非冻型血液RNA保存液特价促销

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百奥莱博专业生产供应非冻型血液RNA保存液特价促销，我公司销*(代"售")全品类的分子生物学试剂，价格优惠，欢迎广大科研工作者垂询订购。

名称：非冻型血液RNA保存液特价促销
规格：100mL
英文名：RNAhold Blood RNA non-freezing preservation solution
产地：国产|进口
编号：BTN111202
由于血液富含RNase，因此血液RNA非常容易降解，是临床分子生物学研究中的一个棘手的问题。为解决此问题，本公司在非冻型组织RNA保存液的基础上，开发了本产品。

产品特点：
1. 能快速渗透到新鲜血液细胞内，抑制RNA分子的降解。保存的血液RNA常温可放置3天，4℃可放置5天，-20℃可放置3个月。
2. 操作简单，直接将本产品和新鲜血液细胞沉淀按比例混合即可。
3.适用于人新鲜血和哺乳动物新鲜血液，不适用于陈旧血液和冻凝血液，也不适用于禽类血液和其他动物血液。
4. 重复性好，效果跟进口同类产品相当。
5. 保存的样品可直接用本公司血液RNA提取试剂盒提取RNA。

储存条件：室温运输及保存，有效期两年。

使用方法：
注意：RNase污染无处不在，最好用本公司的高效无毒固相RNase清除剂处理RNA工作区域，千万不要使用烷基化试剂DEPC(相当于芥子*(代"气"))。

一:以白细胞为材料的保存方法(此法效果好于全血保存法)
1.室温1500-2000 g离心新鲜抗凝血液10-15分钟，最上层为血浆，最下层为红细胞，中间层为膜状的、含白细胞的Buffy Coat(含白细胞多的血液此层可能很厚)。
2. 吸出血浆后，小心将中间的白细胞层吸出(允许污染部分红细胞)到新的离心管中，加入5-10倍体积的本产品，混匀后放常温(不超过30℃)保存不超过3天或者放-20℃保存3月(放-20℃前需要现在4℃放置过夜，然后再离心去除保存液，最后再把细胞沉淀放到-20℃。如果直接放入-20℃，冰晶会刺破白细胞，释放出其中的RNA，在后续实验去掉上清时会丢失)。

二：以EDTA抗凝全血为材料的保存方法
3. 将血液取到EDTA抗凝管中后，迅速将0.5mL血液与1.5mL本产品混合，充分颠倒混匀，然后放常温(不超过30℃)保存不超过3天或者放-20℃保存3月(放-20℃前需要现在4℃放置过夜，然后再离心去除保存液，最后再把细胞沉淀放到-20℃。如果直接放入-20℃，冰晶会刺破白细胞，释放出其中的RNA，在后续实验去掉上清时会丢失)。

三：血液RNA的提取(本产品不含RNA提取试剂。此处以本公司的跟Trizol相当的动物RNA提取试剂盒操作步骤为参考。用户也可以使用其他RNA纯化试剂)
4. 提取RNA时，如果保存的白细胞在-20℃，则需要先室温化冻，如果保存在常温或4℃，则直接使用。
5. 取1.8mL混合液到新的2mL离心管中，5000g室温离心1分钟。
6.小心吸弃上清液(本产品)，细胞将形成沉淀(如果样品时全血，沉淀中将含有大量血液蛋白)。注意：上清一般会很浑浊，一定要尽可能弃尽。有时沉淀上面有白色晶体出现，属于正常现象。
7.在细胞沉淀中加入动物RNA提取试剂盒 1mL溶液A，剧烈震荡30秒(不能感觉到震荡即可，一定要看见管底液体旋转起来，否则只是液体表面的震动，下同)。震荡后颠倒几次看溶液是否均匀，如果有颗粒状物体说明还需要震荡裂解。
8.室温放置5分钟以使细胞充分裂解。
9. 将0.2mL自备的*仿加入到离心管中，剧烈震荡30秒。
10. 12000～15000g4℃离心3分钟。一般上清为无色的水相(含RNA，约0.5-0.9mL)；中间层为白色，含有DNA、蛋白质和其他细胞破碎物，不要触及；下层为有机相，一般呈深红色。注意：有时水相比重大于有机相，出现反相现象，此时应该取下面的水相。
11.小心将水相转移到另一自备的1.5mL塑料离心管中。如果水相超过0.75mL，则需要分成2管，否则在下步没法加入等体积的异丙醇。
12. 加入等体积的异丙醇到水相中，充分颠倒混匀。
13. 12000～15000g4℃离心10分钟沉淀RNA。
14. 吸弃上清。注意：如果离心后出现两个相，则需要吸弃上面的一相，然后在下相(含RNA)中加入一倍体积的超纯水和一倍体积的异丙醇，混匀后12000～15000g4℃离心10分钟沉淀RNA，吸弃上清。
15. 将75% RNase-free乙醇加入到RNA沉淀中，震荡几秒后12000～15000g4℃离心1分钟。
16. 弃上清
17. 12000～15000g4℃离心半分钟，用移液枪去除残留的液体。
18. 将20-50μL DEPC处理的水加入到沉淀中并吹打溶解，立即用于下述完整性、产率和纯度的检测，也可直接用于后续RT-PCR等试验或存放于-80℃待用。

