- ¥614
- 沪震生物
- HZ1011
- 进口/国产
- 2025年07月13日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
大量
- 英文名：
BpiI (BbsI) (10 U/µL)
- 保质期：
1年
- 供应商：
上海沪震实在有限公司
- 保存条件：
-20℃
- 规格：
200units
BpiI (BbsI) (10 U/µL)
Enzyme : BpiI (BbsI)保存温度 : -20℃
货期 : 2-3天
Compatible Buffer : 10x Buffer G
Optimal Reaction Temperature : 37° C
Sensitive to Heat Inactivation: : Yes
Methylation Sensitivity : Not CpG methylation-sensitive, Not dam methylation-sensitive, Not dcm methylation-sensitive
BpiI (BbsI)限制性内切酶能够识别GAAGAC(2/6)^位点，在Tango缓冲体系（+DTT）中于37°C达到最佳切割效果（同裂酶：BbsI、BpuAI、BstV2I）。Thermo Scientific传统限制性内切酶产品包含了大量的高品质内切酶，这些酶经过优化，可在五种缓冲液体系中的其中一种中进行酶切，此外，还随酶提供通用Tango缓冲液，以便进行双酶切。所有内切酶在推荐的缓冲液和反应条件下都具有100%的活性。为保证内切酶的性能稳定，Thermo Scientific限制性内切酶反应缓冲液还预先混入了BSA，以增强酶的稳定性并结合可能存在于DNA制备产物中的污染物。
特点：
• 优异的质量—严格的质量控制和业内领先的生产流程
• 使用颜色标记的五大便捷缓冲系统
• 包含适于双酶切的通用型Tango缓冲液
• 反应缓冲液中预先混入BSA
• 种类齐全，特异性限制性内切酶的广泛选择
应用
• 分子克隆
• 限制性酶切位点作图（Restriction site mapping）
• 基因分型
• Southern blotting
• 限制性片段长度多态性（RFLP）
• SNP
注意事项：Bpil能够在其识别位点的下游进行切割，并生成所需的5'端4碱基粘性末端。这一特性适合应用于PCR产物的直接克隆操作。关于甲基化敏感度，请参见产品说明。
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puromycin 抗性筛选标记。图 3 PX458M 图谱图 4 PX459M 图谱图 5 EZ-GuideXH 图谱PX458M 和 PX459M 载体是从张峰实验室 PX458 and PX459 载体改造过来的。主要是引入了第二个向导性 RNA 插入的多克隆位点。EZ-GuideXH 来源于 EZ-T 克隆载体。四、Guide RNA 的插入根据张峰实验的实验操作方法， guide RNA 插入方法很简单。如图 6 所示，可以用 BbsI 消化 PX458 载体, Guide RNA 是通过引物退火方法
transcription. Nat Biotechnol29(2):149–153. doi: 10.1038/nbt.1775 9. Miller JC, Tan S, Qiao G, Barlow KA, Wang J,Xia DF, Meng X, Paschon DE, Leung E,Hinkley SJ, Dulay GP, Hua KL, Ankoudinova I, Cost GJ, Urnov FD, Zhang HS, Holmes MC, Zhang L, Gregory PD
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2：5'- aaac CACGAACTGGTACTTGAACGc。标红部分与经 BsmBI 酶切后的载体互补配对。BsmBI 又名 BbsI。oligoDNA 序列的第一个碱基必须是 G，如选取的 Guide 序列的第一个碱基不是 G，需自行添加一个额外的 G。2. Oligo 退火形成 duplexPCR 仪 95℃ 5 min，缓慢降温至室温 1 h，1：200 稀释 duplex。3. 质粒酶切4. 胶回收大片段约 11kb 回收；小片段约 2kb 为切下来的 filler，不要。5. 连接室温连接
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