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- 百奥莱博
- 北京
- BTN120402-NZR
- 2025年07月16日
企业认证
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件：
-20℃运输及保存
- 保质期：
一年
- 英文名：
LIC Cloning Kit for PCR
- 库存：
369
- 供应商：
北京百奥莱博科技有限公司
特别声明：本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品，严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
PCR专用LIC克隆套装厂家价格由老牌试剂供应北京百奥莱博供货并提供技术支持，本产品用于科研实验，本产品质量好，且极具价格优势，深为用户称道，了解更多PCR专用LIC克隆套装等克隆与表达产品请联系我司咨询订购。
名称：PCR专用LIC克隆套装厂家价格
产地：国产|进口
品牌：百奥莱博
规格：1μg
英文名：LIC Cloning Kit for PCR
本产品就是基于LIC原理开发的即用型载体。LIC就是不依赖于连接的克隆技术(Ligation-Independent Cloning),它是继限制性内切酶切/连接酶克隆方法后出现的第二代DNA克隆技术，它效率高,尤其适用于大规模分子克隆，其原理如下：
产品特点：
1. 操作简单,一管式一步反应,只需加入插入片段即可,客户不需要购买任何额外的酶。
2.时间短,整个过程只要15分钟。
3.高效,比常用的AT克隆效率更高,阳性率接近于100%。
4. 克隆方向和位置精准和可控,适合表达型克隆工作。
5. 便于自动化,适合高通量克隆。
6.适用于长片段克隆。
产品组成：
| 成分 | 规格 |
| LIC载体(50μg/μL) | 1μg |
| 溶液A | 10μl |
| 溶液B | 150μl |
| 阳性对照插入片段 | 8μl |
| 说明书 | 1份 |
储存条件：-20℃运输及保存，有效期一年。
一. PCR引物设计,合成和PCR反应
1. 按常规方法设计PCR引物,只是必须在一条引物5´端再加上GGCGGCCGCGGTAC序列,在另一条引物5´端加上GGCGCCGGCGGTAC序列。此序列决定克隆的方向,如果不在乎方向,可以随机组合。
2. 所用引物最好为HPLC纯化获得。注意：如果购买本公司产品,免费合成LIC引物一对。
3. 按常规的方法进行PCR,最好使用高保真DNA聚合酶。
4. 按常规的胶回收的方法回收PCR片段。注意：必须去除残余的dNTP和PCR引物,否则会极大降低LIC效率。
5. 对PCR片段电泳定量,即电泳后通过肉眼比较PCR片段和DNA Marker的相对强度,通过DNA Marker条带的浓度(一般商品化的DNA Marker每条带的浓度都是已知的)推测出PCR片段的浓度。
二. PCR片段与载体退火
1.在纯化的2μL PCR产物中加入0.4μL溶液A、2μL载体(100ng)以及5μL溶液B,混合。
注意：PCR产物跟载体的摩尔数比例最好是1：1。
2.室温放置5分钟。注意：保温时间长短很关键,不要轻易延长或缩短。
3.在PCR仪器上按75℃ 10分钟,然后放冰上或-20℃待用。
三.转化
1. 按常规方法进行转化。
2. 按菌落PCR方法筛选,可选用我公司的菌落PCR试剂盒(BTN50901)。进行快速筛选,需要T7和SP6 RNA聚合酶启动子引物。
除PCR专用LIC克隆套装厂家价格外，我公司正在打折促销以下产品：
·长效期SDS-PAGE电泳液(＞30 KD)(干粉)
编号：BTN100912A
英文名称：Stable SDS-PAGE Running Buffer
规格：20L
本产品是专门用于长效SDS-PAGE电泳的缓冲液，加水定容后即可使用，简便快捷。
本产品分A、B两种型号。A型电泳液适合30 KD以上蛋白，B型电泳液适合2-30KD蛋白。
储存条件：常温运输和保存，有效期一年。
·冷启动核酸酶
编号：BTN130824
英文名称：Cold-active Nuclease
规格：10000U
本酶能够切断所有类型的DNA和RNA(单链、双链、线性以及环状)，即使在冰上也能进行反应。因此，本酶特别适用于消化蛋白质等一些热不稳定基质中的核酸物质。
产品用途：
➤ 降解基因组DNA。
➤从大肠杆菌细胞中抽提蛋白质时，降低溶液黏度。
➤ 双向电泳时，对样品进行预处理。
➤ 病毒纯化时的预处理。
产品组成：
| 成分 | 规格 |
| Cryonase冷启动核酸酶(20U/μl) | 500μL |
| 使用手册 | 1份 |
储存条件：低温运输，4℃遮光保存，有效期二年。