四: RNA的检测(列出步骤仅供参考，本产品不提供相关产品)
19. RNA完整性的电泳检测：强烈建议用户使用甲醛变性胶进行RNA电泳，因为非变性胶中单链RNA分子会自生折叠成各种形状，尤其不能使用DNA上样液，因为没有经过去RNase处理。
20. RNA产量产率测定：将5-10μl RNA用TE缓冲液(pH8.2)稀释10倍后检测其在OD260的光吸收。通过光吸收可以得出RNA浓度(1 OD260的RNA=40μg/mL)，进而计算出RNA的产量(浓度X体积)和产率(RNA产量/组织用量)。人血RNA产率一般为2-5μg/mL。
21. RNA纯度测定：无污染的总RNA的OD260/OD280一般在2.0左右(具体数值与其碱基组成和溶液成分等多种因素有关)，高于此范围则分别表示样品可能有蛋白质污染，但一般不影响RT-PCR等反应。


非冻型血液RNA保存液特价促销极具性价比，此外，我公司正火爆促销以下产品：
BL1124 EDTA抗原修复液(1×)
BL1293 考马斯亮蓝快速染色液
ARB11223 人细胞角蛋白21-1片段(CYFRA21-1)检测服务 Human cytokeRatin fragment antigen 21-1,cyfra21-1 ELISA KIT
BL0794 牛IgG抗原(干粉)
ARB13615 兔子细胞间粘附分子2(ICAM-2/CD102)血清中含量检测 Rabbit intercellular adhesion molecule 2,icam-2 ELISA KIT
3326-32-7 异硫*酸荧光素 FITC
Tris-Triton-NaCl缓冲液(pH9.0)   500ml
ARB13744 兔碱性磷酸酶(ALP)Elisa定量检测 Rabbit alkaline phosphatase,alp ELISA KIT
乙二*(代"胺")四乙酸二**盐 Coumarin 23411-34-9
变旋酶 Streptozotocin 9031-76-9
E0610 抗凝裂解山羊血(无菌)
PIPES溶液(pH6.8)  1mol/L 100ml
BL0952 胶体金标记羊抗兔IgG抗体
氧钒酞菁 Astaxanthin 13930-88-6
ARB12117 大鼠可溶性血管内皮细胞蛋白C受体(sEPCR)elisa检测说明书 Rat soluble endothelial protein c receptor,sepcr ELISA KIT
BTN81225 Tricine-SDS-PAGE配胶液 Tricine-SDS-PAGE Gel Buffer
13114-27-7 Zeatin  玉米素
雷帕霉素 Guanidine hydrochloride 53123-88-9
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BTN130911 miRNA cDNA第一链合成试剂盒 miRNA First Strand cDNA Synthesis Kit
RN0101 TRIpure Reagent 总RNA提取试剂
ARB11253 人胃泌素细胞抗体(GCA)含量分析 Human gastrin cell antibody,gca ELISA KIT
BL1216 甲**(代"胺")蓝溶液
Gill苏木素染色液(Gill No.3)   100ml|500ml
ARB13059 小鼠肾上腺髓质素(ADM)ELISA代测服务 Mouse adrenomedullin,adm ELISA KIT
606-68-8 NADH Na2 还原型辅酶Ⅰ二*
ARB10052 人Apelin Elisa方法检测 Human apelin ,apELISA KIT
D0302 脱纤维绵羊血(无菌 袋装) 500ml/1000ml/2000ml
RN2501 RNAblood 超纯全血总RNA快速提取试剂盒
增强型抗荧光淬灭封片剂   5ml|10ml
ARB10253 人乙醇脱*酶(ADH)Elisa定量检测 Human alcohol dehydrogenase,adh ELISA KIT
ARB10546 人皮质酮(CS)含量测试 Human corticoserone ,cs ELISA KIT
F040322 绵羊IgG抗原 Sheep IgG
ARB11157 人周期素依赖性激酶4(CDK-4)ELISA代测服务 Human cyclin-dependent kinase 4,cdk-4 ELISA KIT
硫*(代"酸")铝 PMMA 7784-31-8
匹马霉素 Phytagel 7681-93-8
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·细菌膜蛋白质微量提取试剂盒
编号：BTN100929
英文名称：Bacterial Membrane Protein Miniprep Kit
规格：50次
本试剂盒是基于超速离心的快速提取细菌膜蛋白的试剂盒。其原理是裂解细胞后，通过超速离心分离出细胞膜和附着的蛋白质。

