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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
752
- 英文名:
Annexin V-APC/7-AAD Apoptosis Detection Kit
- 保质期:
一年
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
- 保存条件:
4℃
特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
北京百奥莱博主要从事生物试剂的生产和销*(代"售"),产品线涵盖北京AnnexinV-APC/7-AAD细胞凋亡检测试剂盒价格在内的细胞生物学试剂产品,还包括PCR及荧光定量PCR、核酸提取试剂盒类、样本核酸保护试剂、核酸提取、克隆与转化、蛋白纯化、蛋白检测、免疫组化、细胞凋亡与抗体等。
名称:北京AnnexinV-APC/7-AAD细胞凋亡检测试剂盒价格
产地:国产|进口
规格:20T
品牌:百奥莱博
编号:SY0478
Annexin V-APC/7-AAD细胞凋亡检测试剂盒是用荧光素APC标记的Annexin V作为探针,来检测细胞早期凋亡的发生,可用流式细胞仪或其他荧光检测设备进行检测。
其检测原理为:在正常的活细胞中,磷脂酰丝*酸(phosphotidylserine,PS)位于细胞膜的内侧,但在早期凋亡的细胞中,PS从细胞膜的内侧翻转到细胞膜的表面,暴露在细胞外环境中。Annexin-V(膜联蛋白-V)是一种分子量为35-36KD的Ca2+ 依赖性磷脂结合蛋白,能与PS高亲和力结合。可通过细胞外侧暴露的磷脂酰丝*酸与凋亡早期细胞的胞膜结合。
另外,本试剂盒中提供的7-AAD可用来区分存活的早期细胞和坏死或晚期凋亡细胞。7-AAD是一种核酸染料,同PI有着相似的荧光特性,但其发射光谱较PI窄,对其他检测通道的干扰更小,在多色荧光分析中是PI的最佳替代品,可与Annexin V联合使用。该染料不能透过正常细胞或早期凋亡细胞的完整的细胞膜,但可穿透晚期凋亡细胞或者坏死细胞并与其内的DNA结合。因此将Annexin V-APC与7-AAD联合使用时,7-AAD则被排除在活细胞(Annexin V-/7-AAD-)和早期凋亡细胞(Annexin V+/7-AAD-)之外,而晚期凋亡细胞和坏死细胞同时被Annexin V-APC和7-AAD结合染色呈现双阳性(Annexin V+/7-AAD+)。
试剂盒组份:
重组人Annexin V/APC*(rh Annexin V/APC)———100µl
7-AAD Viability Staining Solution——————100µl
1×Binding buffer——————————————10ml
注意事项
1) 试剂在开盖前请短暂离心,将盖内壁上的液体甩至管底,避免开盖时液体洒落。
2) 7-AAD为潜在致癌物,操作时请采取防护措施,穿防护服、戴手套等;
3) 推荐使用悬浮培养细胞。若是贴壁细胞,建议使用不含EDTA的胰酶消化,如果消化不当,可能引起假阳性;若用细胞刮子则会造成细胞黏连成团而影响检测。可将胰酶消化后的细胞保存于含2% BSA的PBS中,防止进一步的损伤。
4) 本试剂盒适用于检测活细胞,流式细胞仪检测时,细胞数量不应低于1×105,不推荐用于组织样本检测。
5) 请勿固定样品,细胞固定后可能导致荧光的猝灭;
6) 因检测细胞的类型、凋亡诱导剂种类、使用的检测仪器不同,因而流式检测的荧光补偿也不同,因此建议每次检测均需使用未经凋亡细胞处理的细胞作为阴性对照,并进行荧光补偿的调节。
7) 如果样品来源于血液,请务必除去血液中的血小板。因为血小板含有PS,能与Annexin V结合,从而干扰实验结果。可以使用含有EDTA的缓冲剂并低速离心(200×g)洗去血小板,然后用Annexin V结合缓冲液清洗细胞,以避免残留的EDTA会螯合Ca2+。
8) Annexin V-APC和7-AAD是光敏物质,在操作时请注意避光。
9) 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
储存条件:4℃,有效期一年。
除北京AnnexinV-APC/7-AAD细胞凋亡检测试剂盒价格外,我公司正在打折促销以下产品:
·Percoll
编号:SY0531
规格:100ml
Percoll是一种适用性广且操作灵活简单的低密度梯度分离液,可用来分离细胞,亚细胞颗粒,细菌,病毒,甚至实现受损细胞及其碎片与完整活细胞的分离。Percoll主要由表面包被单层乙*(代"烯")吡*(代"咯")烷酮(PVP)的硅胶颗粒组成,直径15-30 nm,游离PVP的含量仅占1-2%。由于颗粒大小的异质化,离心过程以不同的速率沉淀,自发产生一个匀质化且等渗的梯度,密度在1.0-1.3 g/ml之间。大部分沉淀系数>60S的生物颗粒都可以用Percoll实现分离。