活性定义：以鲑鱼精子DNA为底物，在37℃、pH7.5的条件下，1分钟内使反应液的260nm吸光度增加0.001所需的酶量定义为1个活性单位(U)。
PCR专用LIC克隆套装厂家价格关键词：LIC Cloning Kit for PCR,BTN120402,PCR专用LIC克隆套装
ARB12834 小鼠支原体ELISA检测服务 mpuse mycoplasma ELISA KIT
9001-92-7 风味蛋白酶 Flavourzyme
ARB12606 大鼠脱*表雄酮(DHEA)Elisa分析 Rat dehydroepiandrosterone,dhea ELISA KIT
酸性铬蓝K DL-Thioctic acid 3270-25-5
异香兰酸 MOPSO 645-08-9
对硝基*(代"*")-N-乙酰-β-D-*基半乳糖苷 Bis(methylglycol) phthalate 14948-96-0
ARB12165 大鼠白介素2可溶性受体β链(IL-2sRβ)血清中含量检测 Rat soluble interleukin-2 receptor,IL-2srβ ELISA KIT
F030828 BIOTIN标记兔抗猫IgG抗体 Rabbit Anti-Cat IgG*BIOTIN
PY02-372 改良EC肉汤(mEC+n)基础 250克
ARB10539 人主要组织相容性复合体Ⅲ类(MHCⅢ/HLA-Ⅲ)含量分析 Human major Histocomp*(代"a")tibility complex Ⅲ,mhcⅢ/hla-Ⅲ ELISA KIT
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ARB11695 人硫*(代"酸")皮肤素(DS)含量检测 Human dermatan sulfate,ds ELISA KIT
核糖核酸酶H Syringic acid 9050-76-4
固紫酱GBC盐 2-Aminobenzimidazole 101-89-3
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磷钼酸* Amaranth 1313-30-0
槲皮素 L-phenylglycine ethyl ester?HCl 6151-25-3
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ARB12278 大鼠纤溶酶原激活物抑制因子1(PAI-1)酶标法分析 Rat plasminogen activator inhibitor 1,pai-1 ELISA KIT
1404-93-9 Vancomycin 盐*(代"酸")万古霉素
86-87-3 NAA α*乙酸
CYB162024 兔抗豚鼠IgG(抗血清) 0.5ml
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文献和实验) 克隆困难怎么办？ 对于大片段载体构建实验而言，难点在于片段扩增效率低、重组 / 连接困难、质粒稳定性差、容易发生断裂等。需针对这些痛点，从技术路线选择、实验细节优化两方面制定策略，具体方案如下： ①建议首先选择「分段克隆 + 拼接」 策略，降低连接难度； ②大片段克隆的关键在于长片段的扩增，所以需要从源头保证实验成功率，即保证模板完整度，在扩增前确保模板未发生降解；其次优化 PCR 体系，比如选择长片段专用 PCR 酶，通过梯度测试选择最佳模板上样量及退火温度等； ③避免高拷贝载体（如 pUC
引物二聚体形成的几率，但是为了下一步的操作就要作出适当的“牺牲”。 很多时候PCR只是初步克隆，之后我们还需要将目的片段亚克隆到各种载体上，那么就需要在PCR这个步骤为下一步的操作设计额外的碱基。以下总结一些为了亚克隆所要设计的序列。 （1）添加限制性内切酶酶切位点 添加酶切位点是将PCR产物进行亚克隆使用得最多的手段。一般酶切位点是六个碱基，另外在酶切位点的5’端还需要加2～3个保护碱基。但是不同的酶需要的保护碱基数目是不相同的，例如：SalⅠ不需要保护碱基，EcoRⅤ需要1个，NotⅠ
，但是为了下一步的操作就要作出适当的“牺牲”。 很多时候PCR只是初步克隆，之后我们还需要将目的片段亚克隆到各种载体上，那么就需要在PCR这个步骤为下一步的操作设计额外的碱基。以下总结一些为了亚克隆所要设计的序列。 a 添加限制性内切酶酶切位点 添加酶切位点是将PCR产物进行亚克隆使用得最多的手段。一般酶切位点是六个碱基，另外在酶切位点的5’端还需要加2～3个保护碱基。但是不同的酶需要的保护碱基数目是不相同的，例如：SalⅠ不需要保护碱基，EcoRⅤ需要1个，NotⅠ需要
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