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- 详细信息
- 技术资料
- 库存:
936
- 英文名:
Pfu DNA Polymerase
- 保质期:
长期
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
- 保存条件:
-20℃
特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
百奥莱博专业生产销*(代"售")BTN51207型Pfu DNA聚合酶大量库存促销,我公司供应的分子生物学试剂品类齐全,且具有优势价格,欢迎新老客户垂询订购。
名称:BTN51207型Pfu DNA聚合酶大量库存促销
编号:BTN51207
规格:100U
品牌:百奥莱博
英文名:Pfu DNA Polymerase
Pfu DNA Polymerase是Pyrococcus furiosis(激烈火球菌)DNA Polymerase基因在大肠杆菌中表达并经多次过柱纯化分离而得。可用于高保真PCR、长链PCR的扩增,还可以用于DNA片段的粘转平反应。
产品特点:
1.它具有3´-5´聚合酶活性,跟常用的Taq DNA聚合酶一样,能够用于PCR反应。
2.与Taq DNA Polymerase不同的是,它还具有3´-5´外切酶活性,能纠正DNA扩增过程中产生的碱基错配。
3.其出错率最低的是具有校正功能的耐高温DNA Polymerase中最低的。
4.Pfu DNA聚合酶比普通Taq DNA聚合酶热稳定性更好,95℃ 1小时仍维持90%以上活性。
产品组成:
| 成分 | 规格 |
| Pfu DNA聚合酶(3U/μL) | 100U |
| 10×Pfu Buffer | 0.1ml |
| 说明书 | 1份 |
储存条件:低温运输,-20℃保存。
使用方法:(以λDNA为模板进行PCR扩增反应为例)
1.按下列组份配制PCR反应液
| Pfu DNA聚合酶(3U/μL) | 0.5-1μL |
| 10×Pfu Buffer | 5μL |
| dNTP Mixture(各2.5mM) | 4μL |
| 模板DNA | 见下 |
| 引物1(10 uM) | 1μL |
| 引物2(10 uM) | 1μL |
| 灭菌蒸馏水 | Up to 50μL |
推荐50μL PCR反应体系中模板DNA推荐使用量
| 哺乳动物基因组DNA | 0.5-1μg |
| 酵母基因组DNA | 5-500ng |
| 细菌基因组DNA | 0.5-50ng |
| 质粒DNA | 5-500pg |
| PCR回收片段 | 1-100pg |
2.PCR反应条件
以λDNA为模板,扩增1kbp的DNA片段的PCR反应条件如下:
| 温度 | 时间 | 循环数 |
| 94℃ | 3min | |
| 94℃ | 30sec | 30~50循环数 |
| 55℃ | 30sec | |
| 72℃ | 2min | |
| 72℃ | 5min |
注:PCR反应条件视模板、引物等的结构条件不同而各异。在实际操作中需根据模板、目的片段的大小、碱基序列和引物的长短等具体情况,设定最佳的反应条件(温度、时间等)。
注意事项:
PCR的反应液请在冰中配制,然后置于PCR反应仪上进行PCR反应。这种冷启动法可增强PCR扩增的特异性,减少PCR过程中的非特异性反应,能得到良好的PCR结果。
10×Pfu Buffer的组成:200mM Tris-HCl(pH8.8),100mM KCl,100mM(NH₄)2SO₄,500mM MgSO₄
活性定义:用活性化的大马哈鱼精子DNA作为模板/引物,在74℃,30分钟内,摄入10nmol的全核苷酸为酸性不溶物的活性定义为1个活性单位。
质控标准:
1.SDS-PAGE 考马市亮蓝染色无杂带污染。
2.无核酸内切酶活性检测(切刻酶活力)、核酸外切酶活性、核酸酶活性检测。
关于BTN51207型Pfu DNA聚合酶大量库存促销的更详细说明,请致电我公司咨询,我们将以最饱满的热情为您提供解答,此外,我公司专业供应下列产品:
