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- 百奥莱博
- BTN120402-SUX
- 北京
- 2025年07月12日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
839
- 英文名：
LIC Cloning Kit for PCR
- 保质期：
一年
- 供应商：
北京百奥莱博科技有限公司
- 保存条件：
-20℃
特别声明：本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品，严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
百奥莱博专业生产销*(代"售")PCR专用LIC克隆套装价格，我公司供应的分子生物学试剂品类齐全，且具有优势价格，欢迎新老客户垂询订购。
名称：PCR专用LIC克隆套装价格
产地：国产|进口
规格：1μg
英文名：LIC Cloning Kit for PCR
品牌：百奥莱博
编号：BTN120402
本产品就是基于LIC原理开发的即用型载体。LIC就是不依赖于连接的克隆技术(Ligation-Independent Cloning),它是继限制性内切酶切/连接酶克隆方法后出现的第二代DNA克隆技术，它效率高,尤其适用于大规模分子克隆，其原理如下：
产品特点：
1. 操作简单,一管式一步反应,只需加入插入片段即可,客户不需要购买任何额外的酶。
2.时间短,整个过程只要15分钟。
3.高效,比常用的AT克隆效率更高,阳性率接近于100%。
4. 克隆方向和位置精准和可控,适合表达型克隆工作。
5. 便于自动化,适合高通量克隆。
6.适用于长片段克隆。
产品组成：
| 成分 | 规格 |
| LIC载体(50μg/μL) | 1μg |
| 溶液A | 10μl |
| 溶液B | 150μl |
| 阳性对照插入片段 | 8μl |
| 说明书 | 1份 |
储存条件：-20℃运输及保存，有效期一年。
一. PCR引物设计,合成和PCR反应
1. 按常规方法设计PCR引物,只是必须在一条引物5´端再加上GGCGGCCGCGGTAC序列,在另一条引物5´端加上GGCGCCGGCGGTAC序列。此序列决定克隆的方向,如果不在乎方向,可以随机组合。
2. 所用引物最好为HPLC纯化获得。注意：如果购买本公司产品,免费合成LIC引物一对。
3. 按常规的方法进行PCR,最好使用高保真DNA聚合酶。
4. 按常规的胶回收的方法回收PCR片段。注意：必须去除残余的dNTP和PCR引物,否则会极大降低LIC效率。
5. 对PCR片段电泳定量,即电泳后通过肉眼比较PCR片段和DNA Marker的相对强度,通过DNA Marker条带的浓度(一般商品化的DNA Marker每条带的浓度都是已知的)推测出PCR片段的浓度。
二. PCR片段与载体退火
1.在纯化的2μL PCR产物中加入0.4μL溶液A、2μL载体(100ng)以及5μL溶液B,混合。
注意：PCR产物跟载体的摩尔数比例最好是1：1。
2.室温放置5分钟。注意：保温时间长短很关键,不要轻易延长或缩短。
3.在PCR仪器上按75℃ 10分钟,然后放冰上或-20℃待用。
三.转化
1. 按常规方法进行转化。
2. 按菌落PCR方法筛选,可选用我公司的菌落PCR试剂盒(BTN50901)。进行快速筛选,需要T7和SP6 RNA聚合酶启动子引物。
关于PCR专用LIC克隆套装价格的更详细说明，请致电我公司咨询，我们将以最饱满的热情为您提供解答，此外，我公司专业供应下列产品：
PY08-057 十六烷三甲基*化铵琼脂平板 9CM 10皿/盒，用于绿脓杆菌的选择性分离培养
CYB162029 羊抗人IgG、A、M(抗血清) 0.5ml
F040322 绵羊IgG抗原 Sheep IgG
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C1101 大牛血清(无菌过滤)
ARB13844 猪口蹄疫(FMD)Elisa定量检测
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2-*-1,3-二甲基咪唑啉六*磷酸盐 BT 164298-27-5
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SJ0374 DL-Malic acid DL-苹果酸
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钯碳加*催化剂 1,8-Dihydroxyanthraquinone 7440-05-3
*酚红指示剂 100ml
PCR专用LIC克隆套装价格关键词：BTN120402,PCR专用LIC克隆套装,LIC Cloning Kit for PCR
邻*二甲醛 Monoacetone glucose 643-79-8
Luxol Fast Blue髓鞘染色液 3×50ml
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变色酸二*盐 Kainic acid monohydrate 5808-22-0
