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223
- 英文名:
N-YFP plasmid(with CMV promoter)
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长期
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北京百奥莱博科技有限公司
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-20℃
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N端YFP标签融合蛋白质粒(黄色荧光蛋白)品牌的品牌:百奥莱博,是优质的克隆与表达产品,用于生化研究,本产品质量好,且极具价格优势,深为用户称道,了解更多N端YFP标签融合蛋白质粒(黄色荧光蛋白)等克隆与表达产品请联*(代"系")我司咨询订购。
名称:N端YFP标签融合蛋白质粒(黄色荧光蛋白)品牌
品牌:百奥莱博
编号:YT478
规格:1μg
产地:国产|进口
英文名:N-YFP plasmid(with CMV promoter)
本质粒是哺乳动物细胞表达质粒,用于表达N端含YFP(Yellow Fluorescent Protein, 黄色荧光蛋白)标签的融合蛋白。该质粒含有CMV启动子,可以高效启动目的蛋白在细胞中的表达。在多克隆位点的前面有一个YFP的完整编码序列,因此在多克隆位点根据阅读框插入目的基因就可以表达N端含有YFP标签的融合蛋白。利用YFP的荧光特性可以比较容易地观察融合蛋白的表达水平和细胞内定位,也可以利用YFP抗体来检测或免疫沉淀融合蛋白。YFP与GFP高度相似,可以尝试用GFP抗体检测YFP。该质粒为卡那霉素抗性。转染细胞后,可以使用G418筛选稳定表达目的蛋白的细胞株。
本质粒质粒的主要信息如下:
| Feature Nucleotide | Position |
| CMV promoter | 1-602 |
| T3 promoter and T3 primer binding site | 620-639 |
| YFP | 677-1393 |
| Multiple cloning site | 1394-1483 |
| T7 promoter and T7 primer binding site | 1503-1524 |
| SV40 polyA signal | 1536-1919 |
| f1 origin of ss-DNA replication | 2057-2363 |
| bla promoter | 2388-2512 |
| SV40 promoter | 2532-2870 |
| Neomycin/kanamycin resistance ORF | 2905-3696 |
| HSV-thymidine kinase (TK) polyA signal | 3697-4155 |
| pUC origin | 4284-4951 |
本质粒(5003bp)的图谱如下:
使用说明:
1. 首次使用时请先取少量本质粒转化大肠杆菌,进行质粒小量、中量或大量抽提后再用于后续用途。抽提获得的质粒可以通过酶切电泳进行鉴定,或通过测序进行鉴定。
2. 本质粒在其多克隆位点适当酶切后可以插入待表达的目的基因,构建的质粒可以用常规方法转染细胞。
储存条件:-20℃。
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·GSK-3β抗体
编号:YT782
英文名称:anti-GSK-3β antibody
规格:>20次
本抗体是用经过适当修饰的人工合成的人GSK-3β中的一段多肽作为抗原制备而成的抗GSK-3β兔单克隆抗体。本抗体如果用于常规的Western检测,至少可以检测20次。
本GSK-3β抗体识别的是总GSK-3β(total GSK-3β),可以检测内源性的GSK-3β。未发现和其它激酶有交叉反应。
Glycogen synthase kinase-3,即糖原合成酶激酶-3,简称GSK-3,是一种广泛表达的serine/threonine蛋白激酶。GSK-3包括51kD的GSK-3α和46kD的GSK-3β,两者有85%的*基酸相似性。GSK-3最初被发现可以被胰岛素信号通路调控,可以磷酸化糖原合成酶(glycogen synthase)并使之失活。GSK-3是PI3 kinase/Akt信号通路的关键下游蛋白,Akt可以磷酸化GSK-3α的Ser21和GSK-3β的Ser9,并抑制它们的酶活性。这样在饮食诱导胰岛素分泌的情况下,胰岛素诱导Akt磷酸化,随后GSK-3β被Akt所磷酸化抑制,导致糖原合成酶磷酸化水平下降,糖原合成酶活性升高,糖原合成增加,从而降低血糖。GSK-3β在能量代谢、体型发育(body pattern development)和神经细胞发育过程中起重要作用。GSK-3β可以磷酸化β-catenin并调控Wnt信号通路,还可以调节cyclin D1的蛋白降解和细胞内定位。
产品组份:
GSK-3β抗体————20μl
Western一抗稀释液————20ml
抗体参数:
免疫原物种:人
免疫原:人工合成的人GSK-3β中的一段多肽
克隆性:单克隆
宿主:兔
用途:WB,IP,IHC
交叉反应性:人,小鼠,大鼠,猴
同种型:IgG
GSK-3β分子量:~46kD
推荐稀释比例:WB(1:1000),IP(1:50),IHC(1:100)
注意事项:
1. 在Western实验后,请注意回收稀释的抗体。回收的抗体在进行Western实验时至少可以重复使用10次。稀释后的抗体,包括已经使用过的稀释抗体,4℃保存。
2. 回收后重复使用的抗体,使用方法同新鲜稀释的抗体。如果在重复使用过程中发现抗体出现轻微混浊现象,可以10000g离心1-3分钟,取上清用于后续检测。如果回收的抗体出现明显的絮状物或长霉长菌等情况,则可以考虑废弃该抗体。
3. 对于本抗体,Western检测时一抗要4℃缓慢摇动过夜,如果仅短时间与一抗孵育检测效果较差。
储存条件:-20℃,有效期一年。
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文献和实验时效率最高 [2,3] 。在设计钙变色子时,用 GFP 突变体作为两个伙伴荧光团:蓝绿色荧光蛋白作为给体,而黄色荧光蛋白作为受体(见图4.1 ; 参考文献 [4])。如果两个荧光团融合于不同的作用伙伴,分子间 FRET 可以用来探测蛋白质-蛋白质相互作用,而如果两个荧光团都融合到同一个蛋白质,分子内 FRET 可用来探测蛋白质剪切和构象变化 [3] 。 4.1.2 钙变色子的一般设计 使用分子内 FRET 的概念,钙变色子由夹在 CFP 和 YFP 之间的,前后融合的 CaM 的 N
前言: NusA融合蛋白表达系统于9年前(1999年)由Davis发明,并在2000年由Novagen首先进行商业化设计和开发,特别推荐用于以NusA作为N端标签时提高在大肠杆菌中难溶的重组表达蛋白的可溶性。NusA融合蛋白表达系统面市至今,已经通过一些高通量表达筛选的评估确认其在可溶性改善方面的有效性。关于NusA融合表达蛋白去除或不去除NusA标签,目的蛋白仍然具有活性的报道也有很多。正是由于NusA标签系统的这种特性,使其成为目前在大肠杆菌表达体系中使用最为广泛的三个融合标签
. coli/mammals pECFP-C1 pECFPN1 表达 青色 荧光蛋白和目的基因的融合蛋白,目的基因位于N端 kan/neo 4.7kb E. coli/mammals pEYFP-C1 pEYFPC1 表达 黄色 荧光蛋白和目的基因的融合蛋白,目的基因位于C端 kan/neo 4.7kb E. coli/mammals 4)、哺乳动物/真核荧光素酶载体(研究启动子专用)来自荧火虫的化学发光剂,加入底物后发光,不适合追踪单个细胞。 PGL3-basic PGL
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