PY02-319 3%*化*MR-VP培养基 250克
BL0876 兔抗人IgG免疫血清 0.5ml
F030234 HRP标记山羊抗人IgG抗体 HRP*Polyclonal Goat Anti-Human IgG
SJ0368 Lipopolysaaah aricles 脂多糖
ARB12606 大鼠脱*表雄酮(DHEA)酶标法分析 Rat dehydroepiandrosterone,dhea ELISA KIT
ARB12709 大鼠磷脂酶A2(PL-A2)酶免分析 Rat phospholipidase a2,pl-a2 ELISA KIT
PY02-018 克氏双糖铁琼脂 250克
ARB13628 兔子神经营养因子3(NT-3)酶免分析 Rabbit neurotrophin 3,nt-3 ELISA KIT
5486-84-0 固蓝BB盐 Fast Blue BB Salt
ARB10039 人I型胶原N末端肽(NTX)ELISA检测服务 Human cross linked n-teloPeptide of type i collagen,ntx ELISA KIT
D-a-*基己二酸 Phloxine B 7620-28-2
001009 驴血清
BL1060 乙酰胺琼脂
ARB13781 豚鼠内皮素1(ET-1)elisa检测 Guinea pig endothelin 1,et-1 ELISA KIT
D2000 plus II DNA ladder 100次
ZCQX01 兔全血 100ml
BTN51207型Pfu DNA聚合酶大量库存促销关键词:Pfu DNA聚合酶,BTN51207,Pfu DNA Polymerase
·包涵体中量纯化试剂盒
编号:BTN90509
英文名称:Inclusion Body Midiprep Kit
规格:5次
本产品是我们公司包涵体微量纯化试剂盒(BTN90508)的中量提取升级产品,用于中量,快速的提取高质量的包涵体。
产品特点:
1.中量提取,一次可以处理30-50mL的菌液,一次中量提取相当于10-20次微量提取。
2.操作简单快速,整个过程只要四十分钟左右。
3.大规模提取,可以在15-50mL离心管中完成。
4.能有效去除包涵体中的细胞壁和细胞膜等非重组蛋白成份,使重组蛋白所占比重达到60%以上。
5.细胞裂解通过非离子洗涤剂的化学裂解法,裂解更加温和。
6.得到的包涵体可以用于重折叠。
试剂盒组成:
| 成分 | 规格 |
| 溶液A | 25ml |
| 溶液B | 250ml |
| 包涵体溶解液 | 25mL |
| 溶菌酶 | 3g |
| Benzonase(1U/μL) | 125μl |
| 说明书 | 1份 |
储存条件:常温运输及保存,但溶菌酶和Benzonase需要低温运输,-20℃保存,有效期一年。
使用方法:
准备工作:
将3g溶菌酶全部加入到25mL溶液A中溶解,然后根据每次的需要量(一次大量提取需要5mL)分成1mL/只放-20℃待用。每次只取用一管含溶菌酶的溶液A。
包涵体中的重组蛋白一般比溶解状态中的蛋白质更能够抵抗微量内源性蛋白水解酶的降解,如果实验发现得到的重组蛋白确有降解,则需要在溶液A中新鲜加入自备的蛋白酶抑制剂混合物(BTN80808)。
一、细胞裂解和包涵体的纯化:
1.在蛋白诱导期结束时,转移30mL菌液到一个干净的塑料离心管中。
2.5000-7,000rpm室温离心3分钟,小心弃上清。
3.加入5mL含溶菌酶的溶液A重悬细胞。
4.室温放置10-20分钟裂解细菌,其间可以用手轻弹离心管混匀。
5.-20℃冷冻至凝固。凝固有利于裂解细菌,所以一定要凝固到细菌溶液变成固体。
6.室温水浴解冻。如果裂解充分,细菌释放出的DNA将使裂解物十分粘稠。如果不粘稠,说明裂解不充分,需要重复3-6步,否则完整细菌将和包涵体一起沉淀,影响包涵体的纯度。如有条件最好在显微镜下检查细菌是否充分裂解。
7.加入25μL的Benzonase(1U/μL),脱色摇床上摇晃直到裂解液不再粘稠,一般需要30分钟左右(检查方式是将裂解物倾倒转移到另一离心管中,在转移过程中看其是否粘稠)。