BTN3080 植物RNAOUT Plant RNAOUT
110-26-9 N,N-Methylene Bisacrylamide 甲叉双丙*(代"烯")酰胺
无机磷检测试剂盒(紫外分光光度微板法) 100T
美满霉素 Anion exchang resin 13614-98-7
ARB10938 人低氧诱导因子1α(HIF-1α)含量测试 Human hypoxia-inducible factor 1α,hif-1α ELISA KIT
BL0974 牛外周血淋巴细胞分离液
DAPI染色液(5ug/ml,含封片剂) 10ml
BOC-D-*丙*酸 Cedarwood oil 18942-49-9
ARB13262 小鼠催乳素(PRL)酶标法分析 Mouse prolactin,prl ELISA KIT
PCR专用LIC克隆套装价格关键词：BTN120402,PCR专用LIC克隆套装,LIC Cloning Kit for PCR
F010106 小鼠抗His-tag抗体 Monoclonal Mouse Anti-His Tag
ARB11552 人恙虫病抗体IgG(STA-IgG)酶标法分析
山梨酸 4-Bromobiphenyl 110-44-1
PY08-082 胰蛋白胨大豆琼脂平板 9CM 10皿/盒，用于药品中需氧微生物总数测定
柠檬酸铵 dNTPs 3458-72-8
丙*(代"烯")酰胺溶液(30%, 29:1) 100ml
BL0943 生物素化羊抗大鼠IgG抗体
ARB10678 人血管紧张素原(AGT)酶标法分析 Human angiotensinogen,agt ELISA KIT
全反式维A酸 Diphenylcartazide 302-79-4
ARB13421 鸡β干扰素(IFN-β/IFNB)Elisa定量检测 Chicken interferon β,ifn-β/ifnb ELISA KIT
ARB12444 大鼠骨碱性磷酸酶(BALP)Elisa分析 Rat bone alkaline phosphatase,balp ELISA KIT
2-甲氧基*甲*(代"酸") IUPAC 579-75-9
HC0139 血球计数板
*化*溶液(无菌) 1mol/L|2.5mol/L 500ml
BTN100805 酚-*仿-异戊醇混合液 Phenol-Chloroform-Isoamylol
ARB13942 猪促甲状腺素释放激素(TRH)含量测试 Porcine thyrotropin-releasing hormone,trh ELISA KIT
ARB13142 小鼠总胆汁酸(TBA)酶标法分析
普鲁兰糖 1-Thioglycerol 9057-02-7
ARB11817 人膀胱肿瘤抗原(BTA)Elisa定量检测 Human bladder tumor antigen,bta ELISA KIT
ARB13382 牛蛋白酶A(ProteAse A)ELISA代测服务
BL1347 BCIP/NBT显色试剂盒
北京百莱博科技有限公司是克隆与表达产品的专业生产供应销*(代"售")商，恭候您的咨询选购PCR专用LIC克隆套装价格。
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文献和实验) 克隆困难怎么办？ 对于大片段载体构建实验而言，难点在于片段扩增效率低、重组 / 连接困难、质粒稳定性差、容易发生断裂等。需针对这些痛点，从技术路线选择、实验细节优化两方面制定策略，具体方案如下： ①建议首先选择「分段克隆 + 拼接」 策略，降低连接难度； ②大片段克隆的关键在于长片段的扩增，所以需要从源头保证实验成功率，即保证模板完整度，在扩增前确保模板未发生降解；其次优化 PCR 体系，比如选择长片段专用 PCR 酶，通过梯度测试选择最佳模板上样量及退火温度等； ③避免高拷贝载体（如 pUC
引物二聚体形成的几率，但是为了下一步的操作就要作出适当的“牺牲”。 很多时候PCR只是初步克隆，之后我们还需要将目的片段亚克隆到各种载体上，那么就需要在PCR这个步骤为下一步的操作设计额外的碱基。以下总结一些为了亚克隆所要设计的序列。 （1）添加限制性内切酶酶切位点 添加酶切位点是将PCR产物进行亚克隆使用得最多的手段。一般酶切位点是六个碱基，另外在酶切位点的5’端还需要加2～3个保护碱基。但是不同的酶需要的保护碱基数目是不相同的，例如：SalⅠ不需要保护碱基，EcoRⅤ需要1个，NotⅠ
，但是为了下一步的操作就要作出适当的“牺牲”。 很多时候PCR只是初步克隆，之后我们还需要将目的片段亚克隆到各种载体上，那么就需要在PCR这个步骤为下一步的操作设计额外的碱基。以下总结一些为了亚克隆所要设计的序列。 a 添加限制性内切酶酶切位点 添加酶切位点是将PCR产物进行亚克隆使用得最多的手段。一般酶切位点是六个碱基，另外在酶切位点的5’端还需要加2～3个保护碱基。但是不同的酶需要的保护碱基数目是不相同的，例如：SalⅠ不需要保护碱基，EcoRⅤ需要1个，NotⅠ需要
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