产品，热情期待您的咨询选购N端HA标签融合蛋白质粒 克隆与表达。
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文献和实验用传统的限制酶切和连接的方法产生入门克隆。这些载体配合合适的目的载体，可以用于表达天然蛋白或带有N端或C端融合标签的重组蛋白。为了在真核细胞中有效地翻译蛋白，所有的5个Gateway入门载体提供了Kozak 序列。此外，pENTR11提供了SD （Shine-Dalgarno）序列，便于在大肠杆菌中有效的翻译。2、PCR重组克隆 重组是从PCR产物创建Gateway入门克隆的另一种方法。这种方法是通过合并attB位点到上游和下游引物上，然后共同孵育PCR扩增产物和pDONR载体（包含attP位点
。当基因在目的表达载体 之间快速简便的穿梭时，还可以保证正确的方向和阅读框。Gateway也有助于进行带不同数目纯化和检测标签蛋白的表达。 图1 Gateway技术的灵活性 目的基因克隆进入门载体 后，可以同时转移目的基因到多个目的载体。 Gateway利用了位点特异重组，所以在构建入门载体后，不再需要使用限制性内切酶和连接酶。一旦您拥有了一个入门克隆，就可以多次使用它，转移您的目的基因到Gateway改造过的各种表达载体(目的载体)。
比起其它公司的原核表达系列来说Invitrogen有个非常突出的地方就是它的重组克隆技术。像之前Novagen大部分载体都是用传统的酶切、链接方式做重组质粒，但是Invitrogen的表达系统大量运用了它的TOPO技术和Gateway技术。 虽然现在在许多做科研的学生看来，能出实验结果是最重要的，中间的过程不是那么重要。可是只有创新的技术才能推动科学不断的进步，比如：如果我们一直采用手工法测序，那真是不知道要猴年马月才能有人类基因组测序图谱，更难以进行
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