8.5000-7,000rpm 4℃离心5分钟,小心收集上清。上清含有以可溶形式存在的重组蛋白,可以保留作为SDS-PAGE对照样品。
9.将沉淀(主要由包涵体构成)悬浮在25mL的溶液B中,轻柔混匀后室温放置5分钟。
10.5000-7,000rpm 4℃离心10分钟,小心收集上清,可以作为包涵体第一次洗涤的对照样品。
11.将沉淀(主要由包涵体构成)悬浮在25mL的溶液B中,轻柔混匀后室温放置5分钟。
12.5000-7,000rpm 4℃离心10分钟,小心收集上清作为包涵体第二次洗涤的对照样品。一般洗涤两次就能够得到足够纯净的包涵体,如果需要更多洗涤,需要用户单独购买包涵体洗涤液(溶液B)。
13.得到的沉淀即为包涵体,可以长期放置在冰箱待用或直接进入包涵体的溶解步骤。
二、包涵体的溶解:
1.在包涵体沉淀中加入5mL包涵体溶解液,用枪头充分吹打后漩涡震荡。如果低温放置,包涵体溶解液会产生沉淀,必须45-65℃溶化并混匀后才能使用。
2.室温放置1小时使蛋白质充分溶解。
3.20000g 4℃离心20分钟,小心收集上清,保留不溶性沉淀。注意:检查离心管能否承受此离心力。SDS-PAGE检查是否大部分重组蛋白都在上清中。如果没有,说明包涵体没有完全溶解,需要用适当增加包涵体溶解液的用量。
4.得到的蛋白质溶液可以用于复性等试验。由于不同的蛋白质有不同的最佳复性条件,所以本公司不能提供统一的复性溶液,需要用户自己摸索。
注意:包涵体纯化过程中引入了溶菌酶、DNase和RNase等外源蛋白质,在SDS-PAGE分析时可能有额外条带出现。
BTN51207型Pfu DNA聚合酶大量库存促销关键词:Pfu DNA聚合酶,BTN51207,Pfu DNA Polymerase
·多聚甲醛-*氧化*固定液
编号:BTN131283
英文名称:Polyoxymethylene NaOH Fixative Solution
规格:250mL
本产品为甲醛、磷酸二**、*氧化*混合液,pH为7.2-7.4。本固定液适用于光镜和电镜免疫细胞化学研究,用于免疫电镜时最好加入少量新鲜配制的戊二醛。该固定液条件温和,组织固定于该液中,4℃保存数月,仍可获得满意的染色效果。0-4℃条件下固定时间为15分钟-2小时。
储存条件:常温运输和保存,有效期一年。
·糖原干粉(分子生物学级)
编号:BTN131189
英文名称:Glycogen Powder
规格:1g
本产品为分子生物学级糖原干粉。不含DNase,RNase,可以用作沉淀DNA或RNA的辅助沉淀剂。
储存条件:室温运输和保存,有效期一年。
·地塞米松
编号:BTN131234
英文名称:Dexamethasone DXM Solution
规格:1mL
本产品为浓度为50mg/mL的地塞米松乙醇溶液。地塞米松(Acido*(代"c")ont,Deronil,Dexacortal,dexametona)又名*美松、*甲强地松龙、德沙美松。分子式:C22H29FO5,分子量:392.5,CAS号:50-02-2。溶于乙醇。地塞米松属于糖皮质类激素,具有抗炎、抗过敏、抗风湿、免疫抑制等作用。
储存条件:低温运输,-20℃避光保存,有效期6个月。
·*霉素溶液
编号:BTN60207
英文名称:Chloramphenicol Solution
规格:10mL
本产品是浓度为25mg/mL的*霉素溶液,可以加入到细菌液体或固体培养基中培养含*霉素抗性基因的细菌。
作用原理:*霉素通过与细菌核糖核蛋白体的50S亚基23S rRNA的A2451和A2452位点结合,抑制peptidyle transferase活性而阻断蛋白质的合成,最后抑制细菌生长。
抗性机制:抗性基因cat特异性表达*霉素乙酰转移酶(chloramphenicol acetyltrasnferase),它通过乙酰化*霉素而使之不能与核糖体结合。
储存条件:低温运输,-20℃避光保存,有效期6个月。
北京百莱博科技有限公司是工具酶产品的专业生产供应销*(代"售")商,恭候您的咨询选购BTN51207型Pfu DNA聚合酶大量库存促销。
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