本品是无菌的溶液,呈无色至浅黄色,具有以下几大特点,
1)Percoll形成的梯度密度范围在1.0-1.3 g/ml之间,整个梯度体系都是等渗的;
2)无细胞毒性,化学惰性,不会粘附到细胞膜上;
3)可调节至生理离子强度和pH;
4)温和条件分离细胞,亚细胞颗粒和较大病毒(低至~70S),可保持其活力和形态完整性;
5)只需角转头中速离心即可实现预成梯度或者自发形成梯度分离;
6)Percoll粘度低(10±5 cP at 20℃),能够快速形成梯度和颗粒分离;采用预制梯度分离低速离心力(200-1000×g)仅需数分至数十分钟即可达到满意的分离结果;
7)Percoll稳定性高,未开封的产品室温保存5年有效;开封的产品室温无菌保存至少2年有效;
8)Percoll(未稀释)可重新高压灭菌,120℃,30min;
注意事项
1)Percoll分离推荐使用聚碳酸酯(PC)离心管;Percoll离心后常有二氧化硅颗粒聚集在管底,或者分层时聚集在管壁上。干燥后这些沉淀较难去除,因此建议使用后立即用水冲洗所用设备。
2)Percoll在pH 5.5-10之间性能不受任何干扰。但低于pH 5.5会发生胶凝。二价阳离子也会引起胶凝,而温度升高会加剧此现象发生。
3)只有不含盐离子或蔗糖的Percoll(原液)才能高压灭菌。因为盐离子会引起胶凝,而蔗糖会引起焦糖化。高压灭菌过程尽量减少与空气接触,避免在percoll/空气层间形成固体颗粒,可通过将percoll装在窄口瓶内来避免。如果颗粒已经形成,通过过滤或者低速离心的方式去除。灭菌后溶液的损失可加入相应体积的蒸馏水补足,密度不会受影响。Percoll不可用滤膜除菌。
4)为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
储存条件:4-30℃,有效期5年
北京AnnexinV-APC/7-AAD细胞凋亡检测试剂盒价格关键词:SY0478,Annexin V-APC/7-AAD Apoptosis Detection Kit,AnnexinV-APC/7-AAD细胞凋亡检测试剂盒
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北京AnnexinV-APC/7-AAD细胞凋亡检测试剂盒价格关键词:SY0478,Annexin V-APC/7-AAD Apoptosis Detection Kit,AnnexinV-APC/7-AAD细胞凋亡检测试剂盒
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文献和实验Q:Annexin V 凋亡检测试剂盒的原理是什么? A:Annexin V 是一种钙离子依赖性磷脂结合蛋白,与磷脂酰丝氨酸 PS 有高度亲和力,可通过细胞外侧暴露的 PS 与凋亡早期细胞胞膜结合,将 Annexin V 标记荧光染料如 FITC 利用流式细胞仪或荧光显微镜可检测细胞凋亡。 碘化丙啶(Propidium Iodide, PI)或 7-AAD 可与双链 DNA 特异性结合,并产生强烈的荧光,正常情况下无法透过细胞膜。由于凋亡晚期或坏死细胞膜丧失完整性,核染料 PI 或 7-AAD
一、概述 在正常细胞中,磷脂酰丝氨酸只分布在细胞膜脂质双层的内侧,细胞发生凋亡最早期,膜磷脂酰丝氨酸(PS)由脂膜内侧翻向外侧,这一变化早于细胞皱缩、染色质浓缩、DNA片断化和细胞膜的通透性增加等凋亡现象。 AnnexinV是一种磷脂结合蛋白,与磷脂酰丝氨酸有高度亲和力,故可通过细胞外侧暴露的磷脂酰丝氨酸与凋亡早期细胞的胞膜结合。因此AnnexinV被作为检测细胞早期凋亡的灵敏指标之一。 碘化丙啶(Propidium Iodide,PI)是一种核酸染料,它不能透过完整的细胞
:敏感度高,适合于检测少量样本,小部分凋亡细胞。如临床活组织检测。 Fasta921 zhaohu552211 wrote:感谢大家!我现在做的是大鼠的肝脏组织,不是细胞,在这种情况下我可以做AnnexV嘛?我知道AnnexV可以做细胞的,如果可以做组织的话,我定那家的试剂盒,具体要注意什么? 听说这个电泳很难掌握条件!再次感谢大家! 兄弟,貌似做AnnexinV国产很多不能做组织,呵呵!我没做过组织,没经验,提供点资料看看!美国ADL Annexin V-FITC & PI凋亡检测试剂盒
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