产品特点：
1.一步式分离细胞膜和膜蛋白，密度梯度离心法简单快捷。
2. 膜蛋白纯度高，能够去除各种胞浆蛋白的污染，也能去除松散附着在细胞膜上的蛋白，所得膜蛋白主要是整合蛋白。
3. 膜蛋白完整性好，主要是由于实际中有抑制蛋白酶成分。
4. 回收效率高，一般能得到相当于总蛋白量6%的膜蛋白。
5.可用于E.coli，S.typhimurium，K.aerogens，P.aeruginosa，C.crescentus等细菌。

试剂盒组成：

 

成分	规格
溶液A	125ml
溶液B	25ml
溶液C	250ml
DNase I干粉	3.5mg
说明书	1份

储存条件：低温运输和保存，DNase I 需要低温保存。有效期一年。

使用方法：
准备：第一次使用本试剂盒时需要将所有DNase I干粉倒入溶液B中，轻柔颠倒使DNase干粉溶解。未用完的部分需要放-20℃保存，最好在一个月内完，否则DNase 将逐渐失去活性。此外，最好在实验前1小时将溶液B冰浴预冷。

用法一：小量制备(主要用于上样量比较小的SDS-PAGE电泳等实验)
1．收集20-40mL 过夜培养的细菌饱和培养液(OD420在1.5左右即可)，2500g室温离心10分钟后弃上清。
2．加入2mL溶液A，轻柔吹打，将细菌重悬于溶液A中。
3．2500 g室温离心10分钟后弃上清。
4．加入0.5mL溶液B(必须已经提前加入了DNase I干粉)，轻柔吹打使细菌重悬。注：如果细菌起始量没有20-40mL，溶液A的用量可以等比例降低。重悬在溶液A中的细菌可以放-80℃长期保存。
5．用超声或French Press方法裂解细胞。如果用French Press方法，则需要处理至少两次，每次的压力为9.65×10E7(=14000 psi)。注意：不论用哪种裂解方法，都必须在显微镜下检查细菌是否已经裂解，否则还需要重复细菌裂解过程，直到80%以上的细菌都裂解为止。
6．2500g室温离心8分钟后小心转移上清到新的10mL-15mL塑料离心管中(如Beckman Optima 台式超速离心机离心管)，弃沉淀(未破裂细胞)。
7．在上清(细菌裂解液)中加入5mL预冷的溶液C，轻柔颠倒混匀后冰浴放置30-60分钟。其间可以轻柔颠倒混匀3-5次。
8．用 Bechman Optima 台式超速离心机115000g 4℃离心60分钟。也可以使用其他冷冻超速离心机，但离心力应该一致，否则有可能得不到沉淀。
9．小心移弃上清，在沉淀中加入0.2mL溶液A，充分吹打混匀。
10．用Beckman Optima 台式超速离心机 115000g 4℃离心60分钟。也可以使用其他冷冻超速离心机，但离心力应该一致，否则有可能得不到沉淀。
11．小心移弃上清，所得沉淀放-20℃长期保存，也可以直接加入0.1mL自备的，跟后续实验兼容的缓冲液(如1×SDS-PAGE上样液中，可从本公司购买)，所得膜蛋白的浓度将在1mg/mL左右。

用法二：大量制备(主要用于上样量比较大的2D电泳等实验)
1．收集200-400mL 过夜培养的细菌饱和培养液(OD420在1.5左右即可)，2500 g室温离心10分钟后弃上清。
2．加入20mL溶液A，轻柔吹打，将细菌重悬于溶液A中。
3．2500 g室温离心10分钟后弃上清。
4．加入5mL溶液B(必须已经提前加入了DNase I干粉)，轻柔吹打使细菌重悬。注：如果细菌起始量没有200-400mL，溶液A的用量可以等比例降低。重悬在溶液A中的细菌可以放-80℃长期保存。
5．用超声或French Press方法裂解细胞。如果用French Press方法，则需要处理至少两次，每次的压力为9.65×10E7(=14000 psi)。注意：不论用哪种裂解方法，都必须在显微镜下检查细菌是否已经裂解，否则还需要重复细菌裂解过程，直到80%以上的细菌都裂解为止。
6．2500g室温离心8分钟后小心转移上清到干净的玻璃烧杯中，弃沉淀(未破裂细胞)。
7．在上清(细菌裂解液)中加入50mL预冷的溶液C，轻轻在冰浴中搅拌混匀30-60分钟。注：可以在大烧杯中装冰，然后将装有样品的小烧杯放入，在放入干净的搅拌子，以最低速度搅拌。
8．用 Beckman Type 55.2 Ti转头 115000g 4℃离心60分钟。也可以使用其他冷冻超速离心机，但离心力应该一致。
9．小心移弃上清，在沉淀中加入2mL溶液A，充分吹打混匀。
10．用Beckman Type 55.2 Ti转头 115000g 4℃离心60分钟。也可以使用其他冷冻超速离心机，但离心力应该一致。
11．小心移弃上清，所得沉淀放-20℃长期保存或溶解在1mL自备的，跟后续实验兼容的缓冲液(如1×等电点电泳上样液，可从本公司购买)，所得膜蛋白的浓度在1mg/mL左右。

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